Одержання антигену для сенсибілізації планшет, який містить кілька білків вірусу Епштейна-Барра та підтвердження його специфічності. Оптимізація умов проведення всіх етапів імуноферментного аналізу, складу детектуючих компонентів та буферних розчинів.
При низкой оригинальности работы "Розробка специфічних компонентів імуноферментної тест-системи для визначення антитіл до вірусу Епштейна-Барр", Вы можете повысить уникальность этой работы до 80-100%
НАЦІОНАЛЬНА АКАДЕМІЯ НАУК УКРАЇНИЗ дисертацією можна ознайомитись у бібліотеці Інституту мікробіології і вірусології ім. Цей показник досить низький і становить 2,4%, 4,1% та 2,2% відповідно для ВЕБ та вірусу герпесу звичайного 1-го типу, ВЕБ та цитомегаловірусу, ВЕБ та вірусу оперізуючого лишаю. імуноферментний антиген вірус епштейн В них визначені високі рівні антитіл до ВЕБ, що свідчить про значну напруженість специфічного імунітету та широку циркуляцію цього вірусу В результаті проведених досліджень вперше в Україні розроблена твердофазна імуноферментна тест-систему, яка дозволяє виявляти антитіла (IGG та IGM) проти вірусу Епштейна-Барр в сироватках крові людини та проводити диференційну діагностику захворювань, спричинених ВЕБ. В качестве специфического антигена при конструировании тест-системы, лабораторный образец которой получил название „ИФА-АТВЭБ-стрип”, использовали экстракт лимфобластоидных клеток В95-8, которые трансформированы этим вирусом и хронически продуцируют его антигены, а также целые вирусные частицы.Клінічною формою первинного інфікування людини вірусом Епштейна-Барр (ВЕБ) вважається інфекційний мононуклеоз - досить поширене, переважно серед дітей, тяжке захворювання з ураженням лімфатичної системи, крові, а також гепатоспленомегалією та ангіною. Але найбільш розповсюдженим та інформативним для лабораторної діагностики ВЕБ-інфекції є метод імуноферментного аналізу (ІФА) - високочутливий, специфічний та найбільш прийнятний для масштабних досліджень, який може бути спрямований на виявлення антигенів вірусу, чи, частіше, специфічних антитіл. Існують закордонні тест-системи на виявлення антитіл проти вірусу Епштейна-Барр з використанням різних рекомбінантних антигенів вірусу, що дають змогу провести етіологічну діагностику захворювання, а також диференціювати стадії хвороби. Виконана в рамках гранту Міністерства освіти і науки України “Розробити імуноферментну тест-систему для етіологічної діагностики вірусу Епштейна-Барр і підготувати необхідну НТД” за договором 2/964-97 в 1997-2000 роках (шифр: 02.07/04228, N державної Реєстрації 01.97.U 019180) та в рамках гранту Київської міської держадміністрації "Розробка імуноферментної тест-системи для етіологічної діагностики вірусу Епштейна-Барр і підготовка необхідної науково-технічної документації" №26-98 за 1998-2001 роки. Метою дослідження була розробка специфічних компонентів для конструювання на їх основі високочутливої вітчизняної імуноферментної тест-системи для виявлення антитіл (IGG та IGM) проти вірусу Епштейна-Барр, її всебічна характеристика, дослідження рівня антигенної спорідненості ВЕБ з деякими представниками родини герпесвірусів, вивчення поширеності ВЕБ серед різних груп населення, апробація одержаних зразків тест-системи.Створені панелі позитивних та негативних сироваток, які гарантовано містять або не містять антитіла до вірусу Епштейна-Барр. Вивчені рівні антигенної спорідненості вірусу Епштейна-Барр з вірусом герпесу звичайного 1-го типу, цитомегаловірусом, вірусом оперізуючого лишаю, які становили відповідно 2,4 %, 4,1 % та 2,2 %. З використанням розробленої тест-системи “ІФА-АТВЕБ-стрип” було досліджено понад 2 000 сироваток, з них: хворих на інфекційний мононуклеоз 928; хворих на туберкульоз 176; хворих на лімфопроліферативні захворювання 20; здорового населення (донори, здорові вагітні жінки) 912, також досліджені 45 серій “Імуноглобуліну людини нормального” виробництва ДКПВБП “Біофарма”.
План
ОСНОВНИЙ ЗМІСТОСНОВНИЙ ЗМІСТ РОБОТИ ВИКЛАДЕНО У ПУБЛІКАЦІЯХ
2. Загородня С.Д., Нестерова Н.В., Баранова Г.В., Рыбалко С.Л., Василенко Л.Г., Руденко А.А. Обнаружение антител к вирусу Эпштейна-Барр в сыворотках крови доноров и больных инфекционным мононуклеозом // Бюлетень Інституту сільськогосподарської мікробіології УААН. - Чернігів, 2000. - N7.- C.53.
3. Н.С. Дяченко, К.В.Курищук, Л.С.Рядская, Н.И.Нетреба, С.П.Писарева, Э.Г.Михайлова, Н.В.Нестерова, С.Д. Загородняя, Н.Я.Спивак, В.П.Лозицкий, В.В.Смирнов. Специфические иммуноглобулины как эффективные препараты для лечения вирусных инфекций: современное состояние и насущные задачи. // Мікробіол. Журн. - 2002. - 63,N1. - с.3-10.
4. Загородня С.Д., Нестерова Н.В., Баранова Г.В. Дослідження антигенної спорідненості вірусу Епштейна-Барр з іншими герпес вірусами. // Вісник Біологія. Вип. 35, Київський Національний Університет ім. Тараса Шевченка.-2001.- С.40-43.
5. Загородня С.Д., Дяченко Н.С., Рыбалко С.Л., Повница О.Ю., Руденко А.А., Василенко Л.Г. Некоторые подходы к созданию иммуноферментной тест-системы для обнаружения антител против вируса Эпштейна-Барр // ІІ Науково- практична конференція „Біоресурси та віруси”. - К., 1998. - С.60.
6. S. Zagorodnya, N. Nesterova, N. Dyachenko, S. Rybalko Revealing of Epstein-Barr virus (EBV) antibodies in sera of healthy population // “Матеріали II зїзду онкологів країн СНД”. - К., 2000. - c.195.
7. S. Zagorodnya N. Nesterova, N. Dyachenko, A. Kollos Revealing of antibodies to Epstein-Barr virus (EBV) in sera of patients with infectious mononucleosis, tuberculosis and HIV infection. // 11th European Congress of Clinical Microbiology and Infectious Diseases. Istanbul (Turkey), 1-5 may, 2001. - Istanbul, 2001. - P.764.
8. Загородня С.Д., Нестерова Н.В., Баранова Г.В. Исследование антигенного родства вируса Эпштейна-Барр с другими герпесвирусами // ІІІ Науково- практична конференція „Біоресурси та віруси” - К., 2001. - С.50.
9. Загородня С.Д., Дяченко Н.С., Нестерова Н.В., Баранова Г.В., Рибалко С.Л., Василенко Л.Г. С.Д. Загородняя, Н.С Технология получения специфического антигена для иммуноферментной тест-системы на антитела к вирусу Эпштейна-Барр и критерии ее качества. // Международная научно-практическая конференция “Новые технологии получения и применения биологически активных веществ” (Алушта, 20-25 мая 2002.). - Алушта. - 2002- с.118.
10. Пат. UA№40966А. Тест-система на виявлення антитіл проти вірусу Епштейна-Барр “ІФА-АТВЕБ-стрип”. // Загородня С.Д., Дяченко Н.С., Нестерова Н.В., Баранова Г.В., Рибалко С.Л., Василенко Л.Г., Іванська Н.В. Бюлет. №7. - 15.08.2001.
Размещено на .ru
Вы можете ЗАГРУЗИТЬ и ПОВЫСИТЬ уникальность своей работы
