Характеристика українських ізолятів вірусу зеленої крапчастої мозаїки огірка - Автореферат

КИЇВСЬКИЙ НАЦІОНАЛЬНИЙ УНІВЕРСИТЕТ ІМЕНІ ТАРАСА ШЕВЧЕНКАОстаннім часом віруси, що уражують огірки, набувають в умовах монокультурних агроценозів характеру епіфітотій, що значною мірою відображається на економічному стані сільськогосподарського виробництва. В уражених рослинах у процесі їх онтогенезу віруси спричинюють порушення обміну речовин, які здебільшого призводять до розвитку таких симптомів, як різноманітні мозаїки, пригнічення росту, антоціаноз, опадання квітконосу і завязі, деформації органів у вигляді гофрування листкових пластинок, а також деформації та пухирчасті здуття на плодах. Захворювання, спричинене ВЗКМО, було зареєстровано ще в середині 60-70-х років у тепличних господарствах Київської області [Глушак Л.Ю., 1969], але відтоді не було проведено жодних досліджень у напрямку вивченння молекулярно-біологічних властивостей ВЗКМО, шляхів його передачі та вивчення штамового різноманіття. Зважаючи на те, що ВЗКМО поширений також у країнах, які межують з Україною, важливим було встановлення штамової приналежності українських ізолятів з метою порівняння зі штамами та ізолятами цього вірусу, поширеного в цих країнах. Оскільки на сьогодні поширення вірусу зеленої крапчастої мозаїки огірка має місце у тепличних господарствах України і може призводити до втрати половини врожаю, вивчення його властивостей та шляхів передачі надасть можливість певною мірою обмежити поширення даного вірусу і, як наслідок, зменшити втрати врожаю овочевих культур.Обєктом досліджень є ізоляти вірусу зеленої крапчастої мозаїки огірка (ВЗКМО), виділені з рослин Cucumis sativus трьох тепличних господарств України: ізолят 1 був виділений із огірків сорту "Марінда" (СПК "Тепличний" Миколаївська обл.), ізолят 2 - із огірків сорту "Біанка" (ПП "Пектораль" Дніпропетровська обл.), ізолят 3 - із огірків сорту "Корольок" ("Кримтеплиця" Автономна республіка Крим). Ідентифікацію вірусних ізолятів проводили за допомогою непрямого імуноферментного аналізу з діагностичними антисироватками на полістиролових плашках Labsystem. Розміри вірусних часток ізолятів ВЗКМО визначали методом електронної мікроскопії. Для визначення молекулярних мас капсидних білків проводили електрофорез за Laemmli в 14% розділювальному і 5% концентрувальному поліакріламідному гелі. Для встановлення кола рослин-хазяїв та типу реакції на рослинах-індикаторах для вірусних ізолятів проводили механічне ураження рослин у фазі двох справжніх листків за допомогою карборунду.Симптоми, що проявлялися на рослинах огірків тепличних господарств були подібними до симптомів, які викликають віруси, що уражують гарбузові культури. До таких вірусів належить вірус огіркової мозаїки, вірус зеленої крапчастої мозаїки огірка, вірус мозаїки кавуна 2, вірус жовтої мозаїки цукіні, вірус некрозу огірка та багато інших. З метою підтвердження приналежності виділених ізолятів до вірусу зеленої крапчастої мозаїки огірка подальші дослідження було сфокусовано на вивченні морфологічних та фізичних властивостей цих ізолятів. Отже, грунтуючись на різниці в розмірах вірусних часток, виділені вірусні ізоляти було віднесено до роду Tobamovirus, а саме: до вірусу зеленої крапчастої мозаїки огірка. Отже, згідно з результатами ІФА, електронномікроскопічних та електрофоретичних досліджень, вірусні ізоляти, виділені з рослин Cucumis sativus трьох тепличних господарств України, належать до вірусу зеленої крапчастої мозаїки огірка роду Tobamovirus.Досліджено властивості українських ізолятів ВЗКМО, проведено порівняльний філогенетичний аналіз гена капсидного білка ізолятів з відомими штамами та ізолятами цього вірусу та отримано високоспецифічні та чутливі поліклональні кролячі антисироватки. Вперше досліджено серологічні, біологічні та молекулярні властивості ізолятів вірусу зеленої крапчастої мозаїки огірка, виділених з тепличних рослин Cucumis sativus в Україні. Проведено порівняльний філогенетичний аналіз трьох українських ізолятів вірусу зеленої крапчастої мозаїки огірка за геном капсидного білка та показано високу гомологію українських ізолятів ВЗКМО до російського ізоляту МС-1 (96%) та грецьких ізолятів CR-3 і CR-5 (94%). Встановлено, що джерелом інфекції вірусу зеленої крапчастої мозаїки огірка в тепличних господарствах України є контамінований вірусом ґрунт. Показано, що в Україні вірус зеленої крапчастої мозаїки огірка інфікує лише рослини Cucumis sativus закритого ґрунту та не уражує рослини відкритого ґрунту.