Роль toll-подобных рецепторов и ИЛ-10 в патогенезе экспериментального иерсиниоза - Автореферат

Роль toll-подобных рецепторов и ИЛ-10 в патогенезе экспериментального иерсиниоза АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наукРабота выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Российский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» Научные руководитель: доктор медицинских наук, профессор Иван Генрихович Козлов Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор Марина Александровна Стенина доктор медицинских наук, профессор Виктор Фадеевич Семенков Защита состоится «29» мая 2007г. в 14.00 часов на заседании диссертационного совета Д 208.072.05 при Российском государственном медицинском университете по адресу 117997, Москва, ул.Млекопитающие обладают множеством рецепторов для распознавания микробных агентов и немедленного запуска врожденного иммунного ответа. В частности, к ним относятся так называемые toll-like рецепторы (TLRS), которые также известны как паттерн-распознающие (PRRS, pattern recognition receptors). Среди иммуносупрессивных воздействий этого патогена наибольшую роль отводят: · короткодистантному эффекту - прямое подавление синтеза фактора некроза опухоли-? (ФНО-?) через активацию TLRS, осуществляемое за счет аппарата секреции/транслокации III типа (TTS) и белков наружной мембраны Y. enterocolitica (Yops - Yersinia outer proteins); Показано, что линейные мыши с отсутствием экспрессии TLR2 являются более устойчивыми к иерсиниозу, чем животные, экспрессирующие этот рецептор. В результате сравнения инфекционного процесса, вызванного Y. enterocolitica у линейных мышей, установлено, что экспрессия TLR2 при иерсиниозе имеет более важное значение с точки зрения иммунного ответа организма на вторжение патогена по сравнению с экспрессией TLR4.Для проведения опытов in vitro клетки поддерживали культивированием в среде RPMI 1640, содержащей 2 MM L-глютамина, 10 MM Хепес-буфера, 100 мкг/мл стрептомицина, 100 ЕД/мл пенициллина и 10% инактивированную ЭТС при 37?С и 5% содержании СО2 в окружающем воздухе. Клетки культивировали в среде RPMI 1640 с добавлением 10% ЭТС, 2 MM L-глютамина, неэссенциальных аминокислот, 1 MM пирувата натрия, 9 ug/мл коровьего инсулина, 200 ЕД/мл пенициллина и 200 мкг/мл стрептомицина . Для экспериментов использовали 3-суточные культуры; концентрация клеток составляла 2?105 клеток/мл. Клетки линии HEK 293 использовались для трансфекции в концентрации 3?105 клеток/мл. Для реализации поставленной задачи были получены перитонеальные макрофаги мышей линии C57BL/6 с отсутствием экспрессии CD14 (CD14(-/-)) и мышей дикого типа, экспрессирующих данный маркер (CD14( / )).V-антиген Y. enterocolitica (LCRV) обладает иммуносупрессивным эффектом как in vitro (макрофаги мыши и человека), так и in vivo, который проявляется в индукции ИЛ-10 и подавлении секреции ФНО-?. Взаимодействие LCRV с рецепторным комплексом CD14/TLR2 приводит к генерации внутриклеточного сигнала и активации NF-KB.

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ