Исследование и характеристика особенностей синегнойной палочки (Pseudomonas aeruginosa) – условно-патогенного микроорганизма. Определение токсиннейтрализующей активности моноклональных антител. Рассмотрение и анализ пигментов пиоцианина и флюоресцеина.
При низкой оригинальности работы "Характеристика моноклональных антител к рекомбинантным белкам pseudomonas aeruginosa", Вы можете повысить уникальность этой работы до 80-100%
1. Обзор литературы 1.1 Общая характеристика Pseudomonas aeruginosa 1.1.1 Основные факторы патогенности синегнойной палочки 1.1.2 Разработка вакцин против P. aeruginosa 1.2 Гибридомная технология. Моноклональные антитела 2. Материалы и методы 2.1 Оборудование и материалы 2.1.1 Клеточные линии 2.1.2 Антигены и антитела 2.1.3 Оборудование 2.1.4 Реактивы 2.2 Методы 2.2.1 Получение рекомбинантного белка OprF-ЭTA 2.2.2 Индукция экспрессии рекомбинантного белка OprF-aTox 2.2.3 Получения клеточного лизата штамма Е.coli PA-OPRF-ЭTA после экспрессии рекомбинантного гена 2.2.4 Хроматографическая очистка рекомбинантного белка OprF- ЭTА 2.2.5 Иммуноферментный анализ (ИФА) 2.2.6 Иммунодот вариант иммуноферментного анализа 2.2.7 Цитотоксический тест 2.2.8 Нейтрализация цитотоксичности 3. Обсуждение Заключение Список литературы Список сокращений АЖ - асцитная жидкость Ат - антитела ДМСО - диметилсульфоксид ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота ИПТГ - изопропил-?-D-галактопиранозид ИФА - иммуноферментный анализ КББ - Карбонат-бикарбонатный буфер КЖ - культуральная жидкость ЛПС - липополисахарид ПС - полисахарид МА - моноклональное антитело НЦТ - нейтрализация цитотоксичности ПХ - пероксидаза корня хрена ПЦР - полимеразная цепная реакция ПЭГ - полиэтиленгликоль РНК - рибонуклеиновая кислота СПК - сыворотка плода коровы с/н - супернатант ТМБ - 3,3,5,5-тетраметилбензидин ЦТ - цитотоксичность ЭТА - экзотоксин А Pseudomonas aeruginosa СНО - линия клеток яичника китайского хомячка DMEM - среда Игла в модификации Дульбекко eEF2 - эукариотический фактор элонгации Ig - иммуноглобулин LB - cреда Лурия-Бертани Opr - белок наружной мембраны PA - Pseudomonas aeruginosa PBS - фосфатно-солевой буферный раствор ПААГ - полиакриламидный гель Tris - трис(гидроксиметил)аминометан Введение Актуальность проблемы Синегнойная палочка (Pseudomonas aeruginosa) - условно-патогенный микроорганизм, который и в настоящее время продолжает остаться одним из главных возбудителей внутрибольничных инфекций. Частота развития синегнойной инфекции связана с увеличением количества иммунокомпрометированных больных и больных находящихся в группе риска, в результате травм, хирургических вмешательств, обширных лучевых и термических поражений, диагностических манипуляций, онкологических процессов и нерационального использования антибиотиков [8, 9]. В результате культивирования полученных штамм-продуцентов, в большом количестве синтезируется протективный антиген (рекомбинантный белок), который подвергается очистке и затем может быть использован для создания вакцины. Оказалось, что 5 антител были направлены к aTox, 2 антитела только к OprF, 2 не направлены ни к aTox, ни к OprF, 3 направлены к aTox и OprF.
Вы можете ЗАГРУЗИТЬ и ПОВЫСИТЬ уникальность своей работы
