Вивчення біологічно активних речовин Vitis Vinifera та створення на їх основі лікарських засобів - Автореферат

Пошук рослин з достатньою сировинною базою, комплексне використання сировини з метою створення нових лікарських засобів пояснює інтерес до вивчення плодово-ягідних культур. Інтерес до вичавки винограду, як вторинного виду сировини, обумовлений рядом факторів, серед яких: до складу вичавки входить комплекс БАР, якісний склад і кількісний вміст яких, дозволяє розглядати її як джерело для виробництва лікарських засобів, біологічно активних добавок та косметичних засобів; потенційні обєми виноградної вичавки дозволяють класифікувати її як промислову сировину; зростаючі обєми виноградної вичавки, які щорічно утворюються при переробці виноградних ягід, можуть складати серйозну загрозу для довкілля і тому потребують розробки ефективних шляхів її утилізації. Наявність достатньої сировинної бази, вміст великої кількості різних груп БАР, що мають різноманітну фармакологічну дію і розробка на їх основі нових лікарських засобів є актуальною проблемою сучасної фармації. Метою роботи було вивчення різних груп БАР листя та вичавок винограду культурного сортів Ізабелла та Каберне-Совіньйон та визначення можливості створення лікарських засобів на їх основі. провести попередні фітохімічні дослідження якісного складу листя та вичавок винограду культурного сортів Ізабелла та Каберне-Совіньйон;Обєктами наших досліджень були вичавки винограду культурного двох сортів Каберне-Совіньйон та Ізабелла і листя винограду сорту Ізабелла. Вичавки винограду сорту Каберне-Совіньйон були надані Інститутом винограду і вина «Магарач» (м. За допомогою якісних реакцій, ТШХ та ПХ в листі та вичавках винограду культурного сортів Ізабелла та Каберне-Совіньйон було виявлено амінокислоти, полісахариди, вільні цукри, дубильні речовини, гідроксикоричні кислоти, флавоноїди, антоціани, стільбени, щавлева кислота. Методом колонкової адсобційної хроматографії, рехроматографії на поліаміді і силікагелі, препаративної хроматографії на папері та в тонкому шарі з листя та вичавок винограду культурного сортів Ізабелла та Каберне-Совіньйон було виділено та ідентифіковано 35 речовин: з них 2 похідні бензойної кислоти, 4 гідроксикоричні кислоти, 3 гідроксикумарини, 2 флавони, 4 флавоноли, 3 С-глікозиди флавонів, 2 глікозиди кемпферолу, 5 глікозидів кверцетину, 1 глікозид ізорамнетину, 1 флаван, 5 антоціанів, 1 стільбен, 2 органічні кислоти. Речовини 2.10, 2.11 є флавоновими агліконами - апігенін та лютеолін; речовини 2.12-2.15 є флавоноловими агліконами - кверцетин, кемпферол, мірицетин, ізорамнетин; речовини 2.16-2.18 є С-глікозидами флавонів - вітексин, сапонаретин, гомоорієнтин; речовини 2.19 та 2.20 є глікозидами кемпферолу - астрагалін, нікотифлорин; речовини 2.21-2.25 є глікозидами кверцетину - авікулярин, гіперозид, ізокверцитрин, кверцитрин, рутин; речовина 2.26 є глікозидом ізорамнетину - ізорамнетин-3-О-в-D-глюкопіранозид; речовина 2.27 є флаваном - таксифолін; речовини 2.28-2.32 є антоціанами - дельфінідин-3-О-глікозид, мальвідин-3-О-глікозид, ціанідин-3-О-глікозид, мальвідин - 3,5 - диглікозид, ціанідин - 3,5 - диглікозид про що свідчать якісні реакції, хроматографічна поведінка в різних системах розчинників, дані УФ-, ІЧ-, ПМР спектрів та результати хімічних перетворень.Вперше проведено комплексне вивчення біологічно активних речовин Vitis vinifera, сортів, що є промисловими в Україні. За допомогою якісних реакцій, хроматографічних методів аналізу, тривимірної скануючої спектрофлуоріметрії в листі та вичавках винограду культурного сортів Ізабелла та Каберне-Совіньйон виявлені полісахариди, вільні та звязані цукри, дубильні речовини, гідроксикоричні кислоти, флавоноїди, антоціани, стільбени, щавлева кислота, хлорофіли та каротиноїди. З листя та вичавок винограду сорту Ізабелла та вичавок винограду сорту Каберне-Совіньйон виділено в індивідуальному стані 35 речовин. На основі фізико-хімічних властивостей вихідних речовин та продуктів їх хімічних перетворень, даних УФ-, ІЧ-, ПМР спектроскопії, порівнянні з вірогідними зразками встановлено їх структуру: похідні бензойної кислоти - галова та елагова кислоти; гідроксикоричні кислоти - кавова, хлорогенова, неохлорогенова, n-кумарова кислоти; гідроксикумарини - умбеліферон, скополетин, ескулетин; флавони - апігенін, лютеолін; флавоноли - кверцетин, кемпферол, мірицетин, ізорамнетин; С-глікозиди флавонів - вітексін, сапонаретин, гомоорієнтин; глікозиди кемпферолу - астрагалін, нікотифлорин; глікозиди кверцетину - авікулярин, гіперозид, ізокверцитрин, кверцитрин, рутин; глікозид ізорамнетину - ізорамнетин-3-О-в-D-глюкопіранозид; флаван - таксифолін; антоціани - дельфінідин-3-О-глікозид, мальвідин-3-О-глікозид, ціанідин-3-О-глікозид, мальвідин - 3,5 - диглікозид, ціанідин - 3,5 - диглікозид; стільбен - ресвератрол; органічні кислоти - щавлева та винна кислоти. Одержані фракції полісахаридів з листя та вичавок винограду: водорозчинні полісахариди, пектинові речовини, геміцелюлози А і Б; вперше методом хроматографії на папері вивчено їх мономерний склад.

Основний зміст роботи

1. Вперше проведено комплексне вивчення біологічно активних речовин Vitis vinifera, сортів, що є промисловими в Україні.

2. За допомогою якісних реакцій, хроматографічних методів аналізу, тривимірної скануючої спектрофлуоріметрії в листі та вичавках винограду культурного сортів Ізабелла та Каберне-Совіньйон виявлені полісахариди, вільні та звязані цукри, дубильні речовини, гідроксикоричні кислоти, флавоноїди, антоціани, стільбени, щавлева кислота, хлорофіли та каротиноїди.

3. З листя та вичавок винограду сорту Ізабелла та вичавок винограду сорту Каберне-Совіньйон виділено в індивідуальному стані 35 речовин. На основі фізико-хімічних властивостей вихідних речовин та продуктів їх хімічних перетворень, даних УФ-, ІЧ-, ПМР спектроскопії, порівнянні з вірогідними зразками встановлено їх структуру: похідні бензойної кислоти - галова та елагова кислоти; гідроксикоричні кислоти - кавова, хлорогенова, неохлорогенова, n-кумарова кислоти; гідроксикумарини - умбеліферон, скополетин, ескулетин; флавони - апігенін, лютеолін; флавоноли - кверцетин, кемпферол, мірицетин, ізорамнетин; С-глікозиди флавонів - вітексін, сапонаретин, гомоорієнтин; глікозиди кемпферолу - астрагалін, нікотифлорин; глікозиди кверцетину - авікулярин, гіперозид, ізокверцитрин, кверцитрин, рутин; глікозид ізорамнетину - ізорамнетин-3-О-в-D-глюкопіранозид; флаван - таксифолін; антоціани - дельфінідин-3-О-глікозид, мальвідин-3-О-глікозид, ціанідин-3-О-глікозид, мальвідин - 3,5 - диглікозид, ціанідин - 3,5 - диглікозид; стільбен - ресвератрол; органічні кислоти - щавлева та винна кислоти. З них елагова кислота, апігенін, ізорамнетин, нікотифлорин, ізорамнетин-3-О-в-D-глюкопіранозид, таксифолін виділені вперше.

4. Одержані фракції полісахаридів з листя та вичавок винограду: водорозчинні полісахариди, пектинові речовини, геміцелюлози А і Б; вперше методом хроматографії на папері вивчено їх мономерний склад.

5. Визначено кількісний вміст звязаних амінокислот, вміст макро- і мікроелементів, вільної і звязаної щавлевої кислоти. З речовин фенольної природи визначено кількісний вміст флавоноїдів, гідроксикоричних кислот, дубильних речовин (перманганатометричний та комплексонометричний метод), суми поліфенольних сполук у перерахунку на галову кислоту.

6. Вперше запропоновані оптимальні умови для максимального вилучення антоціанів з вичавок винограду культурного сортів Ізабелла та Каберне-Совіньйон та визначено їх кількісний вміст.

7. Отримані ліпофільні фракції та визначено в них кількісний вміст вільних жирних кислот, хлорофілів та каротиноїдів.

8. Розроблено спосіб одержання густого екстракту з листя винограду культурного сорту Ізабелла.

9. Проведено стандартизацію отриманого густого екстракту та визначена його гостра токсичність і гепатопротекторна активність. На спосіб одержання екстракту з листя винограду культурного отримано патент України на корисну модель №15746.

10. Вперше проведені фармакологічні дослідження на здатність подрібнених вичавок винограду культурного сорту Каберне-Совіньйон впливати на імунні процеси.

11. Розроблені проекти АНД на «Листя винограду культурного сорту Ізабелла», «Вичавки винограду культурного сорту Каберне-Совіньйон», «Густий екстракт з листя винограду культурного сорту Ізабелла».

1. Кузнєцова В.Ю., Кисличенко В.С. Вивчення ліпофільного складу червоноплодих сортів винограду культурного // Збірн. Наук. Праць співроб. КМАПО ім. П.Л. Шупіка. - 2003. - вип. 12, кн. 2. - С. 784-788. (Особистий внесок - отримання експериментальних даних, узагальнення даних, написання статті).

2. Вплив екстракту з листя винограду на показники перекисного окислення ліпідів у мишей та щурів на фоні дії хлориду кадмію / Загайко А.Л., Вороніна Л.М., Набока О.І., Кисличенко В.С., Кузнєцова В.Ю. // Клінічна фармація - 2003. - Т. 7, №1. - С. 45-49. (Особистий внесок - участь у проведенні експериментальних дослідженнь та написанні статті).

3. Кузнєцова В.Ю., Кисличенко В.С. Поліфенольні сполуки винограду культурного // Медична хімія. - 2004. - Т. 6, №1. - С. 54-63. (Особистий внесок - виконання експерименту, узагальнення даних, написання статті).

4. Вивчення антиокиснювальної активності фенольних комплексів винограду культурного in vitro / Вороніна Л.М., Файзуллін О.В., Кузнєцова В.Ю., Загайко А.Л., Стрельченко К.В. // Медична хімія. - 2005. - Т. 7, №2. - С. 89-91. (Особистий внесок - участь у проведенні експериментальних дослідженнь та написанні статті).

5. Кузнєцова В.Ю., Кисличенко В.С. Вибір оптимальних умов екстракції антоціанів з вичавок винограду культурного // Медична хімія. - 2005. - Т. 7, №4. - С. 56-57. (Особистий внесок - отримання експериментальних даних, узагальнення даних, написання статті).

6. Кузнєцова В.Ю., Кисличенко В.С. Вивчення полісахаридного та елементного складу вичавок винограду культурного // Фармацевтичний журнал - 2005. - №3. - С. 95-97. (Особистий внесок - отримання експериментальних даних, узагальнення даних, написання статті).

7. Кузнєцова В.Ю., Кисличенко В.С. Амінокислотний склад вичавок винограду культурного // Фітотерапія. Часопис. - 2005. - №1. - С. 55-57. (Особистий внесок - отримання експериментальних даних, узагальнення даних, написання статті).

8. Липиды и липофильные компоненты некоторых лекарственных растений / Кисличенко В.С., Новосел Е.Н., Кузнецова В.Ю., Вельма В.В., Болоховец А.С. // Химия природных соединений. - №2. - 2006. - С. 182-183. (Особистий внесок - узагальнення даних, написання статті).

9. Патент України на винахід №59681А А 61К35/78. Спосіб одержання поліфенольного комплексу «Флавітин» з протизапальною, анальгетичною, противиразковою та антиоксидантною активністю / Кисличенко В.Ю., Адель Ахмад Халіль Абуюсеф (JO), Кузнєцова В.Ю., Вороніна Л.М., Король В.В., Набока О.І. Заявл. 15.11.2002; Опубл. 15.09.2003 Бюл. №9. (Особистий внесок - участь у патентному пошуку, проведення досліджень, узагальнення результатів, участь у підготовці матеріалів патенту).

10. Патент України на корисну модель №15745 А61К 36/00. Спосіб одержання засобу з гепатопротекторною активністю / Кузнєцова В.Ю., Кисличенко В.С., Яремчук О.О., Башура О.Г., Файзуллін О.В. Заявл. 16.01.2006; Опубл. 17.07.2006 Бюл. №7. (Особистий внесок - участь у патентному пошуку, проведення досліджень, узагальнення результатів, участь у оформленні матеріалів патенту).

11. Выделение биологически активных комплексов из лекарственного растительного сырья и изучение их связи «структура - биологическая активность» / Кисличенко В.С., Ковалев В.Н., Комисаренко А.Н., Дроговоз С.М., Новосел Е.Н., Кузнецова В.Ю., Борисенко Е.И. // Связь «структура - свойства» биологически активных веществ: Материалы научно-практического семинара (20-22 мая, 2002 г.). - Гурзуф, 2002. - С. 10-14.

12. Кузнєцова В.Ю., Кисличенко В.С. Вивчення якісного складу генеративних органів винограду культурного сорту «Ізабелла» // Наука і соціальні проблеми суспільства: медицина, фармація, біотехнологія: Тези доповідей III Міжнародної науково-практичної конференції (21-23 травн., 2003 р.). - Х., 2003. - С. 174.

13. Распределение флавоноидов в органах и тканях крыс после введения суммарного комплекса из листьев винограда / Воронина Л.Н., Загайко А.Л., Набока О.И., Чумак Е.И., Кисличенко В.С., Кузнецова В.Ю. // Биологически активные природные соединения винограда: применение в медицине продуктов с высоким содержанием полифенолов винограда: Материалы научной конференции (19 февр., 2003 г.). - Симферополь, 2003. - С. 194-197.

14. Кисличенко В.С., Кузнєцова В.Ю. Перспективи використання винограду культурного в фітотерапії // Фітотерапія в реабілітації хворих: Збірник тез науково-практичної конференції. - К., 2003. - С. 92-93.

15. Кузнєцова В.Ю., Кисличенко В.С. Перспективи використання вичавок винограду для створення нових лікарських засобів // Перспективи створення в Україні лікарських препаратів різної спрямованості дії: Матеріали Всеукраїнського науково-практичного семінару (26 лист., 2004 р.). - Х., 2004. - С. 248-251.

16. Кузнєцова В.Ю., Кисличенко В.С. Вичавка винограду культурного як перспективне джерело отримання біологічно активних добавок // Створення, виробництво, стандартизація, фармакоекономіка лікарських засобів та біологічно активних добавок: Матеріали науково-практичної конференції з міжнародною участю. - Тернопіль, 2004. - С. 113-115.

17. Получение и изучение пектинов из различных видов ЛРС / Кисличенко В.С., Новосел Е.Н., Кузнецова В.Ю., Болоховец А.С. // Актуальные проблемы образования, науки и производства в фармации: Материалы научно-практической конференции (18-19 окт., 2005 г.). - Ташкент, 2005. - С. 108-109.

18. Кузнєцова В.Ю., Кисличенко В.С. Вивчення кількісного вмісту щавлевої кислоти в листі та вичавках винограду культурного // Досягнення та перспективи розвитку фармацевтичної галузі України: Матеріали VI Національного з‘їзду фармацевтів України (28-30 вер., 2005 р.). - Х., 2005. - С. 739.

19. Кузнєцова В.Ю., Бурд Н.Б., Кисличенко В.С. Використання тривимірної спектроскопії для якісного аналізу ліпофільних екстрактів // Методи хімічного аналізу: Тези доповідей Другого міжнародного симпозіуму (14-17 черв., 2005 р.). - Ужгород, 2005. - С. 24-25.

20. Kislichenko V.S., Kuznetsova V. Yu., Juravel I.A. The phytochemical studies of grape leaves // 6th International Symposium on the chemistry of natural compounds (SCNC) (28-29 Jun. 2005). - Ankara-Turkey, 2005. - P. 54.

Размещено на .ru