Коррекция пролиферации кератиноцитов с использованием липосом и её клинико-лабораторная оценка как направление в наружной терапии псориаза - Автореферат

Работа выполнена в ФГОУ ВПО «Военно-медицинская академия имени С.М. Научные консультанты: доктор медицинских наук профессор Барбинов Вячеслав Витальевич; доктор медицинских наук профессор Карпищенко Анатолий Иванович. Официальные оппоненты: доктор медицинских наук профессор Горланов Игорь Александрович; Защита диссертации состоится “___” декабря 2009 года в ___ часов на заседании диссертационного совета Д 215.002.01 в ФГОУ ВПО «Военно-медицинская академия имени С.М.Наиболее выраженным антипролиферативным действием на культуры кератиноцитов больных псориазом обладают пентоксифиллин, пирроксан, селенит натрия, глутатион окисленный и сальбутамол (подавление включения 3Н-тимидина в 4,2; 4,2; 3,2; 2,5 и 2.2 раза соответственно; р <0,001), предварительно переведенные в липосомальную форму. Комбинации из липосомальных: пентоксифиллина, селенита натрия и пирроксана, а также из пентоксифиллина, селенита натрия и этмозина наиболее целесообразны для использования в качестве лекарственных средств наружной терапии псориаза, так как наиболее эффективно подавляют пролиферацию в культурах кератиноцитов больных псориазом (подавляя включение 3Н-тимидина в 36,2 и в 23 раза соответственно; р <0,001). Комбинированный препарат в состав которого входят липосомальные пентоксифиллин, пирроксан и селенит натрия, по скорости разрешения псориатических высыпаний не уступает современным наружным средствам, что доказано на высокой чувствительности к нему (93,9 % стационарных и 90% амбулаторных) больных, и на быстрой скорости разрешения псориатических элементов кожной сыпи (4-5 недель у больных с ограниченной и до 8 недель при распространенной формах болезни). Процессы свободнорадикального окисления и антиоксидантной защиты участвуют в регуляции пролиферативно-дифференцировочной активности клеток кожи при псориазе таким образом, что увеличение интенсивности свободнорадикального окисления ведет к остановке пролиферации, а высокий уровень антиоксислительной защиты ее поддерживает: - состотояние гиперпролиферации кератиноцитов сопровождается резким угнетением процессов свободнорадикального окисления и высокой антиокислительной активностью клеток, о чем свидетельствует низкая концентрация диеновых коньюгатов и малонового диальдегида, повышенное содержание восстановленного глутатиона и сульфгидрильных групп, а также возрастание активности ферментов, участвующих в регуляции антиокислительной защиты (уменьшение содержания малонового диальдегида и диеновых коньюгатов в клетках более чем в 2 раза и увеличение концентраций восстановленного глутатиона и сульфгидрильных групп в 3,3 раза); подавление пролиферации кератиноцитов липосомальными препаратами и их комбинациями сопровождается преимущественной нормализацией параметров антиокислительной защиты и увеличением интенсивности свободнорадикального окисления (снижение концентрации восстановленного глутатиона и сульфгидрильных групп в 3 и 2,2 раза соответственно и увеличение содержания малонового диальдегида и диеновых коньюгатов в 1,8 и 2,2 раза соответственно.

1. Наиболее выраженным антипролиферативным действием на культуры кератиноцитов больных псориазом обладают пентоксифиллин, пирроксан, селенит натрия, глутатион окисленный и сальбутамол (подавление включения 3Н-тимидина в 4,2; 4,2; 3,2; 2,5 и 2.2 раза соответственно; р < 0,001), предварительно переведенные в липосомальную форму.

2. Комбинации из липосомальных: пентоксифиллина, селенита натрия и пирроксана, а также из пентоксифиллина, селенита натрия и этмозина наиболее целесообразны для использования в качестве лекарственных средств наружной терапии псориаза, так как наиболее эффективно подавляют пролиферацию в культурах кератиноцитов больных псориазом (подавляя включение 3Н-тимидина в 36,2 и в 23 раза соответственно; р < 0,001).

3. Комбинированный препарат в состав которого входят липосомальные пентоксифиллин, пирроксан и селенит натрия является высокоэффективным средством для наружной терапии псориаза и может быть использован как в остром, так и в стационарном периоде заболевания, так как не обладает раздражающим эффектом (клиническая ремиссия - 87% у стационарных и 82% у амбулаторных больных, переносимость очень хорошая - 100%).

4. Комбинированный препарат в состав которого входят липосомальные пентоксифиллин, пирроксан и селенит натрия, по скорости разрешения псориатических высыпаний не уступает современным наружным средствам, что доказано на высокой чувствительности к нему (93,9 % стационарных и 90% амбулаторных) больных, и на быстрой скорости разрешения псориатических элементов кожной сыпи (4-5 недель у больных с ограниченной и до 8 недель при распространенной формах болезни).

5. Процессы свободнорадикального окисления и антиоксидантной защиты участвуют в регуляции пролиферативно-дифференцировочной активности клеток кожи при псориазе таким образом, что увеличение интенсивности свободнорадикального окисления ведет к остановке пролиферации, а высокий уровень антиоксислительной защиты ее поддерживает: - состотояние гиперпролиферации кератиноцитов сопровождается резким угнетением процессов свободнорадикального окисления и высокой антиокислительной активностью клеток, о чем свидетельствует низкая концентрация диеновых коньюгатов и малонового диальдегида, повышенное содержание восстановленного глутатиона и сульфгидрильных групп, а также возрастание активности ферментов, участвующих в регуляции антиокислительной защиты (уменьшение содержания малонового диальдегида и диеновых коньюгатов в клетках более чем в 2 раза и увеличение концентраций восстановленного глутатиона и сульфгидрильных групп в 3,3 раза);

- подавление пролиферации кератиноцитов липосомальными препаратами и их комбинациями сопровождается преимущественной нормализацией параметров антиокислительной защиты и увеличением интенсивности свободнорадикального окисления (снижение концентрации восстановленного глутатиона и сульфгидрильных групп в 3 и 2,2 раза соответственно и увеличение содержания малонового диальдегида и диеновых коньюгатов в 1,8 и 2,2 раза соответственно. Приведены результаты применения пентоксифиллина, как наиболее активного антипролиферативного препарата).

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Лабораторный метод определения чувствительности кератиноцитов больных псориазом к различным препаратам следует применять как для определения индивидуальной терапевтической эффективности средств наружной терапии, так и для изучения пролиферативно-дифференцировочных, морфологических и метаболических процессов кожи с последующим созданием новых лекарственных препаратов с целью оптимизации наружной терапии.

2. Определение показателей процессов свободнорадикального окисления и антиокислительной защиты, как высокоинформативных и диагностически значимых наиболее целесообразно проводить на изолированных клеточных культурах кератиноцитов с целью установления их окислительно-восстановительного потенциала и пролиферативной активности.

3. В наружной терапии вульгарного псориаза целесообразно использовать антипролиферативный липосомальный крем вне зависимости от периода заболевания. Препарат может применяться в виде монотерапии, так и в комплексном лечении в качестве основного средства наружной терапии.

4. Применение липосомального антипролиферативного крема целесообразно назначать до 2-х раз в сутки в максимальной суточной дозе до 300 г в зависимости от площади поражения кожи. Крем наносить на пораженные участки кожи, слегка втирая. Применять крем необходимо до полного разрешения элементов сыпи. Первый эффект препарата проявляется на 5-7 день после начала терапии в виде уплощения бляшек.

1. Гуманенко Е.К. Эндотрахеальное применение препаратов супероксиддисмутазы при тяжелой сочетанной травме - патогенетически обоснованная мера профилактики посттравматических бронхолегочных осложнений / Е.К. Гуманенко, Н.С. Немченко, А.М. Фахрутдинов, Р.А. Грашин // Вестн хир. им. Грекова. - 2004.- Т.163, №1. - С. 65-68.

2. Терлецкий О.В. Случай эффективного применения кремов «Липсор» и «Липэк» у больного, страдающего тяжелой формой псориаза / О.В. Терлецкий., Р.А. Грашин // Вестник СПБГМА им. И.И. Мечникова. - 2006. - № 1. - С. 175-178.

3. Барбинов В.В. Влияние липосомальных и обычных мыл на функциональную активность апокриновых потовых желез человека / В.В. Барбинов, Р.А. Грашин [и др.] // Вестник Военно-медицинской академии. - 2007.- № 1(17).- С. 40-45.

4. Барбинов В.В. Новые подходы к наружной терапии псориаза / В.В. Барбинов, Р.А. Грашин // Росс. ж-л. кож. и вен. болезней. - 2008. - №3 - С. 23-28.

5. Грашин Р.А. Регуляция пролиферации кератиноцитов больных псориазом в культурах клеток с использованием липосом / Р.А. Грашин., В.В. Барбинов, А.О. Данилов, А.В. Самцов // Вестник дерматологии и венерологии. - 2008. - № 6. - С. 13-20.

6. Грашин Р.А. Активность про- и антиоксидантных процессов в культурах кератиноцитов больных псориазом / Грашин Р.А. [и др.] // Вестник Российской Военно-медицинской академии. - 2008. - №4(24). - С. 125-130.

7. Шилов Ю.В. Токсические эффекты циклофосфана и подходы к их фармакологической коррекции / Ю.В. Шилов, В.А. Кашуро, Л.В. Минаева, Р.А. Грашин. // Вестник Российской Военно-медицинской академии. - 2008. №3 (23). - С. 68-72.

8. Хайрутдинов В.Р. Роль полиморфных генов программируемой клеточной гибели в формировании риска развития псориаза / В.Р. Хайрутдинов, А.С. Жуков, И.А. Пономарев, Р.А. Грашин, А.В. Самцов, Е.Н. Имянитов // Вестник дерматологии и венерологии. - 2009. - № 4. - С. 4-9.

9. Ольшамовская А.О. Новые возможности комбинированной наружной терапии при атопическом дерматите / А.О. Ольшамовская, Р.А. Грашин, В.В. Барбинов // Росс. ж-л. кож. и вен. болезней. - 2009. - № 6. - С. 8-11.

10. Грашин Р.А. Системы свободнорадикального окисления и антиоксидантной защиты как индикаторы активности пролиферации кератиноцитов при псориазе / Р.А. Грашин, В.Г. Антонов, А.И. Карпищенко, В.Р. Хайрутдинов / Клиническая лабораторная диагностика. - 2009. - № 12. - С. 11-15.

11. Атаманчук В.Н. Использование липосомального крема «Липро» в лечении вульгарных и розовых угрей / В.Н Атаманчук. [и др.] // Вторая науч.-практ. конф. «Санкт-Петербургские дерматологические чтения»: Тезисы конференции / Под ред. проф. Самцова А.В., проф., Соколовского Е.В., проф. Разнатовского К.И.; Военно-мед. акад. им. С.М. Кирова. - СПБ.: «Человек и здоровье», 2008. - С.10 .

12. Барбинов В.В. Результаты изучения клинической эффективности рецептуры «Липсор» у больных псориазом / В.В Барбинов [и др.] // Тез. докл. VI Всероссийской науч.-практ. конф. «Актуальные вопросы лечения в многопрофильных учреждениях". - СПБ., 2003. - С.180.

13. Барбинов В.В. Оценка антипролиферативного действия препаратов, включенных в липосомы, на культуру кератиноцитов больных псориазом / В.В. Барбинов [и др.] // Тез. докл. VI Всероссийской науч.-практ. конф. «Актуальные вопросы лечения в многопрофильных учреждениях". - СПБ., 2003. - С.181.

14. Барбинов В.В. Новые патогенетически обоснованные подходы в наружной терапии псориаза / В.В. Барбинов., Р.А. Грашин // Тез. докл. 1-ого Росс. конгр. дерматовенерологов.- СПБ. - 2003.- С. 23-26.

15. Барбинов В.В. Оценка влияния отдельных липосомальных препаратов на пролиферацию культур кератиноцитов больных псориазом по состоянию систем свободнорадикального окисления и антиоксидантной защиты / В.В. Барбинов, Р.А. Грашин // Тез. научн. работ Всеросс. научн.-практ. конф. «Актуальные проблемы лабораторной диагностики".- СПБ. -2008. - С. 15-17.

16. Барбинов В.В. Оценка эффективности применения крема «Липэк» в комплексной терапии больных атопическим дерматитом / В.В. Барбинов., Р.А. Грашин., В.Н. Атаманчук., А.О. Ольшамовская // Вторая научно-практическая конференция «Санкт-Петербургские дерматологические чтения»: Тезисы конференции / Под ред. проф. Самцова А.В., проф., Соколовского Е.В., проф. Разнатовского К.И.; Военно-мед. акад. им. С.М. Кирова. - СПБ.: «Человек и здоровье», 2008.- С.12.

17. Барбинов В.В. Сравнительная клиническая эффективность современных лекарственных средств, применяемых в наружной терапии псориаза / В.В Барбинов, Р.А. Грашин, Р.А. Раводин, Д.В. Барбинов // Вторая научно-практическая конференция «Санкт-Петербургские дерматологические чтения»: Тезисы конференции / Под ред. проф. Самцова А.В., проф., Соколовского Е.В., проф. Разнатовского К.И.; Воен.-мед. акад. им. С.М. Кирова. - СПБ.: «Человек и здоровье», 2008. - С.12-13.

18. Внутрилабораторный контроль качества лабораторных исследований: Медицинские лабораторные технологии и диагностика // Под ред. проф. А.И. Карпищенко. - СПБ: Интермедика, 2002.- С.119-154.

19. Грашин Р.А. Сравнительная оценка влияния липосомальных и обычных мыл на функциональную активность апокриновых потовых желез и химический состав пота человека / Р.А. Грашин, А.В. Бабкин /. Журнал дерматовенерологии и косметологии. - 2004. - №1.- С. 39-43.

20. Грашин Р.А. Системы свободнорадикального окисления и антиоксидантной защиты как показатели пролиферативно-дифференцировочной активности кератиноцитов больных псориазом / Р.А. Грашин., В.В. Барбинов // Тез. науч. работ II-ого Всеросс. Конгр. дерматовенерологов.- СПБ., 2007.- С.47.

21. Грашин Р.А. Состояние процессов свободнорадикального окисления в культурах кератиноцитов больных псориазом / Р.А. Грашин., В.В. Барбинов Тез. науч. работ II-ого Всеросс. Конгр. дерматовенерологов.- СПБ., 2007.- С. 47.

22. Грашин Р.А. Использование культур кератиноцитов больных псориазом для оценки про- и антиоксидантного статуса клеток. / Р.А. Грашин, В.В. Барбинов., А.О. Данилов // Тез. научн. работ Всеросс. научн.-практ. конф. «Актуальные проблемы лабораторной диагностики". - СПБ.- 2008. - С.17.

23. Грашин Р.А. Оценка влияния смесей липосомальных препаратов на состояние систем свободнорадикального окисления и антиоксидантной защиты в культурах кератиноцитов больных псориазом. / Р.А. Грашин, В.В. Барбинов. // Тез. научн. работ Всеросс. научн.-практ. конф. «Актуальные проблемы лабораторной диагностики". - СПБ.-2008.- С. 17.

24. Методы клинической биохимии: Медицинские лабораторные технологии и диагностика // Под ред. проф. А.И. Карпищенко. - СПБ: Интермедика, 2002. - С.243-282.

25. Николаева А.Ш. Эффективность супероксиддисмутазы в терапии экспериментальной поздней кожной порфирии, вызванной у животных / А.Ш. Николаева, А.В. Самцов, В.В. Барбинов, Грашин Р.А. // Журнал дерматовенерологии и косметологии. - 2002.- №1.- С. 20-23.

26. Ольшамовская А.О. Преимущество использования липосомального крема «ЛИПЭК» в комплексной терапии атопического дерматита / Барбинов В.В., Р.А. Грашин // Вестник Российской Военно-медицинской академии. - 2009. - №1(25).- С. 667. (приложение)

27. Самцов А.В. Результаты изучения возможности использования мыла, содержащего липосомальный диоксидин, в профилактике инфекционных заболеваний кожи / А.В. Самцов, А.В. Бабкин, Д.В. Чернышев, Р.А. Грашин Тез. научн. работ VIII съезда Итало-Российского об-ва по инфекционным болезням: «Проблема инфекции в клинической медицине». - СПБ., 2002.- С. 63.

28. Самцов А.В. Оценка эффективности применения препарата «Липсор» в наружной терапии псориаза / А.В. Самцов [и др.] // М-лы, юб. науч.-практ. конф. «Актуальные вопросы дерматологии, косметологии и ИППП»: посв. 10-летию кафедры кожных и венерических болезней с курсом дерматокосметологии ФУВ. - М.: РГМУ, 2003. - С. 68-69.

29. Сбойчаков В.Б. Воздействие антибактериального мыла с липосомальным диоксидином на аутомикрофлору кожи / В.Б. Сбойчаков [и др.] // Тез. докл. юбилейной науч. конф. посвященной 80-летию кафедры микробиологии ВМЕДА и 300-летию основания Санкт-Петербурга «Современная микробиология клинической медицине». - СП-б., 2003. - С.149-150.

30. Barbinov V.V. Nonsteroid bioregulating liposomic preparations in the topical therapy of psoriasis/ V.V. Barbinov, R.A. Grashin // JEADV.- 2004.-Vol. 18, № 6.- Р. 794

Авторские свидетельства (патенты): 1. Средство для наружной терапии псориаза и способ его изготовления / Барбинов В.В., Грашин Р.А. Самцов А.В., Атаманчук В.Н. [и др.]// Патент на изобретение №2196583. Приоритет от 29.05.2001.

2. Способ определения чувствительности кератиноцитов больного псориазом к лекарственным препаратам / Грашин Р.А., Барбинов В.В., Данилов А.О., Иванов А.М.// Патент на изобретение № 2361219. Приоритет от 16.04.2008 г.

Размещено на .ur