Розробка протипухлинних аутовакцин на основі білоквмісних метаболітів B. subtilis В-7025 та їх вплив на окремі реакції протипухлинного імунітету (експериментальні дослідження) - Автореферат

Національна академія наук УкраїниРобота виконана в Інституті експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. Науковий керівник - доктор медичних наук Потебня Григорій Платонович, завідувач відділу конструювання засобів біотерапії раку Інституту експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. доктор медичних наук, професор Савцова Зоя Дмитрівна, професор кафедри природничих наук Національного університета «Києво-Могилянська академія»; доктор біологічних наук, професор Орел Валерій Еммануїлович, керівник лабораторії медичної фізики та біоінженерії ДУ «Національний інститут раку» МОЗ України. Захист відбудеться “22” жовтня 2008 року об 1500 годині на засіданні спеціалізованої вченої ради Д 26.155.01 в Інституті експериментальної патології, онкології і радіобіології ім.Тому актуальним і перспективним напрямком подальшого дослідження стало виділення і характеристика компонентів мікробного синтезу B. subtilis В-7025, які проявляють цитотоксичну дію на пухлинні клітини і мають імунотропну активність, з метою вдосконалення і стандартизації технології конструювання протипухлинних вакцин. Кавецького НАН України у відповідності з напрямком науково-дослідних робіт Інституту за темами: «Дослідити механізми лікувально-профілактичної дії протипухлинної вакцини та модифікаторів активності ферментів для підвищення протипухлинної резистентності організму» (1998-2000 рр., державний реєстраційний номер 0198U001091), «Розробити нові підходи для підвищення ефективності протипухлинних вакцин» (2001-2003 рр., державний реєстраційний номер 0101U00784), «Фундаментальне обґрунтування нових підходів по удосконаленню протипухлинних аутовакцин, виготовлених за допомогою компонентів B. subtilis B-7025» (2004-2006 рр., державний реєстраційний номер 0104U000590). Виділити з фільтрату культуральної рідини Bacillus subtilis В-7025 окремі компоненти мікробного синтезу, які проявляють цитотоксичну дію на пухлинні клітини та мають імунотропні властивості, сконструювати за їх допомогою вакцини та дослідити їх протипухлинну ефективність. Сконструювати, використовуючи виділені білоквмісні складові ФКР В. subtilis B-7025, протипухлинні вакцини, дослідити їх ефективність та вплив на окремі реакції протипухлинного імунітету на різних моделях пухлинного росту. Водночас показано, що компонент з мол. масою 18,5 КДА реалізує цитотоксичну активність за рахунок протеолітичної дії на пухлинні клітини, а цитотоксична дія компоненту з мол. масою 70 КДА проявляється, скоріш за все, за рахунок його звязування з мембраною пухлинної клітини і «злущування» протеїнів з її поверхні.В експериментах in vivo ПВ (або її компоненти) в обємі 0,3 мл/тварину вводили на другу добу після перещеплення ПК підшкірно раз на тиждень, протягом 3-х тижнів. Для подальшої роботи нами було відібрано два ЦТ-компоненти ФКР - фракції, насичені білком з мол. масою 18,5 КДА (компонент (18,5 КДА)) і білком з мол. масою 70 КДА (компонент (70 КДА)). Було встановлено, що обидва компоненти викликають in vitro некротичну загибель ПК, але різняться за терміном її розвитку: ПК гинули після 2-х год. інкубації з компонентом (18,5 КДА) і після 3-4-х год. при культивуванні з компонентом (70 КДА). В експериментах in vivo було показано, що ПВ, виготовлені з ПК S37 та цитотоксичних компонентів, мають виражену протипухлинну дію - достовірно подовжують СТЖ вакцинованих тварин (на 42,3 % - при застосуванні ПВ з компонентом (18,5 КДА) та на 53,9 % - при застосуванні ПВ з компонентом (70 КДА)). Використання компоненту (18,5 КДА) призводило до збільшення АЗЦ Мф, а компоненту (70 КДА) - до стимуляції антитілозалежних реакцій, опосередкованих клітинами макрофагального та лімфоцитарного ряду. фільтрат культуральний протипухлинний вакцинаВперше з фільтрату культуральної рідини B. subtilis В-7025 виділено та охарактеризовано дві активні білоквмісні фракції, які проявляють цитотоксичну дію на пухлинні клітини - компонент (18,5 КДА) та компонент (70 КДА). Показано, що компонент (18,5 КДА) реалізує цитотоксичну активність за рахунок протеолітичної дії, а компонент (70 КДА) - за рахунок звязування з мембраною пухлинних клітин та «злущування» з її поверхні білків. Обидва компоненти викликають некротичну загибель пухлинних клітин.

Основний зміст