Використання окислювачів на етапі хірургічного лікування хворих на рак молочної залози - Автореферат

Незважаючи на значні досягнення сучасної онкології, в першу чергу - хіміотерапії та гормонотерапії, проблема лікування хворих на рак молочної залози і попередження розвитку рецидивів та метастазів залишається однією з найактуальніших проблем сучасної онкології (Семіглазов В.Ф. та ін.; 2000, Кулік Г.І. та ін., 2003). Покращити безпосередні та віддалені результати хірургічного лікування хворих на рак молочної залози на основі розробки методики місцевого інтраопераційного застосування окислювача - натрію гіпохлориту. натрій гіпохлорит молочний залоза Задачі дослідження: Вивчити вплив місцевого застосування НГ на частоту виникнення місцевих рецидивів і віддалених метастазів, загальну та безрецидивну виживаність та перебіг післяопераційного періоду у хворих на рак молочної залози. Дослідити вплив НГ на клініко-лабораторні показники у хворих на рак молочної залози. Встановити вплив НГ на стан системного імунітету у хворих на рак молочної залози.В експерименті використовували наступні культури злоякісних клітин: МКС-ТМ-клітинна лінія, отримана з метастазу спонтанного раку молочної залози щура; МАК-3 клон С7 - високозлоякісна лінія клітин раку молочної залози миші (похідна лінія отримана з раку Ерліха); МЗС - первинна культура клітин спонтанного раку молочної залози собаки (використана на перших пасажах після посадки в культуру); MCF - культура раку молочної залози людини; Нер-2-лінія клітин карциноми гортані людини; Нер-А1st i Hep-B5st - клони Нер-2, трансформовані регуляторним геном Тат вірусу імунодефіциту людини (ВІЛ); ММ-4 - лінія клітин меланоми В-16 миші; ММ-М2 - високометастатична сублінія клітин меланоми, яка отримана шляхом двократних внутрішньовенних пасажів клітин ММ-4 з наступним рекультивуванням метастазів in vitro; ЛСК - суспензійна клітинна лінія, отримана з лімфосаркоми щура. Через 24 години середовище видаляли, на моношар клітин наносили розчини НГ в ростовому середовищі на 1 або 18 годин при 370С, після чого клітини відмивали двічі від препарату ростовим середовищем та додатково інкубували 24-48 г. у ростовому середовищі. Клітини ЛСК (3х105/мл) культивували тривалий час в присутності мінімальної дози НГ (0,043 мг/мл) нетоксичної для клітин протягом, як мінімум, 18 годин. Через дві доби, ці клітини, що перебували в стаціонарній фазі росту і клітини в логарифмічній фазі росту (друга доба після посіву в щільності 105/мл в повному ростовому середовищі), обробляли НГ, відмивали і порівнювали кінетику їх росту шляхом щоденного підрахунку кількості клітин протягом 4 діб. Встановлено, що коли пухлинні клітини обробляли НГ в суспензії, відмивали і висаджували у відносно низькій щільності в лунки планшети (х24, 2-5х104 клітин/на лунку) чутливість їх до препарату помітно зростала відносно такої клітин, фіксованих до субстрату (рис.На основі експериментально встановленої цитотоксичної та антипроліферативної дії окислювача (натрію гіпохлориту) стосовно культур клітин злоякісних пухлин розроблений метод місцевого інтраопераційного застосування НГ на етапі хірургічного лікування хворих на рак молочної залози. Обробка післяопераційної рани розчином НГ не викликає негативних змін клініко-лабораторних показників у хворих на РМЗ. Використання НГ для обробки післяопераційної рани у хворих на РМЗ супроводжується нормалізацією низки імунологічних показників: збільшується відносний вміст 0-лімфоцитів (з 39,7±1,2% до 49,7±1,1%; (p<0,05) та ВГЛ (з 1,3±0,03% до 1,8±0,04%; (p<0,05) в периферійній крові в порівнянні з контролем, концентрація циркулюючих імунних комплексів в основній групі нормалізується активніше ніж в контрольній. Обробка післяопераційної рани НГ дозволила зменшити загальний відсоток післяопераційних ускладнень на 26% (з 55% до 29%; (р<0,05), що призвело до скорочення терміну післяопераційного перебування хворої в стаціонарі. За пять років спостереження після використання НГ у хворих на РМЗ відмічено зменшення частоти виникнення місцевого рецидиву на 8,9% та віддалених метастазів РМЗ на 19,7% порівняно з контрольною групою.

Основний зміст роботи

На основі експериментально встановленої цитотоксичної та антипроліферативної дії окислювача (натрію гіпохлориту) стосовно культур клітин злоякісних пухлин розроблений метод місцевого інтраопераційного застосування НГ на етапі хірургічного лікування хворих на рак молочної залози.

Антипроліферативний ефект НГ на злоякісні клітини в культурах є проявом його прямого токсичного і власне антипроліферативного ефектів. Обробка злоякісних клітин НГ в суспензії та збільшена швидкість їх проліферації призводить до підвищення їх чутливості до НГ. Обробка пухлинних клітин НГ пригнічує їх метастатичний потенціал.

Обробка післяопераційної рани розчином НГ не викликає негативних змін клініко-лабораторних показників у хворих на РМЗ. Характер змін показників в контрольній та основній групах можна розцінити як такий, що відображає відповідну фізіологічну реакцію на характер операційної травми.

Використання НГ для обробки післяопераційної рани у хворих на РМЗ супроводжується нормалізацією низки імунологічних показників: збільшується відносний вміст 0-лімфоцитів (з 39,7±1,2% до 49,7±1,1%; (p<0,05) та ВГЛ (з 1,3±0,03% до 1,8±0,04%; (p<0,05) в периферійній крові в порівнянні з контролем, концентрація циркулюючих імунних комплексів в основній групі нормалізується активніше ніж в контрольній.

Обробка післяопераційної рани НГ дозволила зменшити загальний відсоток післяопераційних ускладнень на 26% (з 55% до 29%; (р<0,05), що призвело до скорочення терміну післяопераційного перебування хворої в стаціонарі.

За пять років спостереження після використання НГ у хворих на РМЗ відмічено зменшення частоти виникнення місцевого рецидиву на 8,9% та віддалених метастазів РМЗ на 19,7% порівняно з контрольною групою. В основній групі досягнуто збільшення трирічної безрецидивної виживаності на 20,7% (з 61% до 81,7%; (p<0,05), а пятирічної - на 26,8% (з 49,5% до 76,3%; (p<0,05). Різниця між показниками виживаності була більшою при ІІБ-ІІІ стадіях РМЗ.

Використання обробки післяопераційної рани НГ у хворих на РМЗ є доцільним, як з метою попередження ранніх післяопераційних ускладнень, так і з метою профілактики прогресування злоякісного процесу. Розроблена методика інтраопераційного зовнішнього застосування НГ на етапі хірургічного лікування хворих на РМЗ є ефективним та безпечним доповненням до існуючих методів лікування хворих на РМЗ.

Практичні рекомендації

Розроблений метод інтраопераційного місцевого застосування натрію гіпохлориту, одержаному на апараті ЕДО-3М, є безпечним, ефективним, доступним та доцільним з метою попередження ранніх післяопераційних ускладнень та профілактики місцевих рецидивів і віддалених метастазів РМЗ.

Метод інтраопераційного місцевого застосування натрію гіпохлориту найбільш ефективний у хворих з місцево-поширеними формами та при високому ризику виникнення гнійно-септичних та інших післяопераційних ускладнень.

Виконується вказаний метод наступним чином: після виконання радикальної операції в звязку з раком молочної залози, операційна рана накривається хірургічними серветками, після чого в рану заливається 100 мл 0,06%-го розчину НГ на 10 хвилин. Серветки видаляються. Встановлюється дренаж, через який витікає надлишок НГ. Післяопераційна рана зашивається.

1. Сидорчук О.І. Досвід застосування гіпохлориту натрію в хірургічному лікуванні раку молочної залози // Буковинський медичний вісник.- 2001.- Т. 6, №1. - С. 114-115.

2. Чешук В.Є., Дроздов В.М., Нейман А.М., Зотов О.С., Захарцева Л.М., Анікусько М.Ф., Зайчук В.В., Сидорчук О.І. Хірургічне лікування раку молочної залози у ранніх стадіях // Клінічна хірургія.- 2002.- №11-12.- С. 104-107. (Особистий внесок дисертанта: особисто оперував 30% хворих, що ввійшли до груп дослідження, збір та обробка матеріалу, аналіз результатів).

3. Яремчук А.Я., Зотов А.С., Чешук В.Е., Аникусько Н.Ф., Захарцева Л.М., Дятел М.В., Кравченко А.В., Лобанова О.Е., Сидорчук О.И. Оценка клинической эффективности применения нодрапарина кальция при хирургическом лечении рака молочной железы // Вопросы онкологии.- 2003.- Т. 49.- №2.- С. 205-208. (Особистий внесок дисертанта: особисто оперував та лікував 20% хворих, що ввійшли до груп дослідження, збір та обробка матеріалу, аналіз результатів).

4. Яремчук О.Я., Чешук В.Є., Кравченко О.В., Миронюк С.І., Вакуленко Г.О., Гривкова Л.В., Зотов О.С., Сидорчук О.І., Анікусько М.Ф., Зайчук В.В., Попадинець М.В., Семенчук О.Г.. Лекції з онкології. Навчальний посібник. Київ 2001. 200 с. (Особистий внесок дисертанта: провів збір матеріалу, огляд літератури, написання та підготовка до друку розділу „Передпухлинні захворювання молочної залози, рак молочної залози, клініка, діагностика та лікування, реабілітація хворих”).

5. .Яремчук О.Я., Чешук В.Є., Миронюк С.І., Вакуленко Г.О., Кравченко О.В., Гривкова Л.В., Зотов О.С., Сидорчук О.І., Зайчук В.В. Ситуаційні задачі з онкології. Підручник для студентів 5-6 курсів, магістрів та інтернів з онкології. Київ 2002р. 124 с. (Особистий внесок дисертанта: збір клінічного матеріалу, написання та підготовка до друку розділу „Рак молочної залози).

6. Деклараційний патент 38778А Україна, МКВ А61К7/20, А61Р31/02. Спосіб профілактики сером після хірургічного лікування раку молочної залози / Сидорчук О.І., Лісецький В.А., Чешук В.Є., Яремчук Г.О. (Україна).- №2000095537; Заявлено 27.09.2000; Опубл. 15.05.2001, Бюл.№4. Розподіл інтелектуальної власності у винаході - Сидорчук О.І. - 70%. Запропонував, розробив, підготував та оформив патент.

7. Деклараційний патент 44636А Україна, МКВ А61К33/00. Спосіб профілактики рецидивів після хірургічного лікування раку молочної залози / Сидорчук О.І., Кудрявец Ю.Й., Кравченко О.В., Чешук В.Є., Яремчук Г.О. (Україна).- №20010643217; Заявлено 21.06.2001; Опубл. 15.02.2002, Бюл.№2. Розподіл інтелектуальної власності у винаході - Сидорчук О.І. - 60%. Запропонував, розробив, оформив та підготував патент.

8. Деклараційний патент 68132А Україна, МКВ А61В17/00. Спосіб одномоментного ендопротезування молочної залози після мастектомії / Чешук В.Є., Зайчук В.В., Сидорчук О.І., Носко М.М. (Україна).- №2003109342; Заявлено 16.10.2003; Опубл. 15.07.2004, Бюл.№7. Розподіл інтелектуальної власності у винаході - Сидорчук О.І. - 40%. Запропонував, розробив та підготував патент.

9. Деклараційний патент 69033А Україна, МКВ А61В5/00. Спосіб прогнозування ризику малігнізації передракових захворювань молочної залози / Чешук В.Є., Попадинець М.В., Сидорчук О.І. (Україна).- №20031110775; Заявлено 28.11.2003; Опубл. 15.08.2004, Бюл.№8. Розподіл інтелектуальної власності у винаході - Сидорчук О.І. - 30%. Запропонував, розробив та підготував патент.

10. Яремчук О.Я., Дроздов В.М., Сидорчук О.І., Чешук В.Є, Катеринич О.О., Нейман А.М., Гривкова Л.В., Миронюк С.І. Зміни імунного статусу і його корекція у хворих з передпухлинними процесами молочної залози // Тези конф. „Діагностика та лікування раку молочної залози”.- Одеса, 1999.- С. 63-64.

11. Сидорчук О.И., Пирожок И.А., Микитюк О.П., Послеоперационная иммунореабилитация экстрактом эхинацеи больных раком молочной железы // Тези VI Міжнародного конгресу по імунореабілітації та реабілітації в медицині.- Москва, 2000.- Intern. J. on Immunorehabilitation.- 2000.- Vol.2№3.- P.62.

12. Яремчук О.Я., Сидорчук О.І., Чешук В.Є., Зайчук В.В. Профілактика післяопераційних ускладнень в лікуванні раку молочної залози // VI зїзд Всеукраїнського лікарського товариства Чернівці, 2001. - Українські медичні вісті.-.- Т. 4, №1(62). -С. 129.

13. Кудрявец Ю.И., Сидорчук О.И., Лисецкий В.А. Исследование цитотоксического и антипролиферативного действия гипохлорита натрия (ГХ) in vitro и его влияния на метастатический потенциал опухолевых клеток in vivo.

14. // Матеріали Х зїзду онкологів України. -Київ, 2001. -С. 43.

15. Сидорчук О.І. Методика профілактики післяопераційних ускладнень при радикальних операціях на етапі хірургічного лікування раку молочної залози // Матеріали Х зїзду онкологів України.- Крим, 2001.- C. 202-203.

16. Сидорчук О.І., Дроздов В.М., Щепотін І.Б. Метод зменшення ускладнень раннього післяопераційного періоду після хірургічного лікування раку грудної залози // Матеріали науково-практичної конференції „Актуальні питання променевої діагностики та лікування онкологічних захворювань”.- Чернівці, 2004.- С. 118.

17. Сидорчук О.І., Дроздов В.М., Лісецький В.А. Застосування гіпохлориту натрію з антибластичною метою в хірургічному лікуванні раку молочної залози // Тези доповідей Х Конгресу Світової Федерації Українських Лікарських Товариств.- Чернівці, 2004.- С. 459.

18. Сидорчук О.І. Дослідження цитотоксичної та антипроліферативної дії гіпохлориту натрію in vitro // Тези доповідей Х Конгресу Світової Федерації Українських Лікарських Товариств.- Чернівці, 2004.- С. 460.

19. Сидорчук О.І., Дроздов В.М., Чешук В.Є., Зайчук В.В., Лобанова О.Є., Носко М.М., Нейман А.М., Катеринич О.О. Застосування гіпохлориту натрію в хірургічному лікуванні раку молочної залози // Тези науково-практичної конференції „Актуальные вопросы диагностики и лечения рака молочной железы”.- Запоріжжя, 2004.- С. 125