При низкой оригинальности работы "Создание рекомбинантного штамма Saccharomyces cerevisiae с геном целлобиогидролазы гриба Lentinula edodes в HO локусе хромосомы", Вы можете повысить уникальность этой работы до 80-100%
Создание рекомбинантного штамма Saccharomyces cerevisiae с геном целлобиогидролазы гриба Lentinula edodes в HO локусе хромосомыС помощью генноинженерных методов сконструирована PHO-GAPDH-?-cel7A-myc-6His-KANMX4-HO интегральная конструкция, включающая ген целлобиогидролазы cel7A гриба Lentinula edodes с сигнальным пептидом ?-фактора дрожжей, Мус-эпитопом и гистидиновым хвостом. Хромосомная интеграция гена целлобиогидролазы cel7A гриба L. edodes в НО локус генома дрожжей была подтверждена методом ПЦР. В связи с этим конструирование интегрального вектора с геном целлобиогидролазы гриба Lentinula edodes под контролем сильного промотора, с сигнальным пептидом ?-фактора дрожжей, myc-эпитоп и 6XHIS хвостом, и создание стабильного рекомбинантного штамма Saccharomyces cerevisiae, эффективно экспрессирующего ген целлобиогидролазы cel7A, и обеспечивающего секрецию продукта этого гена в окружающию среду имеют большое теоретическое и практическое значение. Для создания интегрального вектора с промотором глицероальдегид-дифосфат дегидрогеназы (GAPDH), сигнальным пептидом ?-фактора дрожжей и гистидиновым тэгом нами были использованы несколько плазмидных векторов в качестве источников промотора, сигнального пептида, Myc-эпитопа и 6XHIS тэга (таблица 1). Далее путем обработки полученной рекомбинантной плазмиды ферментом рестрикции HINDIII и фрагментом Кленова для получения тупых концов, фрагмент длиной около 2700 п.н., соответсвующий длине PGAPDH-?-MCS-myc-6XHIS-TGAPDH кассеты, лигировали в корпус интегрального вектора М4297 [6], порезанный по сайту рестрикции фермента SMAI, в результате чего был получен РНО-GAPDH-?-myc-6XHIS-KANMX4-HO экспрессионный вектор c промотором GAPDH, сигнальным пептидом ?-фактора дрожжей и гистидиновым тэгом.
Вы можете ЗАГРУЗИТЬ и ПОВЫСИТЬ уникальность своей работы
