Роль Са2 -залежної месенджерної системи в розвитку коліт-асоційованого канцерогенезу - Автореферат

Київський національний університет імені Тараса ШевченкаРоботу виконано у лабораторії фізико-хімічної біології кафедри біохімії біологічного факультету Київського національного університету імені Тараса Шевченка. Офіційні опоненти: - доктор біологічних наук, старший науковий співробітник Весельський Станіслав Павлович, НДІ фізіології імені академіка Петра Богача біологічного факультету Київського національного університету імені Тараса Шевченка, старший науковий співробітник відділу загальної фізіології; Захист дисертації відбудеться "23" лютого 2009 року о 14.00 годині на засіданні спеціалізованої вченої ради Д 26.001.24 Київського національного університету імені Тараса Шевченка за адресою: м. З дисертацією можна ознайомитись у бібліотеці Київського національного університету імені Тараса Шевченка за адресою: м. Досліджено функціональний стан основних елементів Са2 -залежного сигнального шляху (фосфоліпази С, фосфоліпідів, Са2 , протеїнкінази С та Са2 /кальмодулінзалежної протеїнкінази) та окремих ланок інших месенджерних систем (NO-синтази, протеїнкінази А, протеїнкінази G та тирозинової протеїнкінази) за умов формування коліт-асоційованого канцерогенезу.Виразковий коліт (ВК) - є хронічним захворюванням, яке характеризується дистрофічними та атрофічними деструктивними змінами слизової оболонки товстої кишки і супроводжується порушенням її секреторних і моторних функцій [Фарелл Р. та ін., 2003; Daniel K. et al., 2002]. До таких механізмів також слід віднести зміни у функціонуванні ряду внутрішньоклітинних сигнальних систем, ключовими ланками яких є Са2 -залежні протеїнкінази, рівень і активність яких може змінюватись під впливом різних факторів [Strober W. et. al., 2007]. За таких умов особливого значення набувають дослідження структурно-функціонального стану мембран, який визначається вмістом ліпідних компонентів, інтенсивністю процесів вільнорадикального окиснення, функціонуванням системи антиоксидантного захисту та активністю мембранозвязаних ферментів, зокрема протеїнкіназ [Хендерсон, 1997]. На сьогоднішній день в літературі відсутні дані щодо комплексного дослідження ролі Са2 -залежної месенджерної системи та її звязків з окремими елементами інших сигнальних каскадів, які можуть бути залученими у розвиток запалення і трансформації клітин слизової оболонки товстого кишечника. Такі дослідження відкриють перспективу ранньої діагностики та направленої терапевтичної корекції патологічних процесів за умов коліт-асоційованого канцерогенезу.Розвиток експериментального коліт-асоційованого канцерогенезу товстої кишки у піддослідних тварин індукували згідно з методом [Wang J. G. et. al., 2004] шляхом повної заміни питної води на 1,5% розчин декстрансульфат натрієвої солі (далі ДСН, М. м. Розвиток патологій діагностували за симптомами, а ступінь уражень слизової оболонки товстої кишки оцінювали при аутопсії візуально та гістологічно. Активність СОД у клітинах визначали згідно з методом [Чевари С., 1985] і виражали в умовних одиницях за 1 хв. на мг білка. Визначення активності Са2 , фосфоліпідзалежних протеїнкіназ проводили за методом [Parames S., 1998]; активності Са2 /кальмодулінзалежних протеїнкіназ - за методом [Hunter T. et. al., 1991]; активності циклонуклеотидзалежних протеїнкіназ - відповідно до рекомендацій [Gill G.N. et. al., 1979]; активності тирозинових протеїнкіназ - як описано в [Brian E., 2001]. Тому у якості показників, що описують стан ліпідного матриксу плазматичних мембран епітеліоцитів слизової оболонки товстої кишки, нами було досліджено вміст основних фосфоліпідів: фосфатидилхоліну (ФХ), фосфатидилсерину (ФС), фосфатидилетаноламіну (ФЕА), фосфатидилінозитолу (ФІ), лізофосфатидилхоліну (ЛФХ) і нейтральних ліпідів (холестерину, ацилгліцеринів та жирних кислот).Досліджено роль Са2 -залежної месенджерної системи, спряжених з нею внутрішньоклітинних сигнальних факторів, процесів пероксидації, антиоксидантного статусу клітин та білків-модуляторів апоптозу в епітеліоцитах слизової оболонки товстої кишки за умов розвитку коліт-асоційованого канцерогенезу. Встановлено, що розвиток коліт-асоційованого канцерогенезу супроводжується змінами вмісту фосфоліпідних компонентів плазматичних мембран епітеліоцитів товстої кишки. За умов коліт-асоційованого канцерогенезу зміни прооксидантно/антиоксидантного статусу епітеліоцитів слизової оболонки товстої кишки полягали у накопиченні ТБК-активних продуктів, зниженні активності супероксиддисмутази і каталази та одночасній активації глутатіонзалежної системи ензимів у порівнянні з інтактними тваринами.

Основний зміст роботи