Регулирование фибробластических процессов в склеральной ране при помощи сульфатированных гликозаминогликанов - Автореферат

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Регулирование фибробластических процессов в склеральной ране при помощи сульфатированных гликозаминогликанов 14.01.07 - глазные болезни Горбунова Ксения Сергеевна ГАГ - гликозаминогликаныВпервые установлен бимодальный эффект смеси СГАГ, заключающийся в стимулировании пролиферации культуры фибробластов при воздействии на них низких концентраций (0,1%, 0,5%) смеси СГАГ и в подавлении пролиферации при применении высоких концентраций (1 - 5%) смеси СГАГ. Впервые определен диапазон концентраций смеси СГАГ с антипролиферативными свойствами в пределах от 1% до 2%, которые не токсичны и способствуют подавлению пролиферации фибробластов in vitro и замедлению фибробластических процессов в эксперименте in vivo. В исследовании in vitro на культуре фибробластов мыши линии L929 первой серией эксперимента изучали влияние опытных образцов с различными концентрациями смеси СГАГ в растворе и выявляли концентрации с антипролиферативными свойствами. В последующем эксперименте in vivo исследовали влияние на фибробластические процессы в склеральной ране глазного яблока экспериментальных животных смеси СГАГ с антипролиферативными концентрациями в гелевой форме, так как гелевая форма наиболее технологична (из известных форм) для удержания действующего вещества в операционной ране во время хирургических манипуляции, кроме того, за счет вязкости происходит постепенное высвобождение активного вещества и его регуляторное влияние на воспалительно-репаративный процесс оказывается до полной биодеградации 2% ГПМЦ. В опытной группе 1 (12 глаз) интраоперационно в ИСП вводили смесь 1% СГАГ в геле, в опытной группе 2 (12 глаз) - смесь 2% СГАГ в гелевой форме, в опытной группе 3 (12 глаз) - смесь 5% СГАГ в гелевой форме.При гистологических исследованиях глазных яблок в контрольной группе 1 (модель НГСЭ без введения веществ) отмечали умеренное количество клеточных элементов, среди которых преобладали фибробласты, что соответствовало реакции ткани на оперативное вмешательство, края иссеченных волокон склеры, выступающие в ИСП, были разнонаправленные. Отличия касались качественного состава клеточной инфильтрации в окружающих операционную зону тканях: по сравнению с контрольной группой 1, было отмечено чуть большее количество макрофагов и эозинфилов, что может быть расценено как незначительная реакция на гель. В опытной группе 1 (модель НГСЭ с введением 1%-ой концентрации смеси СГАГ в геле) стенки ИСП были без разволокнения, наблюдали минимальную воспалительную реакцию (практически отсутствие клеточной инфильтрации стенок ИСП, нет макрофагов и эозинофилов, малое количество активных форм фибробластов). Во 2-ой контрольной группе отмечали удлинение сроков сохранения ИСП по сравнению с контрольной группой 1: частичное сохранение ИСП с продолжающимися фибробластическими процессами и неоангиогенезом. В контрольной группе 2 наблюдали полную резорбцию геля и образование рубца склеры аналогично 1-ой контрольной группе, с умеренной воспалительной инфильтрацией по ходу ИСП, иногда с сохранением объема тканей.Оригинальная смесь СГАГ, состоящая из кератансульфата и хондроитин-4,6-сульфатов, в растворе in vitro обладает различным эффектом на пролиферацию фибробластов мыши линии L929: в низких концентрациях СГАГ (0,1-0,5%) стимулирует пролиферацию клеток, в высоких концентрациях смесь СГАГ (1-5%) подавляет фибробластические процессы, что является бимодальным эффектом. Изменение формы смеси СГАГ с раствора на гель в эксперименте in vitro сохраняет бимодальность эффекта влияния на пролиферацию фибробластов: в низких концентрациях смесь СГАГ (0,1-0,5%) усиливает пролиферацию, в высоких концентрациях смесь СГАГ (1-5%) - подавляет. Разработан способ доставки гелевой формы смеси СГАГ с использованием оригинального устройства для дозирования, которое позволяет вводить необходимое количество вещества в зону хирургического вмешательства, рассчитанное в зависимости от размеров формируемой интрасклеральной полости, а также дает возможность сохранить активность и стерильность вещества.