Досліди, виконані на обробленій розчином дигітонін у суспензії гладеньком`язових клітин матки щурів, вплив реагентів, а також вивчення з використанням ізотопного методу властивостей системи Mg2 , ATP-залежного транспорту іонів Са у мітохондріях міометрія.
НАЦІОНАЛЬНА АКАДЕМІЯ НАУК УКРАЇНИО.В.Палладіна НАН України. Науковий керівник - доктор біологічних наук, професор КОСТЕРІН Сергій Олексійович, завідувач відділу біохімії мязів, заступник директора з наукової роботи Інституту біохімії ім. Офіційні опоненти: доктор біологічних наук, старший науковий співробітник ЛІТОШЕНКО Олександр Якович, керівник лабораторії молекулярної генетики Інституту геронтології АМН України; кандидат біологічних наук, старший науковий співробітник КОЛЧИНСЬКА Людмила Іллівна, старший науковий співробітник відділу нейрохімії Інституту фізіології ім. З дисертацією можна ознайомитись в бібліотеці Інституту біохімії ім.Серед гладенькомязових органів матка займає виключне положення не тільки внаслідок особливої функції, яку вона виконує в організмі при виношуванні плоду та пологах, але й з огляду на реагування на різноманітні фактори середовища, що регулюють скоротливу активність (полові гормони, гормони гіпофіза, медіатори, іони, механічне розтягання та інше) [Wray S. et al., 2001; Kim J. et al., 2002; Curley M. et al., 2002; Kayisli U. et al., 2002]. Численні порушення цієї функції, які, як правило, є основою різноманітних патологій (слабкість пологової діяльності, спонтанні аборти, передчасні пологи, викидні, атонія, гіпо-і гіпертонус матки тощо), повязані значною мірою саме з порушенням внутрішньоклітинного гомеостазу іонів Са, яким, як відомо, належить важлива роль у контролі скорочення - розслаблення гладеньких мязів [Шуба М.Ф., 2002; Kupittayanant S. et al., 2002; Wray S. et al., 2002]. Регуляція концентрації Са2 у клітинах міометрія, як і інших гладеньких мязів, забезпечується функціонуванням мембраннозвязаних Са2 -транспортуючих систем [Костерин С.А., 1990; Kosterin S.A. et al., 1994; Sanborn B.M., 2000; Burdyga T., Wray S., 2002]. Вважають, що зміни концентрації сперміну в клітині можуть призводити до помітного підвищення здатності мітохондрій накопичувати і утримувати іони Са [Евтодиенко Ю.В., 2000]. Як виявилось, використання дигітоніну у невеликих концентраціях (~0,1 мг/мл) не призводить до руйнування ендоплазматичного ретикулуму та мітохондрій і забезпечує доступ компонентів середовища інкубації (реагенти, інгібітори, іонофори, іони тощо) до внутрішньоклітинних Са2 -транспортуючих систем [Kargacin M.E., 1995; Шлыков С.Г. и др., 1997; Дерябина Ю.И., 2000].Оскільки дані щодо властивостей системи транспорту іонів Са у мітохондріях вельми обмежені, у дисертації із використанням ізотопної методики (45Са2 ) на суспензії клітин міометрія, оброблених розчином дигітоніну, ідентифікована система Mg2 ,ATP-залежної акумуляції іонів Са у мітохондріях та вивчені її властивості. Нечутливе до дії тапсигаргіну накопичення Са2 у суспензії міоцитів матки повністю пригнічується рутенієвим червоним (10 МКМ) та азидом натрія (10 ММ) і, таким чином, є проявом функціональної активності Mg2 ,АТР-залежного кальцієвого уніпортера мітохондрій гладенькомязових клітин. Стаціонарний рівень накопичення Са2 у мітохондріях (на 5-й хвилині інкубації) становив 1460 54 пмоль Са2 /106 міоцитів, значення початкової швидкості транспортного процесу Vo - 1260 130 пмоль Са2 /106 клітин за 1 хв. Катіони двовалентних металів неспецифічно пригнічували Mg2 ,ATP-залежний транспорт Ca2 в мітохондріях клітин гладенького мязу у відповідності із рядом: Cu2 > Ni2 > Co2 (уявна константа інгібування І0,5 становить 4,2 0,2, 51 4 та 290 30 МКМ відповідно). Інгібітори енергозалежного накопичення Са2 з різним ступенем ефективності пригнічували Mg2 ,АТР-залежну Са2 -акумулюючу систему мітохондрій клітин гладенького мязу.
Вы можете ЗАГРУЗИТЬ и ПОВЫСИТЬ уникальность своей работы
