Влияние бактериальных лектинов бацилл на активность глутатион-S-трансферазы и содержание аминотрансфераз, мочевины, холестерина, церулоплазмина в сыворотке крови крыс при стрессе. Действие стресса на молочнокислую микрофлору толстого кишечника животных.
При низкой оригинальности работы "Изучение роли лектинов Paenibacillus polymyxa в регуляции метаболизма животных", Вы можете повысить уникальность этой работы до 80-100%
К настоящему времени имеется довольно широкий набор бактерий, синтезирующих лектины разнообразной углеводной специфичности (Никитина и др., 1989; Карпунина, 1989, 2002; Коваленко, 1990; Лахтин, 1992;). Цель работы состояла в изучении роли лектинов ЛІ и ЛІІ Paenibacillus polymyxa 1460 в регуляции некоторых метаболических процессов в организме экспериментальных животных в норме и при стрессовых воздействиях различной природы. Изучить влияние лектинов ЛІ и ЛІІ P.polymyxa 1460 на активность глутатион-S-трансферазы экспериментальных животных (крыс) in vivo в норме и в условиях холодового, иммобилизационного и этанолового стрессов. Впервые выявлена регуляторная роль лектина ЛІІ, выделенного с поверхности почвенных азотфиксирующих P.polymyxa 1460, в условиях патологических нарушений организма, вызванных холодовым и этаноловым стрессами в отношении фермента глутатион-S-трансферазы и церулоплазмина in vivo. Установлено, что лектин ЛІІ способен оказывать влияние на микрофлору кишечника, регулируя количество молочнокислых бактерий в условиях иммобилизационного, холодового и этанолового стрессов.
Список литературы
По теме диссертации опубликовано 12 работ, из них 2 статьи в журналах, рекомендованных ВАК РФ. лектины бацилла микрофлора стресс
2. Собственные исследования и их обсуждение
2.1 Материалы и методы
Объектом исследования явились лектины Л? и Л??, выделенные с поверхности почвенных азотфиксирующих бактерий Paenibacillus polymyxa 1460 по методу (Карпунина и др., 1993). Количественное содержание белка определяли по методу M. Bradford (1976).
Лектины бацилл вводили интраперитонеально самцам беспородных белых крыс со средней массой тела 210 г в дозе 2 мкг/животное. По характеру воздействия животные были поделены на 9 групп, по 10 крыс в каждой. 1 группа - контрольные животные; 2 группа - животные, которые получали раствор лектина ЛІ; 3 группа - животные, которым вводили раствор лектина ЛІІ; 4 и 5 группы - животные, которых подвергали воздействию холодового стресса в течение 10 и 60 минут соответственно; 6 группа - животные, подвергавшиеся иммобилизационному стрессу в течение 10 минут; 7 группа - животные, которые получали раствор лектина ЛІІ за сутки перед холодовым стрессом (10 минут); 8 группа - животные, подвергавшиеся иммобилизационному стрессу в течение 10 минут через сутки после введения ЛІІ; 9 группа - животные, подвергавшиеся влиянию этанолового стресса в течение 10 и 60 минут. Кровь из организма крыс отбирали через 24 часа после введения лектина и сразу после стресса.
Определение активности глутатион-S-трансферазы (GST) проводили по методу (Habig, Jakoby, 1981).
Определение активности аспартатаминотрансферазы (АСТ) и аланинаминотрансферазы (АЛТ) в сыворотке крови, проводили по методу С. Райтманда-Френкеля (1957), применяя набор реагентов фирмы «Lachema».
Содержание мочевины и холестерина в сыворотке крови определяли с помощью набора реактивов фирмы “Агат” (г. Москва).
Содержание церулоплазмина (ЦП) в сыворотке крови определяли по методу (Ravin, 1961).
Количество молочнокислых микроорганизмов в кишечнике крыс определяли методом серийных разведений (Костенко, 2001).
Полученные результаты обрабатывали методами вариационной статистики с применением t - критерия Стьюдента (Зайцев, 1991).
2.2 Изучение влияния бактериальных лектинов ЛІ и ЛІІ P. polymyxa 1460 на активность глутатион-S-трансферазы при различных видах стресса
Изучали влияние лектинов P. polymyxa 1460 ЛІ и ЛІІ на активность GST, являющегося дезинтоксикационным ферментом, и осуществляющим метаболическую защиту организма от экзогенных и эндогенных токсических метаболитов, как контрольных крыс, так и подвергавшихся различным видам стресса (иммобилизационный, холодовой, этаноловый).
Было обнаружено, что лектин ЛІ не вызывал изменений в активности глутатион-S-трансферазы эритроцитов крыс по сравнению с контролем. Активность GST составляла 19,9 мкмоль/мин·л. При введении же лектина ЛІІ в организм крыс активность GST эритроцитов крыс понижалась на 24 % относительно интактных животных. В связи с этим для дальнейшей работы был выбран лектин ЛІІ.
Действие иммобилизационного стресса на экспериментальных животных в течение 10 минут не вызывало существенных изменений в активности GST (табл.1). В связи с этим мы попытались найти модель стресса, при которой активность GST эритроцитов крови самцов крыс изменялась бы уже при 10 минутном воздействии стрессора. При моделировании холодового стресса, крысы находились на льду в течение 10 и 60 минут. Было показано, что активность GST при этом воздействии значительно снижалась относительно контроля. Холодовой стресс в течение 10 минут вызывал понижение активности фермента относительно интактных животных на
19 % и составил 16,1 мкмоль/мин•л; при действии в течение 60 минут происходило еще более существенное снижение активности GST - на 33 % (табл. 1).
Таблица 1 Влияние иммобилизационного, холодового и этанолового стресса на активность глутатион-S-трансферазы эритроцитов крови крыс
Характер воздействия Активность фермента мкмоль/мин·л %
М±m М±m контроль 19,9 ± 0,6 100,0 ± 3,2 иммобилизационный стресс 10 мин 19,5 ± 0,8 98,4 ± 3,9 холодовой стресс 10 мин 16,1 ± 0,9? 80,9 ± 5,3?
