Групи крові як маркери активності антитіло продукції в організмі донорів, імунізованих стафілококовим анатоксином - Автореферат

Потреби практичної медицини в забезпеченні імунними препаратами крові високої специфічності і у великих обємах постійно зростають, а заготівля крові на 1 жителя України становить 9 мл., що за даними ВООЗ, недостатньо, оскільки потрібно від 12 до 15 мл. крові на рік. І найбільш серйозний феномен - зникнення протистафілококових антитіл після імунізації - спостерігається у 7-8% донорів (Шумега І.С., 1999). Практична розробка моделі вивчення подібності антигенної структури мікроорганізмів до речовини груп крові створює можливості раціонального підходу до залучення для імунізації та скринінгу активних донорів імунної плазми будь-якої специфічної спрямованості. За матеріалами дисертації оформлено інформаційний лист та нововведення "Метод визначення груп крові за системою АВО(Н) в слині при гематологічній патології", яке ввійшло до Реєстру галузевих нововведень МОЗ України за 1998 р. і впроваджено в практичну діяльність лабораторії імунологічного типування Інституту гематології та трансфузіології АМН України і міської клінічної лікарні №9, дитячої клінічної лікарні "Охмадит" та ввійшло в програму-мінімум для складання кандидатського іспиту за фахом "Гематологія та трансфузіологія" 14.01.31 (біологія). Автором особисто розроблено методику забору матеріалу для визначенння секреторства антигенів АВН в слину, проведено лабораторні дослідження (встановлення АВО-фенотипу, статусу секреторства за допомогою лектинів та ізогемаглютинуючих сироваток, визначення вмісту анти-?-стафілолізину, ізогемаглютинінів, імуноглобулінів, імунних комплексів), а також вперше застосовано метод визначення груп крові за системою АВО(Н) в слині при гематологічній патології; аналіз і статистичну обробку цифрових матеріалів.Серед активних донорів з високим вмістом антистафілококових антитіл в межах (5-9)·103 МО/л 56,25% осіб мають групу крові Ав(ІІ), 37,5% - групу крові АВО(IV), 35,71% групу крові Обв(І), 30,3% - групу Вб(ІІІ), що свідчить про асоціативний звязок активного антитілоутворення з речовиною А груп крові ізосерологічної системи АВО(Н). На моделі реакції ізогемаглютинації та реакції абсорбції встановлено здатність ?-ізогемаглютинінів сироватки крові поєднуватись не тільки з відповідним А-антигеном еритроцитів, але й з антигенними субстанціями стафілокока, що вказує на подібність останнього до речовини А і пояснює вищий рівень антистафілококових антитіл у імунізованих донорів з групою крові Ав(ІІ). Виділення групових субстанцій АВН в слину, яке визначає групу крові Se-se, створює в організмі секреторів їх подвійну концентрацію і в разі належності донора до групи крові Ав(ІІ) підсилює продукцію антистафілококових антитіл, в результаті чого імунізовані донори з гаплотипом ASE мають на 30,65% вищий вміст анти-?-стафілолізину, ніж донори-несекретори з гаплотипом Ase. Імунізація стафілококовим анатоксином викликає в організмі 96,0% донорів достовірне підвищення вмісту антистафілококових антитіл з паралельним зростанням концентрації IGM, IGA, IGG, серед яких рівень IGG, що визначає перспективність препаратів крові, зростає на 15,83%. Маркерами активної антитілопродукції при імунізації донорів стафілококовим анатоксином є група крові Ab(ІІ), Se у осіб з невеликою густиною стафілококового носійства, що можна вважати критеріями вибору донорського контингенту для отримання плазми з високим вмістом антистафілококових антитіл.

1. Відбір за імуногенетичними критеріями активних донорів імунної плазми, як джерела алогенного антистафілококового імуноглобуліну, розширює обєми препаратів крові для клінічного застосування і цим сприяє подальшому розвитку актуальної проблеми імунного донорства.

2. Серед активних донорів з високим вмістом антистафілококових антитіл в межах (5-9)·103 МО/л 56,25% осіб мають групу крові Ав(ІІ), 37,5% - групу крові АВО(IV), 35,71% групу крові Обв(І), 30,3% - групу Вб(ІІІ), що свідчить про асоціативний звязок активного антитілоутворення з речовиною А груп крові ізосерологічної системи АВО(Н).

3. На моделі реакції ізогемаглютинації та реакції абсорбції встановлено здатність ?-ізогемаглютинінів сироватки крові поєднуватись не тільки з відповідним А-антигеном еритроцитів, але й з антигенними субстанціями стафілокока, що вказує на подібність останнього до речовини А і пояснює вищий рівень антистафілококових антитіл у імунізованих донорів з групою крові Ав(ІІ).

4. Виділення групових субстанцій АВН в слину, яке визначає групу крові Se-se, створює в організмі секреторів їх подвійну концентрацію і в разі належності донора до групи крові Ав(ІІ) підсилює продукцію антистафілококових антитіл, в результаті чого імунізовані донори з гаплотипом ASE мають на 30,65% вищий вміст анти-?-стафілолізину, ніж донори-несекретори з гаплотипом Ase.

5. Імунізація стафілококовим анатоксином викликає в організмі 96,0% донорів достовірне підвищення вмісту антистафілококових антитіл з паралельним зростанням концентрації IGM, IGA, IGG, серед яких рівень IGG, що визначає перспективність препаратів крові, зростає на 15,83%.

6. Серед імунізованих донорів спостерігається достовірне збільшення частки осіб з максимальним (6-8) log2 титром б-?зогемаглютинінів у порівнянні з інтактними донорами, що свідчить про загальну, а не тільки специфічну активацію антитілопродукції під впливом імунізації стафілококовим анатоксином.

7. Серед імунізованих донорів з групою крові Вб(ІІІ) найменша частка бактеріоносіїв з густиною обсіменіння стафілококів і103і104 КУО, що свідчить про участь ?-ізогемаглютинінів в елімінації стафілококів і в збереженні гомеостазу.

8. Маркерами активної антитілопродукції при імунізації донорів стафілококовим анатоксином є група крові Ab(ІІ), Se у осіб з невеликою густиною стафілококового носійства, що можна вважати критеріями вибору донорського контингенту для отримання плазми з високим вмістом антистафілококових антитіл.

9. Встановлена позитивна кореляція вмісту IGA, IGM, IGG (RS = 0,84-0,96-0,94) та ЦІК (r=0,62) в слині та сироватці крові імунізованих та інтактних осіб створює можливості моніторингу в слинному секреті, що виключає необхідність венепункції як у донорів, так і у гематологічних хворих.

10. Регуляція продукції антистафілококових антитіл в імунізованому організмі здійснюється за участю всіх складових елементів АВО(Н) системи - як антигенів у фіксованій на еритроцитах та розчинній в біологічних секретах формі, так і за участю природних антитіл - ізогемаглютинінів.

Практичні рекомендації

1. Сироватка крові, отримана від донорів, імунізованих стафілококовим анатоксином, має підвищений титр б ? в ?зогемаглютинінів, і використання її розширює джерела реагентів для лабораторної ідентифікації груп крові ізосерологічної системи АВО(Н).

2. Визначення груп крові АВО(Н) і Se (секреторства) за слиною дає змогу запровадити в практику застосування неінвазивних, нешкідливих для організму і необмежених кількісно методів діагностики і контролю стану пацієнтів. Дослідження системи секреторства Se-se варто використовувати для визначення групової належності за системою АВО в тих випадках, коли спостерігається втрата еритроцитарних антигенів, що не дозволяє встановити групову належність загальноприйнятими методами за еритроцитами у хворих з гематологічною патологією (при деяких злоякісних новоутвореннях, в тому числі при лейкемії).

3. Вміст сироваткових імуноглобулінів A, M, G та ЦІК у сироватці крові корелює із вмістом їх в слинному секреті людини, що створює можливість проводити імуномоніторинг за слиною у тих випадках, коли є показання до обмеження венепункцій, наприклад, у хворих на гемофілію та порушення гемостазу.

1. Дизик Г.М., Шумега І.С., Тарасенко А.О., Патока В.В. Стан антитілоутворення у крові донорів, імунізованих стафілококовим анатоксином // Лік. справа. - 1998. - №1. - С. 109-112.

Дисертантом проведено порівняльний аналіз даних про рівень анти-?-стафілолізину в організмі імунізованих донорів з різними групами крові на протязі до- і післячорнобильського періоду.

2. Патока В.В., Тарасенко А.О., Шумега І.С. Динаміка змін вмісту природних аглютинінів у імунізованих донорів плазми як відображення специфічності імунної реакції //Гематологія і переливання крові. - Вип. 29.- К.: Нора-прінт, 1998. - С. 108-113.

Дисертантом вивчено ефект неспецифічного реагування у імунізованих донорів: зростання неспецифічних антитіл - природних ізогемаглютинінів поряд із зростанням специфічних - анти-?-стафілолізину.

3. Дизик Г.М., Лавровська Л.Н., Тарасенко А.О., Патока В.В. Лектини - альтернативні реагенти в лабораторній практиці імунологічного типування тканин // Гематологія і переливання крові. - Вип. 29. - К.: Нора-прінт, 1998. - С. 237-241.

Дисертантом вивчена можливість застосування лектинів для встановлення статусу секреторства (Se-se) в ізосерологічних дослідженнях.

4. Группы крови АВО и продолжительность жизни / Г.М. Дизик, И.И. Дмитриева, Л.Н. Лавровская, Л.В. Назарчук, И.И. Незгода, В.В. Патока, И.С. Шумега // Пробл. старения и долголетия. - 1999. - Т. 8, №2. - С. 113-115. Дисертантом вивчена частота АВО-фено-генотипів донорів різного віку.

5. Патока В.В. Біологічне значення генетично детермінованої групи крові Se-se людини та її вплив на процес антитілоутворення у донорів, імунізованих стафілококовим анатоксином // Фізіол. журн. - 1999. - Т. 45, №5. - С. 76-79.

6. Перехрестенко А.П., Патока В.В. Порівняльна характеристика вмісту IGA, IGM, IGG в крові хворих на псоріаз з прогресуючим перебігом і імунних донорів // Журн. дерматологии и венерологии. - 2000. - №1, (9). - С. 24-26. Дисертантом проведено визначення вмісту сироваткових імуноглобулінів та циркулюючих імунних комплексів.

7. Патока В.В. Фактори крові як маркери індивідуальної реакції організму на введення стафілококового анатоксину // Зб. наук. праць спів. КМАПО ім. П.Л. Шупика. - 2001. - Вип. 10, кн. 1. - С. 967-972.

8. Патока В.В. Визначення імуногенетичних факторів людини у слинному секреті // Гематологія і переливання крові. - 2001. - Вип. 30. - С. 171.

9. Метод визначення груп крові за системою АВО(Н) в слині при гематологічній патології / Г.М. Дизик, В.В.Патока, А.О.Тарасенко // Реєстр галузевих нововведень МОЗ України. - 1998. - Вип. 8/9. - №146. - С. 84-85. Дисертантом запропоновано проводити методику визначення групової належності за системою АВО(Н) у хворих з гематологічною патологією в слинному секреті (в тих випадках, коли це неможливо за еритроцитами).

10. Патока В.В. Специфічні і неспецифічні ефекти антитілоутворення як результат імунізації бактеріальними антигенами // 1 Міжнародний медичний конгрес студентів і молодих вчених: Тез. доп. - Тернопіль, 1997. - С. 348.

11. Патока В.В. Залежність титру антистафілококових антитіл у імунізованих донорів плазми від виділительства антигенів АВО в слину // Наук.-прак. кон. молодих вчених та фахівців "Сучасні проблеми гематології та трансфузіології": Тез. доп. - К.: Нора- прінт, 1998. - С. 48.

12. Немировская Л.Н., Патока В.В. Метод оценки специфического иммунитета доноров плазмы в альтернативном объекте // 2-я Российская науч.-прак.конф. "Гематология и трансфузиология на пороге ХХІ века": Тез. докл., 6-8 июня 2000 г., Санкт-Петербург. - 2000. - С. 231. Дисертантом досліджено вміст сироваткових імуноглобулінів в сироватці крові і паралельно - слинному секреті.

13. Перехрестенко Т.П, Патока В.В., Завтур І.С. Використання слини в якості обєкта імуногенетичних досліджень у гематологічних хворих // 4-й Міжнародний медичний конгрес студентів і молодих вчених, Тернопіль, 11-12 травня 2000. - Тернопіль: Укрмедкнига, 2000. - С. 135-136. Дисертантом проведено і проаналізовано можливість використання слинного секрету для імуногенетичних досліджень (групи крові АВО, рівень імуноглобулінів, вміст ЦІК).

14. Disik G.M., Patoka V.V., Savtur I.S., Khodakovsky A. The Estimation of the Haemocomponent Immunotherapia Effect on the Level of Ig in Saliva // International Sosiety of Blood Transfusion (ISBT), 26 th Congress, Viena (Austria), July 9-14, 2000. - P. 2146. Дисертантом проведено визначення рівня сироваткових імуноглобулінів основних ізотипів IGA, Ig M, IGG в слинному секреті.

15. Патока В.В. Вплив групоспецифічних факторів крові системи АВО(Н) на тривалість життя людини та їх звязок з хворобами // ІІ Українська конференція молодих вчених присвячена памяті академіка Володимира Веніаміновича Фролькіса, 13 квітня 2001 р.: Мат. конф. - К.: Ін-т геролонтології АМНУ. - 2001. - С. 87-88.

16. Дизик Г.М., Патока В.В., Тарасенко А.О. Метод визначення груп крові за системою АВО(Н) в слині при гематологічній патології // Інформаційний лист. - №121. - 97. - 3 с. Дисертантом запропоновано проводити методику визначення групової належності за системою АВО(Н) у хворих з гематологічною патологією (наприклад, при гемобластозах) за слиною, в тих випадкох коли це не вдається загальноприйнятими методами за еритроцитами.