Устройство микробиологической лаборатории - Методичка

Цель настоящего пособия - помочь студентам технологических специальностей направлений 655600, 655700, 655900 овладеть основными навыками проведения микробиологических исследований. Это способствует лучшему усвоению программы курсов «Микробиология», «Биология и микробиология» и «Техническая микробиология» в соответствии с действующими государственным стандартами образования. Общий раздел знакомит студентов с организацией микробиологической лаборатории на пищевых предприятиях, ее оборудованием и приборами, современными способами микроскопирования, помогает овладеть техникой микробиологических исследований. Особое внимание уделено правилам работы с культурами микроорганизмов, методами приготовления питательных сред, их стерилизации, получения накопительных и выделения чистых культур микроорганизмов.Разнообразные питательные вещества, в которых нуждаются микроорганизмы и которые используются ими для синтеза основных компонентов клетки, роста, размножения и для получения энергии называются питательными веществами, а среда, содержащая питательные вещества, является питательной средой. Факторы роста обязательно вносят в среды для культивирования ауксотрофных микроорганизмов (микроорганизмов, которые не способны синтезировать сами те или иные органические вещества, которые необходимы для роста и развития), а также добавляют в питательные среды в малых количествах для ускорения роста микроорганизмов, способных эти вещества синтезировать самостоятельно. К универсальным средам, используемым для выращивания бактерий, относятся мясопептонный агар и бульон (МПА, МПБ), среда для определения количества мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов (среда для определения КМАФАНМ). Примером таких сред является плотная среда Эндо, применяемая для определения бактерий группы кишечной палочки, в состав которой входит лактоза, насыщенный спиртовой раствор фуксина, обесцвеченного перед добавлением в среду 10 % водным раствором сульфата натрия (образуется бесцветная фуксин-сернистая кислота. С использованием сухих сред готовят мясопептонный бульон (МПБ), мясопептонный агар (МПА), среду Сабуро, среду Кесслера, среду для определения мезофильный аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов (среда для определения КМАФАНМ), среду Эндо и др.Раствор может храниться долгое время в бутылке из темного стекла с притертой пробкой. При приготовлении раствора предварительно взвешивают определенное количество (1 г) фуксина основного кристаллического, вносят в фарфоровую ступку и растирают с определенным количеством (5 г) карболовой кислоты, добавляя спирт небольшими порциями и дистиллированную воду до полного растворения кристаллов, после чего приливают оставшуюся воду. Фуксин основной карболовый можно приготовить другим способом: Вначале готовят два раствора. Второй раствор вливают в первый, хорошо взбалтывают и фильтруют через складчатый бумажный фильтр. Если небольшой кусок такой бумаги положить на стекло с несколькими каплями воды, он сразу же пропитается водой и краситель через несколько секунд перейдет в раствор.Для приготовления мясопептонного бульона к мясной воде добавляют 1% пептона и 0,5% химически чистого хлорида натрия, кипятят 10 мин, фильтруют через складчатый бумажный фильтр, устанавливают РН 7,2…7,4 10% раствором двууглекислой соды и снова кипятят 10 мин. Его разливают в пробирки, колбы, закрывают ватно-марлевыми пробками и стерилизуют при давлении 0,1 МПА 20-30 мин. Затем раствор охлаждают до 50 0С и осветляют взбитым куриным белком (1 белок на 1 л среды), смешанным с 30 мл воды, вновь доводят до кипения и кипятят 20 мин. Горячий агар фильтруют через ватно-марлевый слой, доводят до РН 7,2…7,4, разливают по пробиркам или колбам и стерилизуют 20 мин при давлении 0,1 МПА. К 100 мл стерильной дрожжевой воды добавляют 1% пептона, 2% агара, после растворения агара вносят 4% глюкозы или мальтозы, фильтруют, разливают в пробирки и стерилизуют при 0,05 МПА в течение 20 мин.Индекс, группа продуктов КМАФАНМ, КОЕ/г, не Более БГКП (коли-формы) Сульфитреду-Цирующиеклостридии S. aureus Протей Патогенные, в т.ч. сальмонеллы Примечание Мясо (все виды убойных животных) охлажденное 1?103 0,1 - - - 25 Отбор проб из глубоких слоев, L.monocytogenes в 25 г не допускается Изделия колбасные вареные (колбасы, сосиски, сардельки) - высшего и 1 сорта - второго сорта 1?103 2,5 ?103 1,0 1,0 0,01 0,01 1,0 1,0 - - 25 25 В сосисках и САРДЕЛЬКАХL. monocytogenes в 25 г не допускается Паштет из печени (или мяса), в т.ч. в оболочках 1?103 1,0 0,1-* - 25 *для продуктов, сроки годности которых превышают 2 суток: S.aureus в 1,0 г не допуск-ся Индекс, группа КМАФАМ, Масса продукта, в которой не допускается Дрожжи, Продуктов КОЕ/г, не более БГКП (коли-формы) S. aureus Патогенные, в т.ч.