Скоротлива активність міометрію за умов впливу прозапальних цитокінів та при експериментальному імунному ушкодженні яєчників у мишей - Автореферат

Національна академія наук України Автореферат дисертації на здобуття наукового ступеня кандидата біологічних наукРобота виконана у відділі імунології та цитотоксичних сироваток Інституту фізіології ім. Науковий керівник: доктор біологічних наук, професор Янчій Роман Іванович, провідний науковий співробітник відділу імунології та цитотоксичних сироваток Інституту фізіології ім. Офіційні опоненти: доктор біологічних наук Владімірова Ірина Архипівна, провідний науковий співробітник відділу нервово-мязевої фізіології Інституту фізіології ім. Богомольця НАН України доктор медичних наук, профессор Чернишов Віктор Павлович, завідувач лабораторії імунології Інституту педіатрії, акушерства і гінекології АМН України Захист відбудеться 22.02.2011 р. о 14 год на засіданні спеціалізованої вченої ради Д 26.198.01 при Інституті фізіології ім.Завдяки взаємозвязку імунної та репродуктивної систем, наявність чи розвиток імунних дисфункцій може спричиняти низьку якість ооцитів, дефекти запліднення яйцеклітин, порушення розвитку та імплантації ембріонів (Kessel Відомо, що мітохондрії, регулюючи активність аргінази, приймають участь у зміні скоротливої активності міометрію (Hirata M., Obayashi S., Sakamoto S., et al., 2006). Дослідити скоротливу активність міометрію та зміну в часі амплітуди скорочень не вагітної миші за умов дії рекомбінантних цитокінів ФНП?, IL-2 та цитокіноподібного пептиду ЕМАР ІІЕ з застосуванням фармакологічних препаратів - донорів та блокаторів оксиду азоту, мітохондріальних переносників, мембранного потенціалу. Оцінити скоротливу активність міометрію миші за умов зміни функціонального стану мітохондрій, а також вивчити зміну в часі амплітуди скорочень при фармакологічному інгібуванні мітохондріальних переносників та кальцієвого уніпортеру, мембранного потенціалу, аргінази. Дослідити функціональний стан органів репродуктивної системи: яєчників (мейотичне дозрівання ооцитів), яйцеводів та міометрію (скоротливу активність) протягом гестації, оцінити пре-і постімплантаційну смертність та розвиток ембріонів при експериментальному імунному ураженні яєчників у мишей.Першу групу складали тварини на перший день, другу і третю - на 5 та 12 день після завершення імунізації (спаровування по завершенню імунізації, самки не завагітніли), четверту та пяту групу - на 19 та 25 день після завершення імунізації (спаровування на 14 день після завершення імунізації, вагітні). Оцінювали максимальну амплітуду скорочення відносно базального тонусу, МН; максимальну швидкість скорочення (позитивний пік першої похідної скорочення), МН/с; максимальну швидкість розслаблення (негативний пік першої похідної скорочення), МН/с; розраховували індекс скоротливості (добуток амплітуди скорочення на відношення швидкості скорочення до швидкості розслаблення), МН. При дослідженні зміни в часі амплітуди скорочень міометрію в кожній серії експериментів оцінювали їх амплітуду через кожні 2 хв. протягом 20 хв., вираховували середнє значення і представляли як М±? (10?n?4), при побудові графіків дані представляли у %, за 100 % взято зачення величини амплітуди скорочень у контролі. Крім того, мітохондрій-специфічну фарбу, блокатор синтезу АТФ мітохондріями (Rh 123, 10 мкмоль/л) (Sigma, США), блокатор кальцієвого уніпортеру (RUR, 1 мкмоль/л) (Sigma, США), дисемінатор мітохондріального мембранного потенціалу (FCCP, 4 мкмоль/л) (Sigma, США), інгібітор роботи аспартатного переносника (РРТ, 30 мкмоль/л) (Sigma, США), а також содіум октаноат (S.О., 0,5 ммоль/л) (Sigma, США), який використовували для відміни впливу інгібітора мітохондріальних переносників та мітохондріальний субстрат малат октаноат (14 ммоль/л) (Sigma, США), неспецифічний блокатор NO синтаз (L-NAME, 0,1 ммоль/л) (Sigma, США), специфічний блокатор аргіназ (L-Norvaline, 50 мкмоль/л) (Sigma, США), інгібітор відкривання мітохондріальної пори (циклоспорин А, 15 ммоль/л) (Sigma, США), стероїдний гормон ?-естрадіол (1мкмоль/л) (Sigma, США), рекомбінантні цитокіни ФНП? (200 нг/мл) (ГНЦ “Вектор”, Росія) та ІЛ-2 (150 нг/мл) (“Ферментас”, Литва), цитокіноподібний пептид ЕМАР ІІЕ (10 мкмоль/л) (Інститут МБІГ НАНУ ). Тоді як при одночасній дії ЕМАР ІІЕ, FCCP та 2L-NAME /1L-Norvaline на 2 хв дії амплітуда скорочень складала 19,26±1,91 МН (р<0,05), на 4 хв дії - 5,53±1,03 МН (р<0,001), на 6 хв дії - 2,21±0,19 МН (р<0,001), вірогідно відрізняючись від дії одного FCCP (р<0,05).У дисертаційній роботі відповідно до поставленої мети дослідження наведено теоретичне узагальнення та подано нове вирішення наукового завдання в розкритті особливостей скоротливої активності гладеньких мязів матки за умов дії прозапальних цитокінів, використовуючи метод фазно-графічного аналізу.

Основний зміст