Понятие группы крови, особенности науки о ней (одного из разделов общей иммунологии). Понятие о подгруппах крови. Методика определения групп крови с помощью циклонов. Контроль неспецифической агглютинации эритроцитов. Понятие резус-фактора, его открытие.
Группы крови - нормальные иммуногенетические признаки крови, позволяющие объединять людей в определенные группы по сходству антигенов (изоантигенов) их крови, которые содержатся в эритроцитах, лейкоцитах, тромбоцитах и белках плазмы крови. Группы крови имеют первостепенное значение в практике переливания крови, а также трансплантации органов. Вскоре (1902) после этого Декателло и Штурм нашли людей, эритроциты и сыворотки которых отличались от эритроцитов и сывороток упомянутых трех групп. группа крови будет соответствовать 0(1) группе; эритроциты других содержат только агглютиноген А, - группа крови - А(11); эритроциты третьих содержат агглютиноген В - группа крови - В(Ш); эритроциты четвертых содержат агглютнногены А и В - группа крови будет соответствовать AB(1V). В зависимое™ от наличия или отсутствия в эритроцитах групповых агглютиногенов А и В в плазме находятся нормальные (естественные) антитела-гемагглютинины по отношению к этим агглютиногенам У лиц группы крови 0(1) содержатся два типа групповых антител: Анти-А (а) и Анти-В ((в); у лиц группы крови А(П) - изоантитело Анти-В (в), у лиц группы крови В(Ш) изоантитело Анти-А (а) и у лиц группы крови АВ (IV) - оба гемагглютинина отсутствуют.Агглютинации нет ни с одним из цоликлонов - кровь принадлежит к группе 0(1) - эритроциты не содержат антигенов (агглютиногенов) А и В. но есть агглютинины а и в. Агглютинация только в капле с цоликлоном анти-А, кровь принадлежит к группе А(П). т.е. в эритроцитах есть антиген А, Агглютинация есть только в капле с цоликлоном анти-В, кровь принадлежит к группе В(Ш). то есть в эритроцитах есть антиген В. Агглютинация есть в обеих каплях - кровь принадлежит к группе АВ (IV), исследуемые эритроциты содержат оба антигена (агглютиногена) А и В. При наличии агглютинации рекомендуется повторить определение группы крови, используя отмытые эритроциты этой крови. Название "резус-фактор" система антигенов получила в связи с тем, что ее антиген был обнаружен у человека с помощью сыворотки кролика, иммунизированного эритроцитами обезьяны вида Macacus-rhesus Резус-фактор в наибольшей степени выражен в эритроцитах, меньше его в лейкоцитах и тромбоцитах, в плазме крови не обнаружен.Цоликлон анти-А, цоликлон анти-В, исследуемая кровь, чашка Петри (тарелка, планшет); гашетки, стеклянные палочки. Чашку Петри (тарелку, планшет) делят линией пополам, наносят надписи: в одной половине "А", в другой "В". Под соответствующей надписью наносят Цоликлоны по одной большой капли (0,1 мл), а рядом - исследуемую кровь объемом в 10 раз меньше капли цоликлона. Наблюдают за реакцией при покачивании чашки в течении чашки в течении 2,5 мин., после этого определяют результаты реакции: 1) положительная - наступила реакция агглютинации эритроцитов: 2) отрицательная - агглютинации эригроцитов нет, капля остается равномерно окрашенной (агрегатов, хлопьев, одного большого агглютината нет).Набор качественной универсальной антирезуснои сыворотки (Д), пипеток, пробирок, 0,9% р-р хлорида натрия, исследуемой крови. На дно сухой чистой пробирки пипеткой вносят 1 каплю антнрезусной сыворотки , добавляют одну каплю исследуемой цельной крови или эритроцитарной массы. Пробирку встряхивают и несколько раз переворачивают для того, чтобы содержимое растекалось но стенкам, что ускоряет реакцию. Реакция (агглютинация) наступает обычно в течение 1 мин, но наблюдение следует проводить не менее 3 мин.
Вывод
Агглютинации нет ни с одним из цоликлонов - кровь принадлежит к группе 0(1) - эритроциты не содержат антигенов (агглютиногенов) А и В. но есть агглютинины а и в.
Агглютинация только в капле с цоликлоном анти-А, кровь принадлежит к группе А(П). т.е. в эритроцитах есть антиген А, Агглютинация есть только в капле с цоликлоном анти-В, кровь принадлежит к группе В(Ш). то есть в эритроцитах есть антиген В.
Агглютинация есть в обеих каплях - кровь принадлежит к группе АВ (IV), исследуемые эритроциты содержат оба антигена (агглютиногена) А и В.
Оценка результатов агглютинации
Реакция исследуемых эритроцитов с цоликлоном Группа крови
Анти-А Анти-В
- - 0(1)
- А(П)
- В(Ш)
AB(IV)
Контроль неспецифической агглютинации эритроцитов
Цоликлоны приготовлены на растворе хлорида натрия, который препятствует спонтанной агглютинации эритроцитов. Однако иногда возможна ауто-агглютинация эритроцитов ( у некоторых больных миеломной и ожоговой болезнью, в пуповинной крови новорожденных, при AB(TV) группе крови), для исключения ее необходимо провести дополнительное контрольное исследование с изотоническим раствором хлорида натрия. Для этого смешивают одну большую каплю (0,1 мл) хлорида натрия с маленькой (0,01 мл) каплей крови. При отсутствии агглютинации в этой капле кровь принадлежит к группе АВ (IV). При наличии агглютинации рекомендуется повторить определение группы крови, используя отмытые эритроциты этой крови.
Понятие о резус-факторе. История его открытия
Группы крови системы Rh (Rhesus) занимают 2-е место по значению для медицинской практики. Это одна из самых сложных систем изоантигенной дифференцировки организма человека. Помимо 6 основных антигенов (Д, С, Е, д, с, е), в эту систему входят многочисленные варианты.
Резус-фактор - система антигенов крови человека независимая от факторов, обусловливающих группы крови (системы АВО) и других генетических маркеров. Резус-фактор человека был открыт в 1940 г. К. Ландштейнером и А.Винером. Название "резус-фактор" система антигенов получила в связи с тем, что ее антиген был обнаружен у человека с помощью сыворотки кролика, иммунизированного эритроцитами обезьяны вида Macacus-rhesus Резус-фактор в наибольшей степени выражен в эритроцитах, меньше его в лейкоцитах и тромбоцитах, в плазме крови не обнаружен. Насчитывается шесть основных резус-факторов, для обозначения их используют две номенклатура. Согласно первой - антигены резус-фактора обозначают символами Rh0, rh1, rh2, Hr0, hr1 , hr2; согласно второй - используются буквенные обозначения: Д, С, Е. д. с, е. Вообще вариантов антигенов резус-фактора насчитывают до 35. Антиген Rh (Д) - основной антиген в Rh-факторе, имеющий наибольшее практическое значение. Он содержится в эритроцитах 85% людей. На основании наличия в эритроцитах Rh (Д) выделят Rh-положительную кровь. Кровь людей, в эритроцитах которых нет этого антигена, относится к Rh-отрицательному типу. Их эритроциты не должны содержать ни одного из трех ангигенов - Rho (Д), Rh1 (с), Rh2 (е). Антиген (Д) распространен неравномерно среди представителей отдельных рас. Основные шесть антигенов могут встречаться в различных комбинациях. Самыми важными из них являются три антигена Rh-фактора: Rho (Д), Rh1 (с), Rh2 (e), обладающие наибольшей антигенной активностью. Антиген Rh (Д) обладает более выраженным иммунизаторным свойством, чем две другие его разновидности. С ним связано и большинство посттрансфузионных осложнений, обусловленных трансфузионной несовместимостью. В практике обычно ограничиваются определением у реципиента только антигена Rho (Д). Это связано с тем, что два других антигена присутствуют в эритроцитах в отдельности очень редко.
Существует несколько методов определения Rh-фактора крови как у реципиентов, так и у доноров. В настоящее время для этого используют антирезусную сыворотку (Д).
Определение Rh фактора экспресс-методом в пробирке без подогрева. Rh-фактор может быть определен в свежей крови, консервированной крови, а также в эритроцитах после сформирования сгустка и отстаивания сыворотки.
Техника определения: на дно пробирки вносят одну каплю антирезусной универсальной сыворотки, добавляют одну каплю исследуемой крови или эритроцитов. Пробирку встряхивают и несколько раз переворачивают, чтобы содержимое растеклось по стенкам, что ускоряет реакцию. Агглютинация наступает обычно в течение минуты, но наблюдение следует проводить не менее 3 минут. Для исключения неспецифической агрегации эритроцитов в пробирку добавляют 2-3 мл физиологического р-ра и перемешивают путем 1-2 кратного перевертывания пробирки, но не взбалтывают!
Результаты оценивают визуально: 1. Наличие агглютинации указывает на Rh-положительную кровь.
2. Отсутствие агглютинации свидетельствует о Rh-отрицательной принадлежности крови.
Rh-фактор может быть определен также и анти-Dig М моноклональным реагентом (эритротест ТМ-Цоликлон анти-Дсупер) - диагностические моноклональные антитела для определения Rh-фактора в крови человека.
Техника определения: на чашку Петри или пластинку со смачиваемой поверхностью наносится большая капля (около 0,1 мл) реагента. Рядом помещается маленькая капля (0,01-0*05 мл) исследуемой крови и смешивается с реагентом. Пластинка после смешивания реагента с кровью покачивается не сразу, а через 30-60 с, что позволяет развиться более полной крупнолепестковой агглютинации. Наиболее крупная четкая агглютинация наблюдается при наличии в крови эритроцитов в высокой концентрации. Реакция агглютинации начинается через 10-15 с, четко выраженная агглютинация наступает через 30-60 с. При применении подогретой до 37-40 С чашки Петри или пластинки время наступления агглютинации сокращается. Окончательный результат учитывается через 3 мин визуально: 1. Наличие агглютинации указывает на Rh-положительную кровь.
2. Отсутствие агглютинации свидетельствует о Rh-отрицательной принадлежности крови.
Примечания: Реагент хранится при температуре 2 - 8 С, сыворотка хранится при температуре 5 - 8 С, хорошо укупоренная.
СИТУАЦИОННЫЕ ЗАДАЧИ
1. В клинику поступил больной с ожоговой болезнью, имеющего AB(IV) группу крови. Проведите дополнительное контрольное исследование с целью исключения аутоагглютинации эритроцитов больного, ведущего к неправильному определению группы крови.
2. Исключите неспецифическую агрегацию эритроцитов при определении резус-фактора экспресс-методом в пробирке без подогрева.
ПРОГРАММИРОВАННЫЙ КОНТРОЛЬ
1 Групповые агглютиногены крови находятся: а) в плазме крови: б) в сыворотке; в) в лейкоцитах: г) в эритроцитах: д) в тромбоцитах.
2. Агглютинины (антитела) содержатся: а) в сыворотке, б) в плазме крови, в) в лейкоцитах, г) в эритроцитах, д) в тромбоцитах.
4. Определение групп крови возможно в крови: а) нативной; б) стабилизированной; в) взятой из пальца; г) без консерванта; д) взятой из раны во время операции.
5. Для определения группы крови используют: а) стандартные сыворотки; б) стандартные эритроциты; в) цоликлон анти-А; г) цоликлон анти-В; д) плазму.
6. Оптимальная температура окружающей среды при определении группы крови: а) 10°С; б) 15°С; в) 20°С; г) 25°С; д) 30°С.
7. Оптимальная температура хранения растворенных цоликлонов: а) 2°С; б) 5°С; в) 8°С; г) 10°С; д) 15°С.
8. Объемные отношения крови и цоликлона при определении группы крови: а) 1:5; б) 1:10; в) 1:15; г) 1:20; д) 1:25.
9. Длительность наблюдения за реакцией агглютинации при определении группы крови: а) 1 мин; б) 2,5 мин; в) 3 мин; г) 4,0 мин; д) 5 мин.
10.Оценка результатов реакции агглютинации эритроцитов: а) агглютинации нет с анти-А и анти-В Цоликлонами - группа крови 0(1); б) агглютинация с цоликлоном анти-А, отсутствует агглютинация с цоликлоном анти-В - группа крови В(Ш); в) агглютинация с цоликлоном анти-В, отсутствие с цоликлоном анти-А - группа крови В(Ш); г) агглютинация с обоими Цоликлонами - группа крови 0(1); д) отсутствие агглютинации с цоликлоном анти-А. агглютинация с цоликлоном анти-В - группа крови А(И).
11 Количество основных антигенов резус-фактора: а) 2; б) 3; в) 4; г) 5; д) 6.
13.Основной антиген резус-фактора, имеющий наибольшее практическое значение: а) Д; б) С; в) Е; г) д; д) с.
14.Число людей в процентах, содержащих в эритроцитах основной антиген резус-фактора (Д): а) 40; б) 50; в) 60; г) 70; д) 85.
15.Резус-фактор определяется антирезусной сывороткой: а) I группы; б) II группы, в) Ш группы; г) IV группы: д) универсальной (Д).
16.В какой крови возможно определение резус-фактора: а) в свежей крови; б) консервированной, в) свертке-сгустке крови, г) взятой с операционного белья, д) взятой с предметов (пол. стекло и тд.)
17.Длительность наблюдения за реакцией агглютинации при определении резус-фактора: а) 1 мин; б) 2 мин; в) 3 мин; г) 4 мин; д) 5 мин.
18.Оптимальная температура хранения универсальной антирезусной сыворотки (Д) : а) 2°С; б) 5°С; в) 7°С; г) 8°С; д) 10°С.
Вы можете ЗАГРУЗИТЬ и ПОВЫСИТЬ уникальность своей работы
