Изучение токсического влияния кадмия на активность аминотрансфераз у потомства белых крыс - Дипломная работа

1. Литературный обзор 1.1 Кадмий, как основной источник загрязнения, пути поступления в окружающую среду и действие на метаболические процессы в организме 1.2 Роль и структура аспартатаминотрансферазы и аланинаминотрансферазы 1.2.1 Краткая история открытия реакции переаминирования 1.2.2 Структура аспартатаминотрансферазы 1.2.3 Механизм реакции переаминирования 1.2.4 Биологическая роль трансаминаз 2. Материалы и методы 2.1 Экспериментальная часть 2.1.1 Экспериментальные животные 2.1.2 Подготовка биологического материала 2.1.2.1 Подготовка сыворотки крови 2.1.2.2 Подготовка гомогенатов тканей и органов 2.2 Определение активности аминотрансфераз методом Райтмана -Френкеля 2.2.1 Ход определения активности аспартатаминотрансферазы и аланинаминотрансферазы в сыворотке крови 2.2.2 Определение активности аспартатаминотрансферазы и аланинаминотрансферазы в гомогенатах органов 3. Результаты и обсуждение Выводы Список использованных источников Приложение СПИСОК СОКРАЩЕННЫХ НАЗВАНИЙ АСТ - аспартатаминотрансфераза АЛТ - аланиаминотрансфераза ПДК - предельно допустимая концентрация ВОЗ - Всемирная организация здравоохранения ПОЛ - перекисное окисление липидов АМ - альвеолярные макрофаги ПНЛ - полиморфонуклеарные лейкоциты АТФ - аденозинтрифосфорная кислота ПЛФ - пиридоксальфосфат ПМФ - пиридоксаминфосфат ПВК - пировиноградная кислота 2,4-ДНФГ - 2,4 динтрофенилнидразин ЦТК - цикл трикарбоновых кислот АДФ - аденозиндифосфат Введение Известно, что тяжелые металлы обладают выраженными кумулятивными свойствами, высокой биохимической активностью по отношению к сульфгидрильным, тиоловым, карбоксильным и другим активным группам белков и аминокислот. Кадмий (Cd) является одним из опасных загрязнителей природной среды. Адсорбируясь через легкие и желудочно-кишечный тракт, уже через несколько минут он обнаруживается в крови. Органами - мишенями Cd являются печень, почки, костный мозг, сперма, трубчатые кости и отчасти селезенка. Наиболее важными с практической точки зрения и хорошо изученными ферментами являются аспартатаминотрансфераза и аланинаминотрансфераза - ферменты, катализирующие межмолекулярный перенос аминогрупп между амино - и кетокислотами/5/. Среднесуточное потребление кадмия человеком составляет примерно 50 мкг с отдельными отклонениями в зависимости от индивидуальных и региональных особенностей /2/.Предельно допустимая концентрация (ПДК) кадмия в атмосферном воздухе составляет 0,3 мкг/м, в воде водоисточников - 0,001мг/л, в почвах песчаных и супесчаных кислых и нейтральных 0,5, 1,0 и 2,0 мг/ кг соответственно /2/. Как показали проведенные Шоповой В. Л. с сотрудниками исследования /17/, процент альвеолярных макрофагов (АМ) при воздействии кадмия в первый день значительно понижался (до 11,5%). С другой стороны - влияние на потомство особей, подвергшихся действию соединений этого тяжелого металла. 1.2 Роль и структура аспартатаминотрансферазы и аланинаминотрансферазы 1.2.1 Краткая история открытия реакции переаминирования аминокислот Реакция переаминирования аминокислот была открыта учёными А.Е.Браунштейном и М.Г. Крицман в 1937 году при изучении дезаминирования глутаминовой кислоты в мышечной ткани /24/. Было замечено, что при добавлении к гомогенату мышц глутаминовой и пировиноградной кислот образуется L-кетоглутаровая кислота и аланин без промежуточного образования аммиака; добавление аланина и - кетоглутаровой кислоты приводило к образованию пировиноградной и глутаминовой кислот.