Вплив настоянки перстачу прямостоячого на функціональний стан печінки за умов норми та експериментального гепатиту - Автореферат

Він має кумулятивні властивості, при надходженні в організм ушкоджує печінку, викликаючи дозозалежні зміни її функцій та морфологічної структури (Ю.І. Універсальним патогенетичним механізмом ушкодження клітин внаслідок дії екстремальних факторів різної природи є активація процесів пероксидного окиснення ліпідів (ПОЛ) біомембран, що сприяє прогресуванню патологічних процесів та розвитку цитолізу, зокрема в печінці, яка відіграє важливу роль у детоксикації різноманітних отрут (А.О. Дослідження впливу настоянки перстачу прямостоячого на оксидантно-антиоксидантний та функціональний стан печінки щурів за умов норми, та можливість корекції настоянкою порушень функціонального стану печінки за умов експериментального гепатиту дозволило б обґрунтувати її використання в клінічній практиці як гепатопротектора. Дисертант, як співвиконавець зазначеної теми, дослідила вплив настоянки перстачу прямостоячого на функціональний та оксидантно-антиоксидантний стан печінки щурів за умов норми та експериментального гепатиту. Дослідити вплив настоянки перстачу прямостоячого на процеси пероксидного окиснення ліпідів та стан глутатіонової антиоксидантної системи печінки, показники метаболізму білків, ліпідів, вуглеводів у плазмі крові білих щурів за умов норми.Тварин розподілено на групи: 1 - контроль (здорові щури); 2 - інтоксиковані CCL4; 3 - тварини, яким починаючи з останнього дня моделювання гепатиту вводили настоянку перстачу прямостоячого щоденно внутрішньошлунково в дозі 1 мл/кг маси тіла. У плазмі крові колориметрично визначали вміст: b-ліпопротеїнів, загальних ліпідів, триацилгліцеролів, загального холестерину (ХС), загального білірубіну, глюкози, загального білка, альбуміну, сечовини, сечової кислоти та креатиніну за уніфікованими методиками (В.В.Меньшиков, 1988); неорганічного фосфору - за реакцією з молібденовою кислотою, загального кальцію - реакцією з о-крезолфталеїнкомплексоном у лужному середовищі, заліза - за реакцією Fe2 з натрієвою сіллю ферозину, хлорид-іонів - за реакцією із роданідом ртуті (ІІ) (Н.У. Проведені дослідження показали, що щоденне пероральне введення НПП у дозі 0,5 мл /кг маси впродовж усього терміну експерименту (21 день) не викликало вірогідних змін вмісту гемоглобіну крові, загального кальцію, хлорид-іонів, заліза, альбуміну, загального холестеролу, ?-ліпопротеїнів та креатиніну в плазмі крові. 2) спостерігалося достовірне зменшення вмісту сечової кислоти через 14 та 21 день, достовірне збільшення вмісту церулоплазміну через 14 днів, підвищення вмісту загального білку в плазмі крові через 14 та 21 день, збільшення вмісту неорганічного фосфору, сечовини, загальних ліпідів та зменшення вмісту триацилгліцеролів через 21 день. При введенні НПП впродовж трьох тижнів у дозі 1,0 мл /кг маси (рис.1, табл.3) відзначено зниження вмісту глюкози в печінці (на 12 %) та плазмі крові (на 18 %); підвищення вмісту загальних ліпідів (на 23%); зниження вмісту триацилгліцеролів (на 28%), ?-ліпопротеїнів (на 44%), сечової кислоти (на 50 %) у плазмі крові порівняно з контролем.У дисертаційній роботі наведено теоретичне узагальнення і нове вирішення наукового завдання, яке полягало у дослідженні біохімічних механізмів дії настоянки з кореневища перстачу прямостоячого, та можливості корекції цією настоянкою порушень функціонального стану печінки щурів за умов експериментального моделювання хімічного ураження клітин чотирихлористим вуглецем. Проведений in vitro скринінг антиоксидантної активності настоянки перстачу прямостоячого (1:5 на 40% етиловому спирті) встановив, що настоянка гальмує індуковане пероксидне окиснення ендогенних ліпідів печінки інтактних тварин при додаванні її в інкубаційне середовище в розведенні 10-4 - 10-5. In vivo за умов норми антиоксидантний ефект настоянки проявляється у дозах 0,5мл, 1мл, 2 мл на 1 кг маси щура, що обумовлене, в першу чергу, активацією антиоксидантних ферментів - каталази та глутатіон-S-трансферази. Максимальне пригнічення процесів пероксидації та активація систем антиоксидантного захисту печінки та крові щурів відзначено через 3 дні експерименту при введенні настоянки у дозі 1,0 мл /кг маси. Настоянка перстачу прямостоячого при її застосуванні in vivo за умов норми впродовж 7 та 14 днів у дозі 1,0 мл /кг маси, виявляла антиоксидантну дію, не викликала цитолізу гепатоцитів та порушення функціонального стану печінки щурів.

ОСНОВНИЙ ЗМІСТ РОБОТИ

У дисертаційній роботі наведено теоретичне узагальнення і нове вирішення наукового завдання, яке полягало у дослідженні біохімічних механізмів дії настоянки з кореневища перстачу прямостоячого, та можливості корекції цією настоянкою порушень функціонального стану печінки щурів за умов експериментального моделювання хімічного ураження клітин чотирихлористим вуглецем.

1. Проведений in vitro скринінг антиоксидантної активності настоянки перстачу прямостоячого (1:5 на 40% етиловому спирті) встановив, що настоянка гальмує індуковане пероксидне окиснення ендогенних ліпідів печінки інтактних тварин при додаванні її в інкубаційне середовище в розведенні 10 -4 - 10 -5.

2. In vivo за умов норми антиоксидантний ефект настоянки проявляється у дозах 0,5мл, 1мл, 2 мл на 1 кг маси щура, що обумовлене, в першу чергу, активацією антиоксидантних ферментів - каталази та глутатіон-S-трансферази. Максимальне пригнічення процесів пероксидації та активація систем антиоксидантного захисту печінки та крові щурів відзначено через 3 дні експерименту при введенні настоянки у дозі 1,0 мл /кг маси. В умовах in vitro та in vivo за умов норми встановлено діапазон лікувальної дії спиртової настоянки перстачу прямостоячого і розраховано орієнтовно профілактичну та лікувальну дози. При цьому, доза 1,0 мл /кг маси тварин була обрана для подальших досліджень.

3. Настоянка перстачу прямостоячого при її застосуванні in vivo за умов норми впродовж 7 та 14 днів у дозі 1,0 мл /кг маси, виявляла антиоксидантну дію, не викликала цитолізу гепатоцитів та порушення функціонального стану печінки щурів. Зокрема, двотижневе введення настоянки призвело до зниження у плазмі крові вмісту загальних ліпідів, триацилгліцеролів, ?-ліпопротеїнів, сечової кислоти, та підвищення вмісту загального білка і церулоплазміну. За цих умов у печінці тварин через 7 днів введення настоянки спостерігалось підвищення вмісту холестеролу та глюкози. Довготривале введення настоянки за умов норми (впродовж 21 дня) викликало порушення окремих метаболічних процесів в організмі тварин, проте не виявляло цитотоксичної дії. Зокрема, знизився вміст глюкози в печінці та плазмі крові; вміст загальних ліпідів у печінці щурів знизився, а у плазмі крові підвищився; знижувався вміст ?-ліпопротеїнів, триацилгліцеролів, загального холестеролу у плазмі крові щурів.

4. Модель експериментального токсичного гепатиту супроводжується суттєвим зростанням процесів вільнорадикального окиснення біомолекул і порушенням функціонального стану печінки. Це проявляється накопиченням у тканинах продуктів пероксидного окиснення ліпідів та біополімерів. У печінці зростала активність глюкозо-6-фосфатдегідрогенази та знижувалась активність глюкозо-6-фосфатази і 5?-нуклеотидази. При цьому у плазмі крові щурів підвищується активність амінотрансфераз, лактатдегідрогенази, глутатіон-S-трансферази, лужної фосфатази, ?-глутамілтрансферази, підвищується вміст загального білірубіну та загальних ліпідів, а вміст загального білка і глюкози знижується. Відбуваються суттєві зміни функціонування антиоксидантної системи крові та печінки щурів.

5. Введення настоянки перстачу прямостоячого за умов експериментального токсичного гепатиту у дозі 1,0 мл /кг маси тіла впродовж 7 днів нормалізувало активність глутатіонової ланки антиоксидантного захисту печінки та крові щурів, а впродовж 14діб - сприяло нормалізації інтенсивності вільнорадикальних процесів та показників функціонального стану печінки щурів.

6. Основними напрямками механізму гепатопротекторної дії настоянки перстачу прямостоячого є: гальмування процесів вільнорадикального окиснення ліпідів та біополімерів за рахунок зменшення в тканинах продукування активних форм кисню; активація ферментів антиоксидантного захисту печінки та крові щурів.

1. Тефтюєва Н.Б. Перекисне окиснення ліпідів печінки щурів за умов токсичного гепатиту та дії настоянки перстачу прямостоячого// Одеський мед.журнал.-2001.-№6(68). - С.23 - 25.

2. Тефтюєва Н.Б. Вплив настойки перстачу прямостоячого на показники білкового та ліпідного обміну крові щурів // Вісник проблем біол. і мед. - 2004. - Вип.2. - С. 65-70.

3. Тефтюєва Н.Б. Вплив настойки перстачу прямостоячого на біохімічні показники функціонального стану печінки щурів // Одеський мед.журнал. - 2004. - №6(86). - С. 16-18.

4. Тефтюєва Н.Б. Дія настоянки перстачу прямостоячого на деякі біохімічні показники крові щурів // Експериментальна і клінічна медицина. - 2005. - №1. - С. 28-31.

5. Тефтюєва Н.Б., Григорєва Н.П. Антиоксидантні властивості настоянки перстача прямостоячого // Експерим. та клінічна фізіол. і біохімія.-2001.-Т.13, №1. - С.27 - 28.

6. Тефтюєва Н.Б., Григорєва Н. П. Вплив настоянки перстачу прямостоячого на деякі показники оксидантного та антиоксидантного стану печінки щурів // Буковинський мед. вісник. - 2001. - Т.5, №2. - С.193 - 196.

7. Тефтюєва Н.Б., Мещишен І.Ф. Перекисне окиснення ліпідів та стан антиоксидантної системи крові щурів за умов токсичного гепатиту та дії настоянки перстачу прямостоячого // Мед. хімія. - 2003. - Т.5, №4. - С. 75 - 79.

8. Тефтюєва Н.Б., Мещишен І.Ф. Вплив настойки перстачу прямостоячого на біохімічні показники метаболізму печінки щурів за умов тетрахлорметанового гепатиту // Фармацевтичний журнал. - 2004. - №6. - С. 90 - 94.

9. Тефтюєва Н.Б., Яремій І.М., Григорєва Н.П. Вплив настоянки перстачу прямостоячого на глутатіонову систему печінки щурів за умов токсичного гепатиту // Мед. хімія. - 2001.-Т.3, №4.- С.52 - 55.

10. Тефтюєва Н.Б., Григорєва Н.П., Волошин О.І. Перстач прямостоячий як лікарська рослина // Фітотерапія в Україні. - 2000. - №2(10). - С. 30 - 33.

11. Тефтюєва Н.Б., Мещишен І.Ф. Фізико-хімічні властивості та біологічна дія перстача прямостоячого // Оздоровчі ресурси Карпат і прилеглих регіонів: Матер. конференції з міжнародною участю (Чернівці, 5 - 6 жовтня 1999 року). - Чернівці, 1999. - С.187 - 188.

12. Тефтюєва Н.Б. Вплив настоянки перстачу прямостоячого на показники вуглеводного та ліпідного обміну крові та печінки щурів // Актуальні питання клінічної та експериментальної медицини: Матеріали 85-ї підсумкової наукової конференції, присвяченої 60-річчю БДМА. - Чернівці, БДМА, 2004. - С. 338 - 340.

13. Тефтюєва Н.Б. Детоксикаційна дія перстачу прямостоячого // Х конґрес СФУЛТ. Тези доповідей. - Чернівці - Київ - Чікаго. - 2004. - С.92.

14. Тефтюєва Н.Б. Дія настойки перстачу прямостоячого на вміст води в органах та мінералів у крові щурів // Гігієна населених місць. Збірник / Інститут гігієни та медичної екології ім. О.М. Марзеєва АМН України. -Київ, 2004.- Вип.44.- С. 617 -621.

15. Мещишен І.Ф., Тефтюєва Н.Б., Яремій І.М. Застосування настойки перстачу прямостоячого як антиоксидантного засобу. Деклараційний патент на корисну модель / Бюл. №1, 17.01.2005, (11) 4655, (51) 7 А61К35/78.

16. Teftyuyeva N. Effect of Potentilla Tormentilla spirituous tincture on lipoperoxidation of rats’ blood // Annales Universitatis Mariae Curie-Sklodowska, Lublin-Polonia, sectio DDD, Pharmacia. - 2004. - Vol. XVII, N 2. - P.189-191.