Вплив режимів кріоконсервування шкіри на склад водно-сольових екстрактів і їх ефективність при різних ураженнях шкіри - Автореферат

Одним з напрямів в клітинній терапії травм шкіри може бути використовування екстрактів нормальної шкіри, які містять біологічно активні речовини. Проте велике функціональне навантаження, несприятлива дія факторів зовнішнього середовища можуть приводити до різного роду травматизації шкіри, а також до розвитку в ній патологічних процесів. У звязку з цим є передумови, які дозволяють припустити, що екстракти, одержувані з нормальної кріоконсервованої шкіри, можуть містити біологічно активні речовини, необхідні для регуляції процесів загоєння та ефективнішої терапії патологічних процесів. Не вивчено також вплив біологічно активних речовин, які одержані із використанням режимів заморожування-відігріву зі шкіри, на динаміку запального і регенераційного процесів в пошкодженій шкірі. Встановлено, що водно-сольові екстракти містять низькомолекулярні пептиди і їх концентрація достовірно більша в екстракті, який отримано з фрагментів шкіри після кріоконсервування в присутності 10%-го ПЕО-1500 з повільними швидкостями охолодження в порівнянні з екстрактом, отриманим з нативних фрагментів шкіри.При моделюванні опікових ран тварини були розділені на 6 груп. 1-а група - контрольна, тваринам уводили фізіологічний розчин, 2-а група - тварини, яким уводили екстракт плаценти офіцинальний (Епл), 3-я група - тварини, яким уводили ЕШНП. У тварин, яким уводили ЕШНП, рана набувала рівномірно рожевого забарвлення, набряклість зменшувалася, відмічалася значна контракція рани. У препаратах 2-ї групи тварин джерелом епітеліального регенерату виявлялися базальні клітини багатошарового епітелію краю рани. У тварин 3-ї групи в препаратах із центру рани виявляли незрілу грануляційну тканину, покриту струпом.Таким препаратом може бути екстракт шкіри новонароджених поросят, який було одержано з кріоконсервованих фрагментів шкіри, з високим вмістом низькомолекулярних пептидів. Експериментально визначені умови одержування ЕШНП з високим вмістом низькомолекулярних речовин пептидної природи: заморожували фрагменти шкіри новонароджених поросят під захистом 10% ПЕО-400 або ПЕО-1500 з повільними швидкостями охолодження, а також без застосування кріопротектора з охолоджуванням із швидкістю 8000°С /хв. Показано, що концентрація низькомолекулярних пептидів в екстракті, що був одержаний з кріоконсервованого матеріалу, перевищує концентрацію низькомолекулярних пептидів в екстракті із нативних фрагментів шкіри. При термічних пошкодженнях шкіри місцеве застосування ЕПЛ офіцинального і ЕШНП стимулює регенерацію епітеліального пласта з утворенням усіх нормальних структур шкіри, в порівнянні з контрольною групою, де регенерація була неповною з утворенням рубця, а відновлення нормальної будови шкіри спостерігалося на межі із здоровою тканиною.

Основний зміст роботи

1. Одним з напрямів в клітинній терапії може бути використовування екстрактів нормальної шкіри, які містять біологічно активні речовини. Таким препаратом може бути екстракт шкіри новонароджених поросят, який було одержано з кріоконсервованих фрагментів шкіри, з високим вмістом низькомолекулярних пептидів.

2. Експериментально визначені умови одержування ЕШНП з високим вмістом низькомолекулярних речовин пептидної природи: заморожували фрагменти шкіри новонароджених поросят під захистом 10% ПЕО-400 або ПЕО-1500 з повільними швидкостями охолодження, а також без застосування кріопротектора з охолоджуванням із швидкістю 8000°С /хв. Відігрівання проводили на водяній бані при температурі 38°С, інкубація у фізіологічному розчині 60 хв. Показано, що концентрація низькомолекулярних пептидів в екстракті, що був одержаний з кріоконсервованого матеріалу, перевищує концентрацію низькомолекулярних пептидів в екстракті із нативних фрагментів шкіри.

3. Кріоконсервування фрагментів шкіри новонароджених поросят з використанням ПЕО-400 і ПЕО-1500 в концентрації 10%, з повільними швидкостями охолодження (1°С/хв) збільшує вміст пептидів у водно-сольовому екстракті. Швидке заморожування фрагментів шкіри новонароджених поросят без кріопротекторів забезпечує такий же вихід пептидів у водно- ольовий екстракт.

4. Речовини пептидної природи, що містяться в ЕШНП, проявляють регуляторні властивості при експериментальних пошкодженнях шкіри у лабораторних тварин, що виражається в зменшенні ознак альтерації і ексудації, у вищому темпі регенерації і повноцінному відновленні тканинних структур.

5. При термічних пошкодженнях шкіри місцеве застосування ЕПЛ офіцинального і ЕШНП стимулює регенерацію епітеліального пласта з утворенням усіх нормальних структур шкіри, в порівнянні з контрольною групою, де регенерація була неповною з утворенням рубця, а відновлення нормальної будови шкіри спостерігалося на межі із здоровою тканиною. Повне відновлення відбувається в раніші терміни при лікуванні ЕШНП, ніж при лікуванні ЕПЛ, при цьому утворення фіброзної тканини в незначній кількості відмічали тільки у тварин, що одержували ЕПЛ, в порівнянні з контрольною групою.

6. Застосування ЕШНП при холодових пошкодженнях шкіри скорочує терміни очищення ран, зменшує вторинні ішемічні пошкодження дерми, стимулює регенерацію епітеліального пласта з утворенням усіх нормальних структур шкіри з мінімальним розвитком грануляційної тканини. У контрольній групі регенерація була неповною з утворенням рубця, а відновлення нормальної будови шкіри спостерігалося на межі із здоровою тканиною. Повне відновлення відбувається в раніші терміни при лікуванні ЕШНП, ніж при лікуванні ЕПЛ, при цьому утворення фіброзної тканини у мінімальній кількості виявляли тільки у тварин, що одержували ЕШНП.

7. Порівняльне вивчення регенерації шкіри після термічних і холодових травм при місцевій терапії ЕПЛ і ЕШНП свідчить про те, що ЕШНП сприяє більш швидкій і повній ерадикації інфікованих опікових і холодових ран від патогенної і умовно - патогенної мікрофлори, що не повязано з прямою бактерицидною дією екстракту.

Шкодовская Н.Ю., Гальченко С.Е., Мамонтова А.В., Сандомирский Б.П. Влияние экстракта кожи новорожденных поросят на заживление ожоговых ран //Пробл. криобиологии.-2004.-N 4.-С. 46-50.

Шкодовская Н.Ю., Гойденко Н.И., Гальченко С.Е., Сандомирский Б.П. Экспериментальные холодовые раны кожи при терапии экстрактами плаценты официнальным и кожи новорожденных поросят //Пробл. медич. науки та освіти. - 2005.-№4.- С.41-45.

Шкодовская Н.Ю., Высеканцев И.П., Гальченко С.Е., Сандомирский Б.П. Бактериологическая характеристика ран при лечении их экстрактом кожи новорожденных поросят //Пробл. криобиологии.- 2005.- №4.- С. 30-33.

Гальченко С.Є., Шкодовська Н.Ю., Сандомирський Б.П., Грищенко В.І. Спосіб отримання екстрактів ксеногенних органів Пат. 64381 А Україна, МПК7 А61К35/12. Опубл.16.02.2004.- Бюл. Промисл. власність № 2.

Galchenko S.E., Belochkina I.V., Sleta I.V., Galchenko E.S., Shkodovskaya N.Yu., Sandomirsky B.P. Biologically active substance extracting from xenogenic organs with applying cryobiological technologies //Cryobiomol, Low temperature biology.- Coimbra, Portugal, 14-18 September 2003.-P.164.

Шкодовская Н.Ю., Гальченко С.Е., Сандомирский Б.П. Влияние экстракта кожи новорожденных поросят на регенерационные процессы ожоговых ран //Ліки-Людині. Сучасні аспекти фармакотерапії. Матеріали науково-практичної конференції. -Харків. - 2004.-С.210-211.

Гальченко С.Є., Бєлочкіна І.В., Тининика Л.М., Слета І.В., Гальченко К.С., Шкодовська Н.Ю., Сандомирський Б.П. Порівняльне вивчення ефективності різних форм препаратів з ксеногенних органів //Х Конгрес Світової Федерації Українських Лікарських Товариств: тези доповідей .- Чернівці. - 2004.-С.617.

Шкодовська Н.Ю. Вплив екстракту шкіри новонароджених поросят на процеси регенерації опікових ран //Х Конгрес Світової Федерації Українських Лікарських Товариств: тези доповідей.-Чернівці. - 2004.- С.626.

Шкодовська Н.Ю., Гальченко С.Є., Сандомирський Б.П. Вплив екстракту шкіри новонароджених поросят на цитологічну характеристику опікових і холодових ран //Тези доп. Ювілейного VIII зїзду ВУЛТ (Всеукраїнського лікарського товариства), присвячений 15-річчю організації (1990-2005), Івано-Франківськ, 21-22 квітня 2005.-С. 499.