Скоротлива активність гладеньких м"язів артерій та вміст внутрішньоклітинного Са2 за дії оксиду азоту та його донорів - Автореферат

Академія медичних наук України Автореферат дисертації на здобуття наукового ступеня кандидата біологічних наукУ результаті проведених досліджень було доведено, що NO викликає розслаблення гладеньких мязів (ГМ) хвостової артерії щура не лише за рахунок зниження внутрішньоклітинної концентрації Са2 , а також за рахунок зменшення Са2 -чутливості регуляторних та/або скоротливих білків. НГ виявився єдиною речовиною, для котрої із збільшенням її концентрації скоротлива активність зменшується набагато більше, ніж зменшується рівень [Са2 ]і, тобто відбувається дисоціація між зміною вмісту [Са2 ]і та скоротливою активністю. Було показано, що дія будь-якої з досліджуваних речовин - НГ, НПН та NO, істотно залежить від способу преактивації ГМ, де для всіх досліджуваних речовин відбувається закономірний зсув кривих концентрація-ефект праворуч за умов преактивації ГМ з допомогою фенілефрину. Для всіх досліджуваних речовин встановлена здатність розслабляти ГМ хвостової артерії щура та знижати вміст [Са2 ]і через альтернативний ЦГМФ-незалежний шлях. В результате проведенных исследований было доказано, что NO вызывает расслабление гладких мышц (ГМ) хвостовой артерии крысы не только за счет снижения внутриклеточной концентрации Са2 , а также за счет уменьшения Са2 -чувстительности регуляторных и/или сократительных белков.У наш час біля шістдесяти відсотків людей, що гинуть від хвороб, страждають на хвороби серцево-судинної системи, більшість з яких викликана підвищенням кровяного тиску в периферійній кровоносній системі або ішемією органів та тканин, що обумовлює перспективність цієї галузі досліджень для фармакології. Мета дослідження полягала в дослідженні шляхів впливу NO та його фармакологічних донорів - нітрогліцерину та нітропрусиду натрію на скоротливу активність та вміст внутрішньоклітинного кальцію гладеньких мязів хвостової артерії щура. Вивчити динаміку одночасної зміни скоротливої активності та вмісту внутрішньоклітинного Ca2 ([Са2 ]i) ГМ хвостової артерії щура за дії NO та його фармакологічних донорів - нітрогліцерину (НГ) та нітропрусиду натрію (НПН). Дослідити вплив NO та його донорів на різні ланки Са2 -сигналізації скоротливої активності залежно від типу попередньої активації ГМ хвостової артерії щура. Зясувати існування ЦГМФ-незалежного механізму розслаблення ГМ хвостової артерії щура за дії NO та його донорів.Скоротливу активність та ?[Ca2 ]i кілець хвостової артерії щура реєстрували, використовуючи електронну інтеграцію активного натягу та флуоресцентного сигналу від фотоелектричного множника стосовно часу. Кільця хвостової артерії щура завантажували, використовуючи розчин для завантаження: Fura-2AM 10 МКМ; DMSO 2,5% (по обєму); Pluronic F-127 0,5% (по масі); БСА 5% (по масі); розчин Кребса 95% (по обєму); HEPES 11,6; РН=7,35; протягом 2 годин за кімнатної температури. Результати наших досліджень показали, що NO здатний знижувати скоротливу активність ГМ хвостової артерії щура, тобто викликати розслаблення, не лише за рахунок зниження вмісту [Са2 ]і, що відбувається лише короткочасно, а й за рахунок зміни Са2 -чутливості регуляторних та/або скоротливих білків ГМ (Рис. Результати показали, що за умов скорочення ГМ за умов скорочення ФЕ NO за максимальних концентрацій викликав 100% зниження вмісту [Са2 ]і, що свідчить про те, що активація К -каналів безпосередньо NO відбувається не через SH-групу каналу, а йншим чином, і що саме активацією К -каналів, а звідси гіперполяризацією плазматичної мембрани можна пояснити таке зниження порівяно з умовами К -активації ГМ. Результати показали, що НГ являє собою єдину речовину, для котрої за умов К -активації ГМ хвостової артерії щура характерно, що із збільшенням концентрації НГ, скоротлива активність зменшується набагато більше, ніж зменшується рівень [Са2 ]і, тобто відбувається дисоціація між зміною вмісту [Са2 ]і та скоротливою активністю (Рис.У результаті проведених досліджень було показано, що NO викликає розслаблення гладеньких мязів хвостової артерії щура не лише за рахунок зниження вмісту [Са2 ]і, а також за рахунок зменшення Са2 -чутливості регуляторних та/або скоротливих білків. Для всіх досліджуваних речовин - нітрогліцерину, нітропрусиду натрію та NO встановлена здатність розслабляти гладенькі мязи хвостової артерії щура та знижати вміст [Са2 ]і через альтернативний ЦГМФ-незалежний шлях.

2. Основний зміст роботи