Роль нарушений межклеточных взаимодействий в патогенезе миелотоксического действия ксенобиотиков антрациклинового ряда - Автореферат

Роль нарушений межклеточных взаимодействий в патогенезе миелотоксического действия ксенобиотиков антрациклинового рядаРабота выполнена на кафедре анатомии и физиологии сельскохозяйственных животных ФГОУ ВПО "Красноярский государственный аграрный университет", в Межкафедральной научно-исследовательской биохимической лаборатории при кафедре биохимии с курсом медицинской химии ГОУ ВПО "Красноярская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" и Международном научном центре исследований экстремальных состояний организма при Президиуме Красноярского научного центра СО РАН. Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор Константинов Юрий Михайлович доктор медицинских наук, профессор Хышиктуев Баир Сергеевич доктор медицинских наук, профессор Явербаум Павел Моисеевич Защита состоится "____" ______________ 2007 года в "____" часов на заседании диссертационного совета Д 001.054.01 при ГУ "Восточно-Сибирский научный центр Сибирского отделения Российской академии медицинских наук" по адресу: 664003, г.Хотя в настоящее время основные механизмы внутриклеточной передачи сигналов с участием цитоплазматических и ядерных рецепторов гормонов, рецепторов, сопряженных с ГТФ-связывающими белками и регулируемых ионных каналов изучены, недостаточно исследованной и наиболее сложной частью проблемы межклеточной коммуникации является разъяснение механизмов согласованного взаимодействия различных лигандов, позволяющих клеткам адекватно реагировать на постоянно изменяющиеся условия среды внутри организма и вне его [Пальцев М.А., 1995]. Особую актуальность исследование механизмов межклеточных контактов приобретает в костном мозге, где коммуникация и интеграция важны для обеспечения жизнеспособности, роста и дифференцировки гетерогенной популяции клеток, а также в силу влияния большого количества регуляторных молекул гемопоэзиндуцирующего микроокружения, обеспечивающих регуляцию гемопоэза в физиологических и патологических условиях [Дыгай А. М., 1989; Гольдберг Е.Д., 2000]. Большинство имеющихся в литературе работ в области гематологии посвящены изучению роли цитокинов, которые рассматриваются как важнейшие специализированные средства межклеточного сообщения, позволяющие клеткам обмениваться информацией [Dinarello С.А., 1991; Kishimoto T., 1994; Heldin C. Вместе с тем, понимание особенностей сигнальной трансдукции в клетках, находящихся в состоянии окислительного стресса, может стать основой для разработки принципиально новых технологий фармакологической коррекции патологических процессов, ассоциированных с увеличением прооксидантной активности. Культивирование клеток костного мозга in vitro в концентрации 1?106 клеток в 1 мл проводилось в термостате при 37°С в питательной среде (а-МЕМ ("Gibco", Великобритания), среде 199 с L-глутамином ("Вектор", Россия), растворе Хенкса ("Вектор", Россия), сбалансированном фосфатном буфере (Sigma, США) в течение 1 ч с последующей регистрацией эффектов ксенобиотика, а также модуляторов острой и подострой экзогенной интоксикации in vitro и in vivo методами диффузионных камер, спектрофотометрическими, биолюминесцентными, микроскопическими и иммуноцитохимическими методами. внутриклеточный гомеостаз ксенобиотик антрациклиновый доксорубицинВ экспериментах in vitro нами установлено, что при внесении доксорубицина в концентрациях 5?10-7 М, 10-6 М, 5?10-6 М в костномозговую суспензию in vitro происходило дозо-зависимое увеличение продукции МДА, свидетельствующее об интенсификации процессов ПОЛ мембран клеток костного мозга, что позволяет отнести данный ксенобиотик к группе индукторов окислительного стресса. Действительно, в экспериментах, выполненных нами с использованием биолюминесцентного и спектрофотометрического методов определения внутри - и внеклеточного содержания АТФ и НАД , установлено, что острое и подострое введение доксорубицина мышам in vivo и инкубация клеток костного мозга с доксорубицином в концентрации 10-6 М in vitro приводили к изменению внутри - и внеклеточного содержания АТФ и НАД в клетках костного мозга. Воздействие ксенобиотика на клетки костного мозга in vitro и in vivo сопровождалось также нарушением количественных параметров пула НАД : через 24 ч и 48 ч после острого введения доксорубицина уровень НАД внутри клеток достоверно не изменился, тогда как во внеклеточной жидкости его концентрация повысилась по сравнению с исходным значением. Протективное действие внеклеточного НАД в отношении нуклеотид-деплетирующей активности доксорубицина подтверждает возможность транспорта НАД в клетки, опосредованное активностью мембранных моно-АДФР-трансфераз или НАД -гликогидролаз, а также свидетельствует о нормализации процессов генерации восстановленных коферментов и/или митохондриальной функции в клетках.