Изучение генетического разнообразия диплостом (Trematoda: Diplostomidae) – паразитов рыб и птиц - Дипломная работа

Среди паразитических организмов одну из наиболее многочисленных групп составляют плоские черви - трематоды, или сосальщики (Trematoda), объединяющие более 18000 видов паразитов беспозвоночных и позвоночных животных [34]. Полиморфные ДНК-маркеры пригодны для видовой идентификации червей на всех стадиях сложного жизненного цикла, для изучения путей трансмиссии паразита, особенно при сравнении популяций из географически удаленных и/или разобщенных частей ареала. Относительно недавно эти гены использованы для дифференциации видов и линий рода Diplostomum, обнаруженных в Северной Америке, Китае [9], Центральной и Северной Европе [7, 8, 10]. Определить полные первичные последовательности ITS-кластера рДНК и баркодовые последовательности митохондриального гена cox1 изучаемых диплостомид. 2. Схема жизненного цикла диплостомид Мариты - половозрелые гермафродитные особи, паразитируют в кишечнике дефинитивного хозяина, продуцируя яйца, которые выделяются во внешнюю среду с экскрементами хозяина. В воде происходит эмбриональное развитие и формирование первой личиночной стадии - мирацидия. Мирацидий ведет свободный образ жизни, плавая в воде, она находит и проникает в первого промежуточного хозяина - пресноводного моллюска. Размножаясь партеногенетически, материнская спороциста дает начало особям следующего партеногенетического поколения - дочерним спороцистам, которые активно растут и размножаются, заполняя всю «печень» моллюска. Церкарии - вторая свободноживущая стадия развития трематод рода Diplostomum. Метацеркарии в теле рыб могут сохраняться длительное время - 2-3 года. Половозрелые мариты поселяются в тонком кишечнике, причем одни виды (D. volvens, D. chromatophorum) предпочитают дуоденум и переднюю половину этого отдела, другие (D. indistinctum) - его центральную часть (вторую и третью четверти), третьи - заднюю половину (D. spathaceum), а D. pseudomergi поселяется в слепых отростках. В дочерних спороцистах, развиваются церкарии, которые, достигнув зрелого состояния, выходят из неё, совершают миграцию по тканям хозяина и, наконец, покидают его. Церкария. А.А. Шигин (1996) обозначает глаз как местообитание паразитов термином «гостальный биотоп», выделяя в нем шесть эндостаций (микрониши); диплостомиды занимают четыре из них - хрусталик, жидкие среды, внутренние оболочки, стекловидное тело глаза. Сложности идентификации и видовой классификации церкарий и метацеркарий являются серьезными препятствием для оценки разнообразия видов диплостом, фактической роли в популяциях рыб, а также для экологического мониторинга, для углубления знаний биологии паразита и эволюционных аспектов отношений паразит-хозяин изучаемого рода [8]. 1.2 Геномная вариабельность рДНК трематод В геноме трематод, как и у всех эукариот, имеется кластер рибосомной ДНК (рДНК), представляющий собой многократно тандемно повторенные транскрипционные единицы (опероны), которые разделяются межгенными спейсерами (NTS).