Створення та експериментальне дослідження активності ліпосомної форми препарату тимічних гормонів - Автореферат

КИЇВСЬКИЙ НАЦІОНАЛЬНИЙ УНІВЕРСИТЕТРобота виконана в Інституті експериментальної радіології Наукового центру радіаційної медицини АМН України, лабораторії імуногенетики. Науковий керівник: доктор медичних наук Нікольський Ігор Сергійович Науковий центр радіаційної медицини АМН України, Інститут експериментальної радіології, завідувач лабораторії імуногенетики. Офіційні опоненти: доктор медичних наук, професор Малижев Вадим Олексійович, Український науково-практичний центр ендокринної хірургії, трансплантації ендокринних органів і тканин МОЗ України, завідувач лабораторії клінічної імунології; доктор біологічних наук, старший науковий співробітник Бичкова Ніна Григорівна, Національний медичний університет ім. Захист відбудеться “19” червня 2007 року о 1400 на засіданні спеціалізованої вченої ради 26.001.14 Київського національного університету імені Тараса Шевченка за адресою: м.Вагомий внесок в розробку препаратів гормонів тимусу зробили вітчизняні вчені [Гриневич Ю.А. и др., 1989]. Сьогодні відомо, що гормони тимусу впливають на проліферацію, диференціювання, активність і апоптоз практично всіх імунокомпетентних клітин, хоча основною мішенню їх дії є лімфоцити Т-ряду [Гриневич Ю.А. и др., 1989; Ярилин А.А. и др., 1991; Ohmori H. et al, 2001; Evstrafieva Саме такий підхід уявляється одним із найбільш прийнятних для отримання ліпосомної форми препаратів тимічних гормонів і, теоретично, може наділити препарат цілим рядом важливих якостей, що змінить певною мірою механізм дії імуномодулятора і дозволить розширити показання для його клінічного використання та підвищення лікувальної ефективності тимічних гормонів при певній патології, що разом узяте можна вважати перспективним напрямком вивчення імунобіології гормонів тимусу. Дисертаційна робота була виконана згідно з науковими дослідженнями лабораторії імуногенетики відділу медичної генетики Інституту експериментальної радіології Наукового центру радіаційної медицини АМН України за темою “Створення та вивчення механізму дії нового імунокоректора на основі композиції ліпосомних структур із гормонів тимусу та загальних ліпідів” (№ ДР 0103U005714). При дослідженні умов створення ліпосомного препарату гормонів тимусу вперше встановлено, що ефективне фракціонування водно-сольового екстракту тимусу з метою отримання препарату, активного в тесті відновлення експресії Thy1-антигену на спленоцитах тимектомованих мишей, може бути досягнуто за допомогою ацетону практично без застосування допоміжних процедур.Імунобіологічну активність тимосоміну визначали in vitro зі зразками крові 24 донорів крові, 21 постраждалого від аварії на ЧАЕС та 25 ВІЛ-інфікованих людей. ліпосомний тимус гормон біологічний Для формування уявлення про особливості дії тимосоміну його активність порівнювали із такою ліпосомного препарату ліпіну (”Біолік”) в концентрації 0,175 мг/мл (за перерахунком з рекомендованої дози) та розчинного препарату гормонів тимусу тималіну (“Біофарма”) в концентрації, яка за вмістом білку, визначеного методом Лоурі, відповідала концентрації тимосоміну. В цих тестах додатково використовували тималін в концентрації 200 мкг/мл (концентрація, яку рутинно використовують для визначення дії гормонів тимусу на Е-РУК). Маючи за мету розробку методики отримання активного препарату гормонів тимусу, ми використали фракціонування водно-сольового екстракту тимусу телят сірчанокислим амонієм, органічними розчинниками (ацетоном та етанолом), діаліз та нагрівання для дослідження технологічних схем отримання препаратів гормонів тимусу. Враховуючи, що фракція 55-85 виявила здібність до індукції РТПА in vivo в менших дозах, ніж кількість препарату, що проявляє вплив in vitro в тесті Bach, а також те, що індукція РТПА є одним із головних механізмів дії гормонів тимусу in vivo, наявність такої активності підкреслили в назві препарату - тимоіндуктин.У дисертаційній роботі наведене теоретичне обгрунтування та експериментальні дані по вирішенню наукового завдання щодо дослідження умов створення ліпосомного препарату гормонів тимусу та вивчення його здатності індукувати синтез речовин з тимозинподібною дією in vivo та впливу на функціональну активність клітин імунної системи донорів крові, людей, постраждалих від аварії на ЧАЕС, та ВІЛ-інфікованих in vitro. Активні в тесті відновлення Thy-1-антигену на спленоцитах тимектомованих мишей фракції тимічних гормонів можуть бути отримані при фракціонуванні водно-сольового екстракту тимусу за кількома схемами із залученням стандартних методичних підходів у різній послідовності та сполученні. Тимосомін відновлює експресію Thy-1-антигену на спленоцитах тимектомованих мишей in vitro, індукує синтез речовин з тимозинподібною дією у нормальних і тимектомованих мишей in vivo, а також індукує синтез ФНПА лейкоцитами донорів крові та постраждалих від аварії на ЧАЕС, що свідчить про належність тимосоміну до імунопрепаратів з індукторним механізмом дії.

ОСНОВНИЙ ЗМІСТ РОБОТИ