Комплексные исследования с целью создания лекарственных форм для лечения раневых и воспалительных процессов на основе местноанестезирующего средства - Автореферат
Анализ лекарственных средств, обладающих местноанестезирующим, противовоспалительным и антимикробным действием. Выбор действующих компонентов и вспомогательных веществ с целью создания эффективных лекарственных препаратов. Разработка норм качества.
При низкой оригинальности работы "Комплексные исследования с целью создания лекарственных форм для лечения раневых и воспалительных процессов на основе местноанестезирующего средства", Вы можете повысить уникальность этой работы до 80-100%
Основная задача фармацевтической промышленности Российской Федерации - обеспечение населения страны не только недорогими и качественными препаратами для лечения особо значимых заболеваний, но и инновационными лекарственными средствами, разработанными и произведенными в России в соответствии с самыми высокими международными стандартами (Г. В настоящее время появилась возможность более успешно лечить раневые и воспалительные процессы, используя в составах лекарственных форм высокоэффективный отечественный местный анестетик анилокаин, синтез которого осуществлен в Пермской государственной фармацевтической академии. Ю обосновать методологический подход по разработке лекарственных форм для лечения раневых и воспалительных процессов на основе местноанестезирующего средства; На основе физико-химических, структурно-механических, технологических и биофармацевтических исследований разработаны составы и технология суппозиториев анилокаина, предназначенные для промышленного производства и экстемпорального изготовления. Результаты, полученные в ходе экспериментальных исследований, свидетельствуют о возможности и перспективности использования предложенных лекарственных форм для лечения раневых и воспалительных процессов на основе местноанестезирующего средства
Список литературы
Основное содержание диссертации представлено в 65 публикациях, из них 1 монография, 1 удостоверение на рационализаторское предложение, 11 статьях в изданиях списка ВАК. Всего по теме диссертации опубликовано 140 научных работ.
Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтических наук
Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ Пермской государственной фармацевтической академии (№ государственной регистрации 01.9.50 007426).
На защиту выносятся результаты теоретических и экспериментальных (технологических, биофармацевтических, физико-химических, химических, микробиологических, фармакологических) исследований по обоснованию и разработке составов, технологии, способов стандартизации стабильных и эффективных лекарственных форм для лечения раневых и воспалительных процессов отечественного местного анестетика анилокаина.
Структура и объем диссертации
Диссертационная работа содержит введение, обзор литературы, 8 глав экспериментальных исследований, общие выводы, список литературы и приложение, в котором представлены документы, подтверждающие практическую значимость полученных результатов.
Диссертация изложена на 314 страницах машинописного текста, иллюстрирована 75 таблицами, 67 рисунками. Библиографический список включает 257 источников отечественных и зарубежных авторов.
основное Содержание работы
Объекты и методы исследования
В процессе исследований и разработки оптимальных составов лекарственных форм использовали лекарственные и вспомогательные вещества, разрешенные к медицинскому применению и отвечающие требованиям действующей нормативной документации.
Для достижения поставленной цели и решения задач использовали физические, физико-химические, технологические, микробиологические и фармакологические методы.
Для количественного определения действующих веществ, входящих в состав разработанных лекарственных форм, модифицированы известные методики. В количественном анализе анилокаина использовали экстракционно-титриметрический метод, диоксидина и хлоргексидина биглюконата - спектрофотометрический метод.
Для определения возможных продуктов разложения или взаимодействия лекарственных веществ в мазях использовали метод тонкослойной хроматографии. Для определения продуктов разложения лекарственных веществ в геле после стерилизации, а также с целью их дальнейшего использования в качественном и количественном анализе разработаны условия разделения действующих компонентов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.
Структурно-механические показатели измеряли на ротационном вискозиметре «Реотест-2» (тип RV, Германия). Работу осуществляли на экспериментально подобранном устройстве Н.
Осмотическую активность мази определяли гравиметрическим методом
Определение потери в массе при высушивании и средней массы пленок лекарственных проводили по методикам ГФ ХІ изд.
Определение механической прочности пленок лекарственных проводили по разработанной на кафедре физиологии ПГФА методике (С.М. Горбунов, 1979) тензиометрическим методом.
Определение средней массы, времени полной деформации, температуры плавления и времени растворения суппозиториев проводили по методикам ГФ ХІ изд.
Определение кислотного и йодного числа гидрофобных суппозиторных основ проводили по методикам ГФ XI изд.
Определение перекисного числа проводили согласно ГОСТ 8285-91 «Жиры животные топленые» йодометрическим методом.
Испытание аэрозольной упаковки проводили по методикам ГФ XI изд.
Определение РН водного раствора лекарственных форм проводили потенциометрическим методом на иономере универсальном ЭВ-74 по методике ГФ ХІ изд.
Биофармацевтические исследования проводили методом равновесного диализа через полупроницаемую мембрану и кондуктометрическим методом.
Специфическую фармакологическую активность лекарственных форм исследовали на моделях полнослойных кожных ран и термических ожогов у крыс. Местноанестезирующее действие изучали методом Ренье на роговице глаза кролика. Для изучения противовоспалительной активности мази использовали каррагениновую модель экссудативного асептического воспаления. Острую токсичность изучали при внутрижелудочном пути введения. Антимикробную активность определяли методом диффузии в агар (мази, пленки лекарственные) или методом серийных разведений (пленки лекарственные, аэрозоль) по методикам ГФ ХІ изд. Испытание на микробиологическую чистоту проводили двухслойным методом в соответствии со статьей ГФ ХІ изд., раздел «Методы микробиологического контроля лекарственных средств» и Изменением к ней № 3 от 25.06.2003 года.
При постановке и проведении экспериментов применяли методы математико-статистического планирования эксперимента.
Статистическую обработку результатов проводили по общепринятым методикам ГФ ХІ изд. с использованием стандартных компьютерных программ EXCEL.
Методологический подход к разработке лекарственных форм для лечения раневых и воспалительных процессов на основе местноанестезирующего средства
Конструирование лекарственных препаратов включает ряд последовательных разделов, а именно: формулировку проблемы в медико-социальном аспекте, определение направления, целей и задач исследований на основе изучения фармацевтического рынка, патентного поиска и анализа специальной литературы, разработку составов лекарственных препаратов в соответствие с современными требованиями, оптимизацию технологических процессов и параметров качества готового продукта, составление, согласование и утверждение нормативной документации. Для реализации поставленных целей в области разработки рациональных лекарственных препаратов необходимо теоретическое научно-методологическое обоснование и создание алгоритма действий.
Методологический подход базируется на выполнении комплекса теоретических, технологических, биофармацевтических, химических, физико-химических и фармакологических исследований, обеспечивающих получение современных, качественных, эффективных и безопасных лекарственных средств. Обобщенная схема этапов разработки лекарственных средств, приведенная на рис. 1, включает три блока, каждый из которых завершается получением промежуточного продукта, обеспечивающего постановку задач для каждого последующего этапа.
Задачей первого блока является выявление современных подходов к лечению и профилактики раневых и воспалительных процессов различной этиологии, анализ рынка лекарственных препаратов, применяющихся для этих целей. Блок включает проведение поиска литературных данных, маркетинговых и патентных исследований. Полученные данные позволяют оценить состояние и перспективы создания лекарственных форм для лечения раневых и воспалительных процессов, выбрать уникальные свойства и стратегию по их разработке.
Второй блок включает основные этапы исследований: - выбор оптимальных носителей для лекарственных форм;
- обоснование действующих компонентов и их концентраций в составе лекарственных форм;
- проведение биофармацевтических и структурно-механических исследований, являющихся объективными показателями эффективности и качества при производстве, хранении и применении лекарственных форм;
- разработка технологии производства препаратов;
- стандартизация и исследование стабильности разработанных лекарственных форм;
- проведение фармакологических и клинико-экспериментальных исследований.
Результатом данного блока является создание эффективных и стабильных лекарственных форм.
Третий блок посвящен разработке нормативной документации и представление ее на утверждение в соответствующие инстанции.
IMG_e0be4fce-73ce-4ad7-a63f-e4c6d1e83bc0
IMG_b577c515-8259-4cf3-9a3f-20a27bc8a45b
IMG_78a4bf0c-1d5b-436f-93df-fa7e638b4d96
Рис. 1. Обобщенная схема этапов разработки лекарственных средств создание комбинированной МАЗИ АНИЛКАМ
Раннее оперативное закрытие раны невозможно без этапа медикаментозного лечения раны с учетом фазы раневого процесса. В подобных ситуациях важен подбор препарата, высокоактивного в отношении основного возбудителя (как аэробного, так и анаэробного компонента гнойного процесса), обладающего обезболивающим действием, длительной осмотической активностью или, наоборот, свойствами, направленными на предупреждение высыхания раневой поверхности, на стимуляцию роста грануляций, способствующими формированию эпителия.
При разработке состава и технологии мази исходили из современных требований комплексного (обезболивающего, противовоспалительного, ранозаживляющего, антимикробного) воздействия на рану при малокомпонентном составе.
С целью выбора рациональной концентрации анилокаина проведены исследования поверхностноанестезирующей активности его водных растворов по методу Ренье-Валетта, которые показали, что оптимальной является 5% концентрация анестетика.
Оптимальный носитель для мазей должен обеспечивать нетравматичность нанесения на поврежденные участки, равномерность распределения, проявлять длительную и сильную осмотическую активность в I фазе раневого процесса, создавать благоприятные условия для регенерации раны во II фазе, и, главное, высокую биологическую доступность ЛВ. При выборе основообразующего компонента учитывали известные преимущества гидрофильных основ перед гидрофобными.
С этой целью изучено 15 композиций гидрофильного характера (табл. 1), составы которых известны из литературы.
Критерием оценки изучаемых составов явились следующие показатели: структурно-механические, биофармацевтическая доступность, осмотическая активность.
Структурно-механические свойства мягких ЛФ являются эффективным и объективным показателем их качества при производстве и хранении. Основными реологическими параметрами являются: намазываемость, текучесть, удобство применения и способность выдавливаться из туб.
Предварительно проведена визуальная оценка консистенции мазевых композиций, в результате которой были отбракованы образцы, представляющие собой жидкие основы со слабо выраженными адгезивными свойствами (3% Blanose 7MF, 3% Na КМЦ, 3% МЦ и 4% Na альгинат) и плотные носители (6% Blanose 7MF, 6% Na КМЦ, 6% МЦ).
Структурно-механические характеристики основ оказывают заметное влияние на процессы высвобождения ЛВ из мазей, а также на их потребительские свойства: намазываемость, адгезию, способность выдавливаться из туб. Исследование реологических свойств модельных систем проводились на ротационном вискозиметре «Реотест-2» (Германия). Используя показания прибора рассчитывали касательное напряжение сдвига и строили графики зависимости от скорости сдвига. В реологический оптимум не вошел состав № 10 (4% МЦ). Все остальные исследуемые составы обладают удовлетворительными консистентными свойствами.
Для изучения тиксотропных свойств для выбранных составов строили кривые кинетики деформации в координатах: скорость сдвига - напряжение сдвига в области изменения градиентов скорости течения от малых к большим и от больших к малым (рис. 2). Наличие восходящих и нисходящих кривых указывает на то, что исследуемые композиции обладают тиксотропными свойствами, характеризующие хорошую намазываемость и способность выдавливаться из туб.
IMG_509589f4-dec5-4831-bc9b-56710db2e4bc
Рис. 2. Реограммы течения гидрофильных мазевых композиций
Результаты проведенных реологических исследований позволяют сделать вывод о том, что указанные мази являются дисперсными системами с коагуляционным типом структуры, для которых характерны упруго-вязко-пластичные свойства.
Биофармацевтическую оценку композиций определяли по тесту высвобождения анилокаина через полупроницаемую мембрану. Динамика высвобождения представлена на рис. 3.
IMG_b5bc8210-a984-4c51-a8b5-f751dc903303
Примечание: * - различие достоверно при р<0,05 ** - различие достоверно при р<0,01
Рис. 3. Зависимость высвобождения анилокаина от времени из мазевых композиций
С целью изучения кинетики высвобождения анилокаина из мазей на гидрофильных основах использовали кондуктометрический метод анализа. По экспериментальным данным построены кинетические кривые высвобождения анилокаина из композиций на различных основах, что показано на рис. 4 и 5.
Установлено, при равных условиях проведения эксперимента с увеличением времени значение удельной электропроводимости возрастает для всех четырех основ, т. е. количество высвобождаемых ионов в воде увеличивается.
IMG_044491de-ad16-4eac-9c1e-0d499c93885d
Рис. 4. Кинетические кривые высвобождения анилокаина из композиций на основах натрия альгината и МЦ Рис. 5. Кинетические кривые высвобождения анилокаина из композиций на основах натрий карбоксиметилцеллюлозы и Бланозе 7MF
На основании данных зависимости удельной электропроводимости от времени построены графики скорости растворения мазей (рис. 6). Как следует из рисунка, их значения проходят через максимумы. Резкое увеличение скорости наблюдается в начальный момент времени, снижение со временем может быть объяснено уменьшением количества ЛВ в поверхностных слоях матриц-носителей. С большей скоростью в начальный момент времени высвобождение анилокаина происходит из мази на основе 5% Na КМЦ
IMG_da9c4057-2b1d-4fc2-bc06-2dff58d4764d
Примечание: * - различие достоверно при р<0,05
** - различие достоверно при р<0,01
Рис. 6. Зависимости скорости растворения от времени для различных основ
Таким образом, в результате определения скорости высвобождения анилокаина химическим и физико-химическим методами, изучения кинетических закономерностей высвобождения выбрана мазевая композиция на основе 5% Na КМЦ.
Известно, что при лечении раневых и воспалительных процессов одного обезболивающего компонента недостаточно. Поэтому для обеспечения необходимого терапевтического эффекта целесообразно введение антимикробного средства. Согласно литературным данным и мнениям специалистов оптимальными и доступными для этих целей являются диоксидин и хлоргексидина биглюконат. Выбор концентрации антимикробного компонента в мазевой композиции осуществляли методом диффузии в агар с учетом МИК антисептика и разновидностью возбудителей в ране (золотистый стафилококк, кишечная палочка). Анализ полученных данных показал, что высокую антимикробную активность в отношении бактерий золотистого стафилококка и кишечной палочки проявили ХГБ в концентрациях от 0,7% до 2% и диоксидин в концентрациях от 0,2% до 2%.
Окончательный выбор антисептика осуществляли вышеназванным методом по отношению к 4 видам микроорганизмов на мазях изучаемого состава, содержащих анилокаин (рис. 7).
IMG_5f26b2d4-a5bc-4ee2-a880-ed8403ffec75
Рис. 7. Антимикробная активность мазевой композиции анилокаина
При выборе антисептика ориентировались на концентрацию, при которой проявляется высокая антимикробная активность. Такому условию отвечает диоксидин в концентрации 2%, обладающий широким спектром антибактериального действия и эффективный в отношении основных возбудителей раневой инфекции.
Существенное значение при лечении раневых и воспалительных процессов имеет осмотическая активность мазей. Результаты исследований, представленные в табл. 2, показывают, что изучаемый состав обладает значительным и продолжительным дегидратирующим действием и превосходит гипертонический раствор (контроль) по силе и продолжительности действия в 7 раз.
Таблица 2
Осмотическая активность мазевой композиции
Объект исследованияАбсорбировано физиол. р-ра, %Время абсорбции, час.
10% раствор натрия хлорида (контроль)22,1 ± 2,42
Состав исследуемой композиции: анилокаин - 5,0 диоксидин - 2,0 Na КМЦ - 5,0 глицерин - 10,0 воды очищенной до 100,0 155 ± 2<*** 14> 14
Примечание: *** - различие достоверно по сравнению с контролем при р<0,001
Таким образом, в результате проведенных структурно-механических, биофармацевтических, технологических и микробиологических исследований по разработке оптимального состава мази для лечения раневых и воспалительных процессов предложен следующий состав, названный условно: «Анилкам»
Анилокаина - 5,0
Диоксидина - 2,0
Na КМЦ - 5,0
Глицерина - 10,0
Воды очищенной до 100,0
Технологический процесс изготовления мази осуществляли в соответствии с общепринятыми правилами приготовления мазей с учетом природы и физико-химических свойств лекарственных и вспомогательных веществ.
Стандартизацию мази «Анилкам» проводили в соответствии с требованиями ГФ ХІ изд. По внешнему виду мазь представляет собой однородную, вязко-пластично-упругую массу желтого цвета гелеобразной консистенции со слабым характерным запахом аминов.
При разработке методик качественного и количественного анализа анилокаина и диоксидина в мази за основу были взяты методики, используемые для субстанций и модифицированные применительно к разработанной лекарственной форме.
Количественное определение анилокаина в мази проводили методом экстракционного титрования 0,015 М раствором натрия лаурилсульфата, обеспечивающим унификацию способа оценки качества от субстанции до лекарственной формы. Первоначально исследовано влияние условий: РН водной фазы, природы экстрагента и его соотношения с водной фазой на количественную экстракцию продукта, образующегося в результате взаимодействия анилокаина с натрия лаурилсульфатом.
Метрологические характеристики методики количественного определения анилокаина в мази «Анилкам» отражены в таблице 3.
Таблица 3
Метрологическая характеристика методики количественного определения анилокаина в мази «Анилкам»
Номер серии мазиf`xSSxPt (P,f)Dx?,%
145,000,00020,0063952,780,01410,36
245,020,00030,0075952,780,01670,42
344,980,00070,0122952,780,02700,68
445,110,00090,0149952,780,02990,93
545,070,00040,0086952,870,01920,47
Количественное определение диоксидина в мази «Анилкам» проводили спектрофотометрическим методом в УФ-области спектра. Метрологические характеристики методики количественного определения диоксидина в мази «Анилкам» отражены в таблице 4.
Таблица 4
Метрологическая характеристика методики количественного определения диоксидина в мази «Анилкам»
Номер серии мазиf`XSSXPT (P,f)Dx?,%
142,030,00020,0055952,780,01220,74
242,000,00030,0071952,780,01581,00
341,950,00030,0075952,780,01671,03
441,990,00020,0068952,780,01520,96
542,040,00020,0058952,780,01300,78
Полученные результаты использованы для составления проекта ФСП “Мазь «Анилкам»“.
Изучение стабильности разработанной мази проводили методом естественного (на 5-ти сериях мази) хранения при комнатной температуре в защищенном от света месте. Результаты изменения параметров определяли через промежутки времени, равные 6 месяцам хранения. Критериями качества служили следующие показатели: внешний вид, подлинность, наличие посторонних примесей, количественное содержание действующих веществ, значения РН водных растворов, микробиологическая чистота. Оценивая стабильность физико-химических показателей и количественного содержания действующих веществ в мази «Анилкам» в течение 2 лет 3 мес. позволило установить срок хранения для данной мази 2 года.
Доклиническое изучение мази проводилось путем оценки ее специфической местноанестезирующей, противовоспалительной, ранозаживляющей и антимикробной активности.
В опытах на животных установлено наличие выраженной анестезирующей, ранозаживляющей, противоожоговой и противовоспалительной эффективности разработанной мази, а также отсутствие местно-раздражающего действия. Данные фармакологических исследований свидетельствуют, что разработанная мазь не уступает препаратам, выпускаемым промышленностью, а по некоторым параметрам превышает эффективность официнальной мази «Левосин». При проведении гистологического исследования участков кожи и подкожной клетчатки экспериментальных животных (белых крыс) с целью изучения ранозаживляющего действия мази «Анилкам» установлено, что при лечении линейных ран у животных мазь способствует: - более раннему появлению грануляций и началу эпителизации раневого дефекта;
- ускорению заживления ожоговых ран у животных, выражающееся в более раннем формировании зрелой грануляционной ткани и полной эпителизации раневого дефекта, раньше исчезает воспалительная инфильтрация, закрытие дефекта происходит эпителиальным пластом равномерной толщины без признаков воспалительной гиперплазии, сформировавшаяся зрелая волокнистая соединительная ткань имеет типичное гистологическое строение.
Таким образом, по эффективности мазь «Анилкам» не уступает мази «Левосин» и имеет более выраженное ранозаживляющее действие, что выражается в сокращении сроков заживления, эпителизации и формирования зрелой волокнистой соединительной ткани типичного гистологического строения в зоне раневого дефекта.
На разработанную мазь составлена нормативная документация: проект ФСП, проект инструкции по применению, отчет по доклиническим исследованиям, которые представлены на рассмотрение в ФГУ НЦ ЭСМП Росздравнадзора. Мазь «Анилкам» прошла этап экспертизы возможности безопасного ее применения. В настоящее время решается вопрос о разрешении на проведение клинических исследований.
обезболивающий гель «Анилогель» для применения при диагностических и лечебных манипуляциях в урологии
Инструментальные исследования являются одними из самых важных в урологии и служат для диагностики заболеваний уретры, мочевого пузыря и почек. Однако, при проведении урологических исследований существенным недостатком является болезненность процедуры, а также возможность возникновения осложнений в виде инфекционно-воспалительных явлений.
Этот факт послужил основанием для разработки отечественного препарата, сочетающего в себе местноанестезирующие, противовоспалительные и антимикробные свойства при малом компонентом составе.
С целью выбора рациональной концентрации анилокаина проведены исследования поверхностноанестезирующей активности его водных растворов по методу Ренье-Валетта, которые показали, что для обеспечения анестезирующего эффекта при инструментальных вмешательствах достаточной является концентрация 2%.
Для предотвращения возникновения инфекционно-воспалительных осложнений после эндоурологических манипуляций в состав геля необходимо ввести антимикробный и дезинфицирующий компонент. Этими свойствами обладает бактерицидное и антисептическое средство - хлоргексидина биглюконат - эффективный в отношении многих грамположительных и грамотрицательных бактерий. Для профилактических целей раствор хлоргексидина биглюконат применяется в концентрациях 0,05%, 0,1% и 0,2%. Эти концентрации и были выбраны для углубленных исследований в отношении тест - культур микроорганизмов: Staphylococcus aureus (штамм АТСС 2592), Escherichia coli (штамм АТСС 6538-Р) и Pseudomonas aeruginosa (штамм АТСС 27857). Исследования осуществляли методом диффузии в агар. Результаты представлены на рис. 8.
IMG_aa838901-5b8d-4441-8b8c-742013dcc123
Рис. 8. Исследование антимикробной активности хлоргексидина биглюконата различных концентраций в гелевом носителе
Анализируя полученные результаты можно сделать вывод, что оптимальной концентрацией хлоргексидина биглюконата, при которой проявляется наибольший антимикробный эффект, является 0,1%.
С целью выбора оптимального носителя изучено 11 композиций гидрофильного характера на основе доступных и широко применяющихся полимеров. Во все композиции для предотвращения высыхания и пластификации основ вводили глицерин в концентрации 10% (табл. 5). Кроме того, глицерин обладает антисептическими свойствами, поэтому его применяют для предотвращения заражения ран.
Выбор полимерной основы осуществляли по внешнему виду, консистенции и биофармацевтической доступности.
Предварительно проведена визуальная оценка консистенции растворов полимеров, в результате которой были отбракованы образцы, представляющие собой слишком жидкие носители: 2% МЦ, 2,5% МЦ, 3% Na альгинат. Неудовлетворительными по внешнему виду (неоднородны) оказались гели на основе МЦ 3% и 3,5%.
Биофармацевтические исследования с целью выбора оптимального состава гелевой основы осуществляли по результатам кинетического исследования высвобождения действующих веществ, которое проводили кондуктометрическим методом (рис. 9).
IMG_6a5c267e-6b48-456c-a3d7-0566b16951b4
Примечание: * - различие достоверно при р<0,05
** - различие достоверно при р<0,01
Рис. 9. Кинетические кривые высвобождения анилокаина и ХГБ из гидрофильных носителей
При равных условиях проведения эксперимента более быстрое высвобождение действующих веществ происходит из геля на основе Na КМЦ 2%. Вязкость геля составила 2,96 ПАЧС.
Таким образом, на основе изучения органолептических свойств, биофармацевтических исследований и определения вязкости предложен следующий состав геля, условно названный «Анилогель»: Анилокаина 2,0
Раствора хлоргексидина биглюконата 1% - 10 мл
Na КМЦ 2,0
Глицерина 10,0
Воды очищенной до 100,0
Гель готовили в асептических условиях по общим правилам, исходя из свойств входящих в состав ингредиентов. В связи с тем, что гель «Анилогель» предназначен для введения в уретральную полость, то необходимо обеспечить его стерильность. Так как раствор анилокаина не выдерживает термическую стерилизацию паровым методом при повышенной температуре, то в качестве щадящего метода предложено использовать стерилизацию текучим паром при 1000 - 30 мин.
Контроль качества геля «Анилогель» проводили в соответствии с требованиями ГФ ХІ изд. по органолептическим, физико-химическим показателям (РН), подлинности, количественному содержанию действующих веществ, микробиологической чистоте (стерильность)
По внешнему виду гель «Анилогель» представляет собой однородную массу гелеобразной консистенции со слабым запахом аминов. РН водного раствора геля «Анилогель» составляет от 5,0 до 7,0, что определяет ее благоприятное действие на слизистые оболочки.
При разработке методик качественного анализа, предложенные для субстанций анилокаина и хлоргексидина биглюконата методики идентификации, модифицировали и апробировали при оценке качества геля «Анилогель».
С целью выбора условий разделения компонентов геля для дальнейшего использования их при разработке методик количественного анализа анилокаина и хлоргексидина биглюконата, а также для определения продуктов разложения после стерилизации геля предложен метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Методику разделения методом ВЭЖХ проводили на стандартных водных растворах веществ с концентрацией 0,5 мг/мл. В работе использовали обращенно-фазный вариант ВЭЖХ на основе приборного комплекса «Милихром А-02». Исследования проводили с использованием градиентного режима. Полученные хроматограммы раствора геля представлены на рис. 10 и 11.
По результатам проведенных исследований предложены следующие условия анализа анилокаина и хлоргексидина биглюконата в геле методом высокоэффективной жидкостной хроматографии на приборе «Милихром А - 02»: хроматографическая колонка диаметром 2 мм, длиной 75 мм; неподвижная фаза Нуклеосил 100 С 18 (диаметр зерен сорбента - 5 мкм); температура колонки - 40°С; подвижная фаза: ацетонитрил - фосфатный буфер (РН 3) (с добавлением ион-парного реагента октилсульфоната натрия: 50 мг на 100 мл фосфатного буфера); режим элюирования - градиентный; скорость потока элюента - 100 мкл/мин.; детектирование на 2 аналитических длинах волн (210 нм для анилокаина и 260 нм - для хлоргексидина биглюконата.
IMG_c888d712-3b05-4061-8c78-c946f2556d17
IMG_65b1bb2a-bd26-4b58-b38d-25f121695a5a
Рис. 10. Хроматограмма раствора геля для определения анилокаина (объем вводимой пробы - 5 мкл)Рис. 11. Хроматограмма раствора геля для определения хлоргексидина биглюконата (объем вводимой пробы - 25 мкл)
Хроматограмма раствора геля до и после стерилизации идентична, что свидетельствует об отсутствии продуктов разложения компонентов геля. Таким образом, для стерилизации можно рекомендовать термический метод текучим паром при температуре 1000С в течение 30 минут.
При определении показателя «Стерильность» после стерилизации геля установлено, что после 14 суток инкубации в образцах признаков роста микроорганизмов нет, они оставались бесцветными и прозрачными. Таким образом, препарат «Анилогель» соответствует требованию стерильности.
СУППОЗИТОРИИ с анилокаином экстемпорального изготовления и промышленного производства
Разработка состава и технологии суппозиториев с анилокаином экстемпорального изготовления
Вопросы, связанные с изготовлением лекарственных средств в условиях аптеки, являются предметом обсуждения специалистов-практиков и организаторов фармацевтической и медицинской деятельности. Эта группа ЛС будет востребована всегда, т.к. экстемпоральные прописи обладают целым рядом положительных моментов по сравнению с ГЛС.
Разработка состава и технологии суппозиториев с анилокаином включала выбор оптимального состава суппозиторных основ, разработку рациональной технологии и оценку качества полученных суппозиториев.
При разработке состава суппозиториев экстемпорального изготовления учитывали опыт использования доступных для аптечной практики различных вспомогательных веществ, состав которых представлен в табл. 6.
Лекарственное вещество в расплавленную основу вводили в виде водного раствора. Полученные суппозитории имели правильную овально-торпедовидную форму белого или желтоватого цвета в зависимости от вида носителя.
Таблица 6
Состав основ для суппозиториев экстемпорального изготовления
НаименованиеКоличество компонентов в основе (г)
компонента12345678910
Масло какао1003025
ГХМ95
Твердый жир60959088601009595
Парафин10101010
Эмульгатор Т-2525
Эмульгатор № 15
Моноглицериды дистиллированные55
Физико-химические и структурно-механические свойства суппозиториев представлены в табл. 7.
Таблица 7
Физико-химические свойства суппозиториев
№ композицийСредняя масса (г)Т плавления (С0)Т затвердевания (С0)Время полной деформации, мин.
12,01±0,131255,02
21,99±0,1362718,50
32,04±0,135286,47
42,02±0,136262,70
52,00±0,135323,15
62,02±0,1372918,50
71,99±0,1362617,20
81,97±0,131267,00
92,00±0,133275,06
102,02±0,133264,39
Сравнительный анализ по внешнему виду и основным технологическим показателям (время полной деформации, температура плавления, температура затвердевания) суппозиториев показал, что состав № 8 не удовлетворяет по внешнему виду, а составы № 2, 6, 7 - по времени полной деформации.
С целью окончательного выбора основы изучена биологическая доступность методом равновесного диализа через полупроницаемую мембрану. Анализ полученных результатов показал, что наилучшей основой для суппозиториев экстемпорального изготовления является композиция: твердый жир - 88%, парафин -10% и эмульгатор Т-2 - 2%.
Разработка состава и технологии суппозиториев с анилокаином промышленного производства
С целью установления потенциальных носителей для суппозиториев промышленного производства на первом этапе исследования изучено 57 композиций, представляющих собой различные сочетания гидрофобных, гидрофильных и дифильных основ в сочетании с поверхностно-активными веществами. После проведенной первоначальной оценки основ и определения физико-химических и структурно-механических характеристик: внешнего вида (отсутствие вкраплений, отсутствие расслоений, однородность на срезе), времени полной деформации (для гидрофобных основ) или времени растворения (для гидрофильных основ), температуры плавления, температуры затвердевания удовлетворяющим всем этим показателям осталось 35 композиций.
С использованием основ, приведенных в табл. 8, готовили суппозитории методом выливания. Концентрация анилокаина, определенная как оптимальная в предыдущих исследованиях, составила 5%. Лекарственное вещество в расплавленную основу вводили в виде водного раствора.
При разработке состава суппозиториев исследовали влияние основ и ПАВ на высвобождение анилокаина по схеме двухфакторного дисперсионного анализа с повторными опытами. Параметром оптимизации избрали концентрацию высвободившегося анилокаина в течение 60 минут. Высвобождение вещества изучали методом равновесного диализа через полупроницаемую мембрану. Диализной средой являлся фосфатно-боратный буферный раствор с РН=7,8, что соответствует значению РН слизистой оболочки прямой кишки. Концентрацию анилокаина в пробах диализата определяли экстракционным титрованием 0,005 М раствором натрия лаурилсульфата.
При постановке эксперимента рассчитанное количество основы расплавляли на водяной бане, вносили 3% ПАВ от общей массы, вводили раствор анилокаина, перемешивали смесь до образования однородной массы. Полученную массу разливали в охлажденные суппозиторные формы.
Изучаемые факторов обозначали: А - суппозиторные основы: а1 - твердый жир, а2 - витепсол W-35, а3 - полиэтиленоксидная основа, состоящая из 80% ПЭО-1500 и 20% ПЭО-400, а4 - полиэтиленоксидная основа, состоящая из 20% ПЭО-4000, 70% ПЭО-1500 и 10% ПЭО-400;
В - ПАВ: b1 - эмульгатор № 1, b2 - эмульгатор Т-2, b3 - моноглицериды дистиллированные, b4 - без ПАВ.
При дисперсионном анализе полученных данных выявлено, что все изучаемые факторы существенно влияют на высвобождаемость анилокаина (Fэксп> Fтабл).
Выявленные с помощью множественного критерия Дункана различия средних величин показали, что лучшими суппозиторными композициями являются: Витепсол W-35 без ПАВ и полиэтиленгликолевая основа, состоящая из 20% ПЭО-4000, 70% ПЭО-1500 и 10% ПЭО-400. Поскольку Витепсол W-35 является импортируемой основой, то для дальнейших исследований выбраны композиции, имеющие отечественную сырьевую базу и широко используемые на фармацевтических производствах: 1. ПЭО-400 20%, ПЭО-1500 80%;
2. ПЭО-400 10%, ПЭО-1500 70%, ПЭО-4000 20%.
Параллельно выбор суппозиторной основы проводили кондуктометрическим методом анализа. Опыты проводили при температуре 310 К до полного растворения суппозиториев, измеряя удельную электропроводимость через определенные промежутки времени. По полученным данным строили кривые растворения суппозиториев, которые показали, что при равных условиях проведения эксперимента значение удельной электропроводимости возрастает для обеих основ, т.е. увеличивается количество высвобождаемых ионов ЛВ в воду (рис. 12).
На первоначальном этапе изучали скорость растворения суппозиториев как с анилокаином, так и без него. Процесс растворения суппозиториев протекает в две стадии: первая - это взаимодействие суппозиториев с растворителем, которая завершается образованием вокруг них насыщенного раствора; вторая - завершается растворение и отвод растворенного вещества. Как следует из рис. 12, высвобождение анилокаина происходит несколько быстрее из композиции 10% ПЭО-400 70% ПЭО-1500 20% ПЭО-4000. Следует также отметить, что суппозитории на основе 20% ПЭО-400 80% ПЭО-1500 под воздействием комнатной температуры становятся пластичными, что создает определенные неудобства при введении суппозиториев в патологические полости.
Для суппозиториев на выбранных основах разработаны технологические схема производства с учетом общих закономерностей, установленных при разработке ректальных суппозиториев.
Оценку качества суппозиториев проводили согласно основным положениям статьи ГФ XI изд.
Внешний вид: суппозитории правильной и одинаковой торпедообразной формы, достаточной твердости, обеспечивающей удобство введения, белого цвета, со слабым характерным запахом анилокаина. Отсутствие вкраплений, определяемых визуально на срезе, свидетельствует об однородности суппозиториев.
Средняя масса суппозиториев на гидрофильной основе (состав № 1) составила 2,25±0,11 г, суппозиториев на гидрофобно
Вы можете ЗАГРУЗИТЬ и ПОВЫСИТЬ уникальность своей работы
