Основные функции крови, ее получение и подготовка к исследованию. Стабилизация крови, получение плазмы. Исследование физических и химических свойств крови. Подсчет форменных элементов крови у животных и птиц. Техника выведения лейкоцитарной формулы.
Кровь - это жидкая ткань, циркулирующая в кровеносной системе позвоночных животных и человека. Состоит из плазмы и форменных элементов (эритроциты, лейкоциты, тромбоциты и др.). Кровь характеризуется относительным постоянством химического состава, осмотического давления и активной реакции (PH). Функции крови многочисленные и многообразны: 1) транспортная функция обеспечивает циркуляцию крови по сосудам, кровь переносит множество соединений - среди них газы, питательные вещества; 7) функция обеспечения водно-солевого обмена между кровью и тканями (в артериальной части капилляров жидкость и соли поступают в ткани, а в венозной части капилляра возвращаются в кровь);Кровь рекомендуется брать лучше утром в одни и те же часы (до кормления и водопоя), после отдыха и успокоения животного.Для предупреждения свертывания крови используют один из следующих антикоагулянтов (на 10 мл крови): щавелевокислый натрий (калий или аммоний) - 0,01-0,02 г: (оксалатная кровь); лимоннокислый натрий - 0,02 г (цитратная кровь); фтористый натрий - 0,01 г; гепарин - 1 капля раствора, содержащего в I мл 5000 ME гепарина (гепаринизированная кровь). Антикоагулянты вносят в пробирку, в которую затем собирают кровь; пробирку закрывают резиновой пробкой и тщательно смешивают содержимое 1-2 минуты.Стабилизированную кровь наливают в пробирку и центрифугируют 10 минут при 1,5-2,0 тыс. оборотов в минуту.Из физических свойств крови важное диагностическое значение имеет определение ее удельного веса, вязкости и скорости свертывания, а также реакции оседания эритроцитов.Удельный вес крови определяют по методу Гаммершлага (в смеси бензола с хлороформом) или по способу Филипса (в растворах медного купороса).Вязкость крови определяют вискозиметром Гесса или Детермана. Повышенная вязкость крови наблюдается при некоторых лихорадочных заболеваниях (плеврите, воспалении легких, перитоните), при сердечной недостаточности в период декомпенсации. Понижение вязкости встречается при первичных и вторичных анемиях, истощении. Вид животного Удельный вес ВязкостьНа край хорошо обезжиренного предметного стекла, поставленного под углом 50°, наносят каплю крови. Появление нитей фибрина на острие иглы указывает на начало свертывания крови.Реакцию оседания эритроцитов (РОЭ) нужно определять не позже двух часов после взятия крови.РОЭ определяют при помощи эритроседиометра, представляющего собой пробирку длиной 17 см и шириной 9 мм, с делениями от 0 до 100. В эритроседиометр вносят 0,02 г щавелевокислого натрия и наполняют кровью до отметки 100, закрывают резиновой пробкой и тщательно смешивают кровь с антикоагулянтом.Каждый капилляр градуирован от 0 до 100 делений, на уровне "0" (верхняя часть капилляра) нанесена метка "К" (кровь), а на уровне цифры "50" - метка "Р" (реактив). Для постановки реакции капилляр смачивают 5%-ным раствором лимоннокислого натрия, а затем насасывают этот же раствор до метки "Р" и выдувают на часовое стекло. После этого тем же капилляром 2 раза набирают кровь до метки "К", каждый раз выдувая кровь на часовое стекло.При исследовании химических свойств крови определяют: · количество гемоглобина Количество гемоглобина определяют в гемометре ГС-2, состоящем из колодки с тремя гнездами, градуированной пробирки, капиллярной и глазной пипеток. Затем этот раствор втягивают и выдувают обратно в пробирку несколько раз, чтобы смыть оставшуюся в пипетке кровь. В результате смешивания крови с соляной кислотой гемоглобин переходит в солянокислый гематин, раствор при этом приобретает коричневый цвет. Затем по каплям добавляют дистиллированную воду, постоянно помешивая до тех пор, пока цвет жидкости в пробирке не сравняется с цветом боковых стандартных пробирок.В центрифужную пробирку (лучше с остроконечным дном) берут 1 мл сыворотки крови, прибавляют 0,5 мл насыщенного раствора щавелевокислого аммония, тщательно смешивают, оставляют на 30 минут, после чего жидкость центрифугируют 15 минут при 1,5-2 тыс. оборотов в минуту. В пробирку берут вместо 1 мл сыворотки крови 1 мл дистиллированной воды, а все остальное производят таким же образом, как и в основном опыте. Подсчет количества кальция производят по формуле: х = 0,2-(а - б) *К*100, Где: х - искомое количество кальция в сыворотке крови (в мг%) а - количество миллилитров 0,01 н. раствора перманганата калия, израсходованного на титрование в основном опыте, б - количество миллилитров 0,01 н. раствора перманганата калия, израсходованного на титрование в "слепом" опыте. В пробирку вносят 1 мл сыворотки крови, добавляют 3 мл дистиллированной воды и 1 мл 20%-ного раствора трихлоруксусной кислоты, хорошо смешивают и, дав постоять 10 минут, фильтруют через бумажный фильтр или центрифугируют. В другую пробирку (стандарт) вливают 1 мл рабочего стандартного раствора фосфора, 1 мл дистиллированной воды, 0,5 мл 20%-ного раствора трихлоруксусной кислоты, 0,5 мл раствора молибдена, 1 мл 1 %-ного раствора аскорбиновой кислоты и до 6 мл дистиллированной вод
План
Содержание
Введение
1. Получение и подготовка крови к исследованию
1.1 Кровь
1.2 Стабилизация крови
1.3 Получение плазмы
2. Исследование физических свойств крови
2.1 Определение удельного веса крови
2.2 Определение вязкости крови
2.3 Определение скорости свертывания крови
2.4 Определение реакции оседания эритроцитов
2.4.1 Метод Неводова
2.4.2 Метод Панченкова
3. Исследование химических свойств крови
3.1 Определение количества гемоглобина (по Сали)
3.2 Определение билирубина в сыворотке крови (по Ван-ден-Бергу)
3.3 Определение резервной щелочности (по Неводову)
3.4 Определение общего белка в сыворотке крови
3.5 Определение каротина в сыворотке крови (по Ф.А. Рачевскому)
3.6 Определение кальция в сыворотке крови (по де-Ваарда)
3.7 Определение неорганического фосфора в сыворотке крови (по Аммону и ГИНССЕРГУ)
4. Подсчет форменных элементов крови у животных
4.1 Определение количества эритроцитов
4.2 Подсчет количества тромбоцитов (по Реес-Эккеру)
5. Подсчет форменных элементов крови у птиц
6. Определение лейкоцитарной формулы
6.1 Приготовление мазков крови
6.2 Фиксация мазков
6.3 Окраска мазков
6.4 Техника выведения лейкоцитарной формулы
7. Определение лейкоцитарного профиля
8. Определение качественных изменений клеток крови
Список используемой литературы
Введение
Кровь - это жидкая ткань, циркулирующая в кровеносной системе позвоночных животных и человека. Состоит из плазмы и форменных элементов (эритроциты, лейкоциты, тромбоциты и др.). Красный цвет крови придает гемоглобин, содержащийся в эритроцитах. Кровь характеризуется относительным постоянством химического состава, осмотического давления и активной реакции (PH).
Функции крови
Функции крови многочисленные и многообразны: 1) транспортная функция обеспечивает циркуляцию крови по сосудам, кровь переносит множество соединений - среди них газы, питательные вещества;
2) дыхательная функция обеспечивает связывание и перенос кислорода и углекислого газа;
3) трофическая (питательная) функция крови обеспечивает все клетки организма питательными веществами: глюкозой, аминокислотами, жирами, витаминами, минеральными, водой;
4) экскреторная функция обеспечивает перенос из тканей конечные продукты метаболизма: мочевину, мочевую кислоту и другие вещества, в органы выделения;.
5) терморегуляторная функция осуществляет охлаждение внутренних органов и переносит тепло к органам теплоотдачи;
6) поддержание постоянства внутренней среды (кровь поддерживает стабильность ряда констант организма);
7) функция обеспечения водно-солевого обмена между кровью и тканями (в артериальной части капилляров жидкость и соли поступают в ткани, а в венозной части капилляра возвращаются в кровь);
8) защитная функция осуществляет иммунитет, или защиту организма от живых тел и генетически чуждых веществ;
9) функция гуморальной регуляции обеспечивает химическое взаимодействие между всеми частями организма (кровь переносит гормоны и другие физиологически активные вещества).
Кровь состоит из жидкой части - плазмы и взвешенных в ней клеток (форменных элементов): эритроцитов (красных кровяных телец), лейкоцитов (белых кровяных телец) и тромбоцитов (кровяных пластинок). Между плазмой и форменными элементами крови существуют определенные объемные соотношения. Установлено, что на долю форменных элементов приходится 40-45%, крови, а на долю плазмы - 55-60%.
Вы можете ЗАГРУЗИТЬ и ПОВЫСИТЬ уникальность своей работы