Разработка методов выделения и идентификации бактерий Aeromonas hydrophila - Автореферат

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Разработка методов выделения и идентификации бактерий Aeromonas hydrophilaРабота выполнена в Федеральном государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования "Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия" Научные руководители: доктор биологических наук, профессор Официальные оппоненты: доктор биологических наук, старший научный сотрудник Дыкман Лев Абрамович доктор биологических наук, профессор Защита диссертации состоится "25" декабря 2009 года в 14: 00 часов на заседании диссертационного совета Д 220.061.04 при ФГОУ ВПО "Саратовский государственный аграрный университет им.Н.И.Микроорганизмы данного вида представляют серьезную проблему для многих стран Европы и Азии, в которых аэромонадная инфекция составляет от 1 до 10 % острых кишечных заболеваний у взрослых и до 50 % у детей (Agger, Cormick, Gurwith, 1985). A. hydrophila у людей с ослабленным иммунитетом может развиться септицемия и в этом случае инфекция приобретает угрожающий жизни характер, поражая мозг, кости, почки, глаза, мягкие ткани. Целенаправленного поиска аэромонад в пищевом сырье и продуктах не проводится, так как наличие этих микроорганизмов не регламентируется действующими нормативными документами. Кроме этого, практические бактериологи имеют недостаточный комплект методических разработок по выделению и идентификации бактерий рода Aeromonas. По материалам диссертационной работы предложена "Инструкция по выделению и идентификации бактерий Aeromonas hydrophila", разработанная для сотрудников медико-биологических научных учреждений, врачей бактериологических лабораторий, в помощь работникам рыбоводческих хозяйств, определяющая временный порядок и правила проведения лабораторных исследований по выделению и идентификации данных бактерий.Отсутствие ингибиторов в среде А-2 позволяет выживать и расти на ней большинству бактерий из сопутствующей микрофлоры (Pseudomonas aeruginosa, Pseudomonas putida; Citrobacter freundii; Escherichia coli; Klebsiella pneumoinae; Enterobacter cloacae; Providencia rettgeri; Yersinia pseudotuberculosis; Yersinia enterocolitica). Среда ТВА, хотя и содержит селективный агент, все же не обладает высокой специфичностью, т.к. наблюдается рост Klebsiella pneumoinae, Enterobacter cloacae, Yersinia pseudotuberculosis. Таким образом, мы пришли к выводу, что антибиотики нельзя использовать в виде селективного агента в среде для выделения Во избежание выпадения селективного агента в осадок и равномерного распространения его во всей среде решено было добавить желатин (1 %), учитывая также, что желатин является растворимым белком, а бактерии A. hydrophila на данной среде округлые, выпуклые, блестящие, до 3 мм в диаметре, светло-бежевые, без изменения цвета среды под ними.Для выделения бактерий Aeromonas hydrophila сконструированы и предложены среды обладающие специфичностью и высокой чувствительностью: транспортная, накопительная, селективная. Сконструирована оптимальная схема выделения и идентификации A. hydrophila из различных объектов окружающей среды, пищевого сырья и пищевых продуктов, позволяющая выделять и идентифицировать данные бактерии за 48 часов. Изучены культуральные, морфологические и биохимические свойства бактерий A. hydrophila, позволившие сконструировать среду для внутривидовой диагностики аэромонад и типировать 2 штамма выделенных в Ульяновской области как A. hydrophila subsp. dhakensis, еще 2 штамма - как A. hydrophila subsp.