Вплив нанокомпозитів саліцилальімінатів та фулеренів на стан імунної системи у інтактних тварин і пухлиноносіїв - Автореферат

Відомо, що основи Шифа відносяться до сполук, котрі характеризуються імуностимулюючою дією, яка повязана з активацією CD-4 та CD-8 лімфоцитів (Chen H., 1996). Основи Шифа підвищують силу імунної відповіді на антигени різної природи при первинному контакті з ними комітованих лімфоцитів, особливо цитотоксичну активність Т-лімфоцитів, спрямовану проти клітин уражених вірусом і пухлинних клітин (Brown F., 1999). Дослідження протипухлинної дії нанокомпозитів саліцилальімінатів та фулеренів, визначення їх ролі у підвищенні імунного статусу організму за умови канцерогенезу, є важливою проблемою сьогодення, що дозволяє удосконалювати та суттєво покращувати імуномодулюючі препарати, збільшуючи термін тривалості життя осіб з онкологічною патологією. Метою роботи було порівняльне дослідження у модельних експериментах на інтактних тваринах та за умови ізогенного росту пухлини стану імунної системи під дією саліцилальімінатів та фулеренів для зясування закономірностей прояву імуномодулюючого ефекту цих сполук. Відповідно до цього, були поставлені такі завдання:1)дослідити електроктрофоретичну рухомість клітин та визначити величину їх електрокінетичного потенціалу під впливом нанокомпозитів похідних саліцилальімінів та фулеренів;2)визначити функціональну активність перитонеальних макрофагів за дії досліджуваних чинників in vitro;3)визначити динаміку росту пухлин та виживаність тварин пухлиноносіїв, які піддавались дії нанокомпозитів саліцилальімінатів, фулеренів та модифікованої за їх допомогою вакцини;4)оцінити цитотоксичність лімфоцитів мишей за умови розвитку перещепленої модельної пухлини після введення досліджуваних сполук та модифікованої вакцини;5)встановити рівень циркулюючих імунних комплексів, вміст антитіл у сироватці крові та активність перитонеальних макрофагів у мишей, яким проводили інєкції досліджуваних сполук і модифікованої вакцини за умов пухлинного росту;Дослідження впливу нанокомпозитів саліцилальімінатів на інтактних щурах проводили за наступною схемою - досліджувані сполуки вводили тричі з інтервалом у 7 днів підшкірно в ділянку шиї. Показники стану імунної системи визначали на 7, 14, 21 та 28 добу, титри протипухлинних антитіл визначали на 7, 14 та 35 добу. Показники стану імунної системи визначали на 7, 14, 21 та 28 добу, титри протипухлинних антитіл визначали на 7, 14 та 35 добу. Так, металокомплексні сполуки викликали зниження ЕКП, що в свою чергу свідчить про виникнення специфічної сенсибілізації тимоцитів, в той же час аеросил і фулерен-сорбований виходять за межі загальної закономірності - більшість речовин знижують ЕКП клітин-ефекторів, аеросил підвищує ЕКП тимоцитів на 66,7%, а фулерен-сорбований на 111,7%. Аналізуючи данні гальмування пухлинного росту, досліджувані препарати за дією можна розділити на дві групи: в першій групі тварини гинуть за малих обємів пухлини (аеросилова і VOCIA групи), до другої групи можна віднести тварин, у яких ми спостерігали дві хвилі активного розвитку пухлини з другим періодом маніфестації пухлинного процесу, що починався з 28 доби (MNCIA, ZNCIA, CUCIA групи і група, яка отримувала інєкції фулерену-ковалентного).У дисертації здійснено наукове узагальнення і наведено нове вирішення наукового завдання щодо визначення впливу нанокомпозитів саліцилальімінатів та фулерену С60 на клітинну і гуморальну ланки імунної системи (як у безпухлинних тварин, так і за умови розвитку солідної пухлини саркома 37) та підвищення протипухлинної ефективності аутовакцини, виготовленої на основі продуктів синтезу B. subtilis B-7025, модифікованої за допомогою нанокомпозитів фулерену С60. В системі in vitro нанокомпозити саліцилальіміну та фулерен-ковалентний викликають зменшення дзета-потенціалу тимоцитів та макрофагів, що свідчить про активацію клітин, але у випадку застосування фулерену-сорбованого відмічається збільшення дзета-потенціалу, що свідчить про диференціацію кортикальних тимоцитів в медулярні.

ОСНОВНИЙ ЗМІСТ РОБОТИ

У дисертації здійснено наукове узагальнення і наведено нове вирішення наукового завдання щодо визначення впливу нанокомпозитів саліцилальімінатів та фулерену С60 на клітинну і гуморальну ланки імунної системи (як у безпухлинних тварин, так і за умови розвитку солідної пухлини саркома 37) та підвищення протипухлинної ефективності аутовакцини, виготовленої на основі продуктів синтезу B. subtilis B-7025, модифікованої за допомогою нанокомпозитів фулерену С60.

1. В системі in vitro нанокомпозити саліцилальіміну та фулерен-ковалентний викликають зменшення дзета-потенціалу тимоцитів та макрофагів, що свідчить про активацію клітин, але у випадку застосування фулерену-сорбованого відмічається збільшення дзета-потенціалу, що свідчить про диференціацію кортикальних тимоцитів в медулярні.

2. В активації перитонеальних макрофагів in vitro основну роль відіграє аеросил; досліджувані нанокомпозити аеросилу та фулерену не впливають на їх активнісь, але при застосуванні фулерену-сорбованого, а також CUCIA і MNCIA композитів спостерігається пригнічення активності макрофагів.

3. У безпухлинних тварин досліджені металокомплекси аеросилу викликають лейкоцитоз і стимулюють фагоцитарну активність нейтрофільних гранулоцитів, що робить саліцилальіміни перспективними модуляторами неспецифічного захисту для підвищення протипухлинної резистентності організму.

4. Нанокомпозити аеросилу з металокомплексами та фулереном С60 підвищують виживаність піддослідних тварин та гальмують ріст пухлини саркома 37, стимулюють значне підвищення цитотоксичної активності лімфоцитів, підвищення рівня протипухлинних антитіл на фоні низького рівня середньомолекулярних циркулюючих імунних комплексів, викликають активацію перитонеальних макрофагів протягом всьго періоду спостереження.

5. Модифікація досліджуваної протипухлинної вакцини, виготовленої на основі продуктів метаболізму B. subtilis B-7025 за допомогою відібраних нанокомпозитів, значно підвищує її протипухлинні властивості.

6. Модифікація аутовакцини за допомогою нанокомпозитів фулерену С60 підвищує показники специфічного імунітету та неспецифічних факторів захисту. При використанні фулерену-ковалентного для модифікації протипухлинної вакцини у 11% тварин спостерігається регрессія пухлини саркома 37.

1. Дворщенко О.С., Голуб А.А., Позур В.К. Біологічна дія основ Шифа // Гігієна населених місць. - 2002. - Вип. 39. - С. 304-309. (Дисертантом особисто проведено підбір та переклад оглядового матеріалу).

2. Дворщенко О.С., Яніш Ю.В., Голуб О.А., Позур В.К. Вплив нанокомпозитів фулерену С60 на поверхневий потенціал лімфоцитів та макрофагів щурів // Гігієна населених місць. - 2002. - Вип. 40. - С. 306-310. (Дисертантом особисто проведено отримання лімфоцитів та макрофагів, підрахунок клітин, їх інкубація, визначення поверхневого потенціалу лімфоцитів та макрофагів. Особисто проведено математичну обробку та аналіз отриманих результатів).

3. Дворщенко О.С., Діденко Г.В., Голуб О.А., Позур В.К., Прилуцький Ю.І. Вплив іммобілізованих на аеросилі саліцилальімінатів металів на функціональну активність перитонеальних макрофагів щурів // Вісник Київського Національного Університету. Біологія. - 2003. - Вип. 41. - С. 147-148. (Дисертант особисто отримував лімфоцити та макрофаги, проводив підрахунок клітин, їх інкубацію, визначав поверхневий потенціал лімфоцитів та макрофагів. Особисто проводив математичну обробку та аналіз отриманих результатів).

4. Диденко Г.В., Дворщенко О.С., Лисовенко Г.С., Коваленко Н.Г., Потебня Г.П., Кикоть В.В., Позур В.К., Голуб А.А. Модификация противоопухолевой аутовакцины на основе продуктов метаболизма B. subtilis B-7025 при помощи сорбентов и аутомакрофагов // Эксперим. Онкология. - 2003. - № 2. - С. 116-118. (Дисертантом особисто проведено перещеплення тваринам пухлини, вакцинацію тварин, отримання лімфоцитів та макрофагів, підрахунок клітин, їх інкубація, визначення ЦАЛ, ЦИК і визначення рівня протипухлинних антитіл в ІФА-тесті, постановка НСТ-тесту. Особисто проведено математичну обробку та аналіз отриманих результатів).

5. Дворщенко О.С., Яніш Ю.В., Голуб О.А., Позур В.К. Вплив іммобілізованих на аеросилі саліцилальімінатів металів на поверхневий потенціал лімфоцитів та макрофагів щурів // Гігієна населених місць. - 2004. - Вип. 44. - С. 627-631. (Особисто проведено отримання лімфоцитів та макрофагів, підрахунок клітин, їх інкубація, визначення поверхневого потенціалу лімфоцитів та макрофагів. Особисто проведено математичну обробку та аналіз отриманих результатів).

6. Діденко Г.В., Дворщенко О.С. Модифікація протипухлинної аутовакцини, виготовленої на основі продуктів метаболізму B. subtilis B-7025 за допомогою імуносорбентів // V конференція молодих онкологів України “Сучасні аспекти експериментальної та клінічної онкології”. - Київ, 2002. - С. 4.

7. Дворщенко О.С., Діденко Г.В., Перепнихатка Н.П. Протипухлинна активність нанокомпозитів аеросилу // VII международная конференция молодых онкологов “Современные проблемы экспериментальной и клинической онкологии”. - Киев, 2006. - С. 27.

8. Токарь А.В., Дворщенко О.С., Диденко Г.В. Противоопухолевая активность аутовакцины, на основе гликопротеида В. subtilis B-7025, после модификации нанокомпозитами аэросила // Международная научная конференция “Студент и научно-технический прогресс”. - Новосибирск, 2006. - С. 56.