Метод ионообменной хроматографии, его использование для разделения ионов и полярных молекул на основе их заряда. Типичная установка ионообменной жидкостной хроматографии для очистки белков. Функциональные группы, используемые в ионообменных матрицах.
ХИМ-41БО 2016 Ионообменная хроматография (ИОХ)Ионообменная хроматография (ИОХ) представляет собой метод , позволяющий разделять ионы и полярные молекулы на основе их заряда. При выборе вида ионообменной хроматографии руководствуются изоэлектрической точкой белка PI (если она известна), при значении РН выше PI белок приобретает отрицательный заряд , если ниже то положительный.Схема ионного ХРОМАТОГРАФАБЕЛКИ имеют многочисленные функциональные группы, которые могут иметь как положительные, так и отрицательные заряды. При понижении РН, белок будет приобретать растущий положительный заряд и, в конце концов, также будет элюирован , что даст пик УФ поглощения на хроматограмме .Типичная хроматограмма ионообменного РАЗДЕЛЕНИЯВЫБОР ионообменника В большинстве случаев рекомендуется начинать очистку с использования сильного ионообменника, позволяющего работать в широком диапазоне РН. После загрузки образца насос создает солевой градиент для элюции образца.* катиониты, способные к катионному обмену; * аниониты способные к анионному обмену; *ионообменные вещества, обладающие амфотерными свойствами, т. е. способные и к анионному, и к катионному обмену.Ионообменная хроматография Весьма эффективный метод определения любых ионов. Функциональные ГРУППЫОТ работы с сильными ионитами есть несколько преимуществ : ? Механизм взаимодействия прост, поскольку нет промежуточных форм взаимодействия зарядов ? Способность к связыванию поддерживается и при высоком и при низком РН ? Легкая разработка и оптимизация протокола очистки Большинство белков имеют изоэлектрические точки в пределах от 5,5 до 7,5 и могут быть разделены на любом из слабых или сильных ионообменников.
Вы можете ЗАГРУЗИТЬ и ПОВЫСИТЬ уникальность своей работы
