Оценка информативности лабораторных показателей при хронической инфекции, вызванной вирусом Эпштейна-Барр - Автореферат

Определить диагностическую значимость выявления специфических антител к антигенам вируса Эпштейна-Барр у пациентов с хронической персистирующей инфекцией для установления стадии инфекционного процесса при использовании различных серологических методов. Охарактеризовать особенности Т-клеточного звена иммунной системы, цитокинового статуса у пациентов с хронической инфекцией, вызванной вирусом Эпштейна-Барр. Наибольшую диагностическую значимость при определении стадии иммунного ответа при хронической персистирующей ВЭБ-ассоциированной инфекции имеет определение количества клеток CD3 , клеток с киллерным потенциалом - CD3 CD8 , CD3-CD(16 56) , клеток, экспрессирующих HLA DR, В-лимфоцитов, продукция in vivo и in vitro IFN-? и IFN-?. Материалы диссертационной работы представлены на национальной конференции «Аллергология и клиническая иммунология - практическому здравоохранению» (25-26 февраля 2010 г., Москва); Всероссийском конгрессе «Лабораторные технологии при организации медицинской помощи» (27 мая 2010 г., Москва); юбилейной 10-й научно-практической конференции молодых ученых и специалистов, посвященная 125-летию основания СПБМАПО «Актуальные вопросы клинической и экспериментальной медицины - 2010» (22 апреля 2010 г., Санкт-Петербург); межрегиональном форуме «Актуальные вопросы аллергологии и иммунологии - междисциплинарные проблемы» (27-30 сентября 2010 г., Санкт-Петербург); 11-й научно-практической конференции молодых ученых и специалистов, СПБМАПО «Актуальные вопросы клинической и экспериментальной медицины - 2011» (24 мая 2011 г., Санкт-Петербург); First European Joint Congress of EFCC and UEMS (13-16 October 2010, Lisbon, Portugal); 21st International Congress of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine, 19th IFCC-EFCC European Congress of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine, 8th Annual Meeting of the German Society of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine (15-19 May 2011, Berlin, Germany). Исследование клеточного звена иммунитета включало определение следующих субпопуляций лимфоцитов: CD3 (Т-лимфоциты), CD3 CD(16 56) (Т-NK-клетки), CD4 (Т-хелперы), CD3 CD8 (T-киллеры), CD4 CD8 (дубль-позитивные Т-клетки), CD3-CD8 (активированные NK-клетки), CD3-CD(16 56) (NK-клетки), CD19 (В-лимфоциты), CD25 (рецепторы к ИЛ-2), лимфоциты экспрессирующие HLADR, лимфоциты, экспрессирующие маркер готовности к апоптозу (CD95).У пациентов с хронической ВЭБ-инфекцией достоверно чаще выявляются антитела класса IGG к нуклеарным EBNA-1 и капсидным белкам VCA (92% и 88%, соответственно); а антитела IGG к ранним антигенам EA - в 10% случаев. Использование метода иммуноблоттинга позволило в два раза чаще выявлять антитела к ранним антигенам, по сравнению с традиционным методом ИФА, при этом частота обнаружения ядерных и капсидных белков разными методами анализа была сопоставимой. Методом иммуноблоттинга среди пациентов с профилем антител класса G к VCA в 80% случаев была установлена активация хронической ВЭБ-инфекции, которая характеризовалась наличием антител IGG к gp125 и соотношением gp125/p22>1. Особенностью хронической персистирующей инфекции, характеризующейся специфическим гуморальным иммунным ответом, представленным антителами IGG к VCA NA, является уменьшение абсолютного и относительного содержания NK-клеток и выраженное снижение продукции IFN-?, имеющие значение для определения тактики иммунотерапии.

1. У пациентов с хронической ВЭБ-инфекцией достоверно чаще выявляются антитела класса IGG к нуклеарным EBNA-1 и капсидным белкам VCA (92% и 88%, соответственно); а антитела IGG к ранним антигенам EA - в 10% случаев. Специфический гуморальный иммунный ответ на хроническую ВЭБ-инфекцию в 71% случаев представлен VCA EBNA-1; 12% - EBNA-1; 10% - VCA EBNA-1 EA; 7% - VCA.

2. Использование метода иммуноблоттинга позволило в два раза чаще выявлять антитела к ранним антигенам, по сравнению с традиционным методом ИФА, при этом частота обнаружения ядерных и капсидных белков разными методами анализа была сопоставимой.

3. Методом иммуноблоттинга среди пациентов с профилем антител класса G к VCA в 80% случаев была установлена активация хронической ВЭБ-инфекции, которая характеризовалась наличием антител IGG к gp125 и соотношением gp125/p22>1.

4. Особенностью хронической персистирующей инфекции, характеризующейся специфическим гуморальным иммунным ответом, представленным антителами IGG к VCA NA, является уменьшение абсолютного и относительного содержания NK-клеток и выраженное снижение продукции IFN-?, имеющие значение для определения тактики иммунотерапии.

5. При обострении хронической ВЭБ-инфекции, когда соотношение вирусных белков VCA gp125/p22>1, наблюдается активация Т-клеточного звена, проявляющаяся в увеличении абсолютного количества зрелых Т-лимфоцитов и спонтанной продукции IFN-g.

6. Реактивация хронической ВЭБ-ассоциированной инфекции, которая характеризуется наличием антител класса G к VCA NA EA, отличается достоверным снижением в периферической крови клеток с киллерной активностью - CD3 CD8 и CD3-CD(16 56) .

7. Частота распространения IGG к ВПГ 1/2 и ЦМВ среди пациентов с хронической инфекцией, обусловленной вирусом Эпштейна-Барр составляет 98% и увеличивается с возрастом. При хронической микстинфекции, вызванной ВЭБ и ЦМВ отмечается значительное снижение индуцированной продукции IFN-g.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Для получения полноценной информации при клинико-лабораторной диагностике и дифференцировке стадий ХИВЭБ рекомендуется применять следующие подходы: - на этапе определения наличия инфицирования ВЭБ использовать чувствительные методики (определение IGG к VCA и IGG к EBNA-1 методом ИФА);

- на этапе дифференцировки стадий ХИВЭБ использовать наиболее специфичные методики (IGG к отдельным антигенам ВЭБ методом ИБ).

2. Использование показателей IFN в комбинации (содержание в сыворотке, спонтанная продукция, индуцированная продукция) позволяет оценить напряженность системы интерферонов при ХИВЭБ.

3. На основании выявленных особенностей показателей специфического гуморального и клеточного иммунного ответа при ХИВЭБ, с учетом взаимосвязи различных звеньев иммунитета, а также возможностью использования метода ИБ были выделены наиболее информативные лабораторные показатели, которые вошли в алгоритм диагностики и дифференцировки стадий ХИВЭБ.

Статьи в научных изданиях по перечню ВАК Минобрнауки РФ

1. Горейко Т.В. Использование метода иммуноблотинга в диагностике хронической инфекции вируса Эпштейна-Барр / Т.В. Горейко, Л.Б. Дрыгина // Мед.-биол. и соц.-психол. пробл. безопасности в чрезв. ситуациях. - 2010. ? №3. - С. 58-61.

2. Горейко Т.В. Комплексное изучение показателей специфического иммунного ответа и интерферонового статуса у пациентов с длительным субфебрилитетом, обусловленным вирус Эпштейна-Барр инфекцией / Т.В. Горейко, Л.Б. Дрыгина // Российский аллергологический журнал. ? 2010. ? №1, вып.1. - С 51-52.

3. Горейко Т.В. Роль цитокинов в патогенезе хронической инфекции, вызванной вирусом Эпштейна-Барр / Т.В. Горейко, Н.М. Калинина, Л.Б. Дрыгина // Цитокины и воспаление ?2011. ? №4 - С. 50-54.

Статьи, тезисы докладов и статей

4. Горейко Т.В. Оценка информативности метода иммуноблотинга в диагностике вируса Эпштейна-Барр инфекции // Т.В. Горейко, Л.Б. Дрыгина // Актуальные вопросы клинической и экспериментальной медицины: сборник тезисов юбилейной научно-практической конференции молодых ученых 22.04.2010 г. - Санкт-Петербург: СПБМАПО, 2010. - С. 203-204.

5. Горейко Т.В. Возможности диагностики инфекции, вызванной вирусом Эпштейна-Барр / Т.В. Горейко, Л.Б. Дрыгина // Лаборатория. ? № 2. - 2010. - С. 29.

6. Горейко Т.В. Современные представления об иммунопатогенезе инфекции, вызванной вирусом Эпштейна-Барр // Т.В. Горейко, Н.М. Калинина, Л.Б. Дрыгина // Инфекция и иммунитет. - Т.1, №2. - 2011. - С. 121-130.

7. Горейко Т.В. Влияние структуры герпес-вирусного микстинфицирования на показатели иммунного ответа / Т.В. Горейко, Л.Б. Дрыгина // Актуальные вопросы клинической и экспериментальной медицины: сборник тезисов научно-практической конференции молодых ученых 24.05.2011 г. ? Санкт-Петербург: СПБМАПО, 2011. - С. 27-29.

8. Goreyko T.V. Interrelation between the cellular and specific humoral immune response in patients with a chronic Epstein?Barr virus infection / Т.V. Goreyko, L.B. Drygina // Abstract of First European Joint Congress of EFCC and UEMS «Laboratory Medicine in Health Care», 13-16 October 2010, Lisbon, Portugal . -P. 50.

9. Goreyko T.V. Chronic Epstein-Barr Virus infection in association with Herpes Simplex Virus types 1 and 2, Human Cytomagalovirus / Т.V. Goreyko, L.B. Drygina // Abstract of 21st International Congress of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine, 19th IFCC-EFCC European Congress of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine, 8th Annual Meeting of the German Society of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine 15-19 May 2011, Berlin, Germany. - P. 522.

Размещено на .ru