Гематологическая характеристика линя из узв и окуня оз. Виштынецкого - Магистерская работа

ЛИНЬ, ОКУНЬ, САМКИ, САМЦЫ, КРОВЬ, ГЕМАТОЛОГИЯ, ОБЩИЙ БЕЛОК, ГЕМОГЛОБИН, ЭРИТРОЦИТЫ, ЛЕЙКОЦИТАРНАЯ ФОРМУЛА, ЦИТОМЕТРИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ ЭРИТРОЦИТОВ, ВИШТЫНЕЦКОЕ ОЗЕРО. Цель работы - изучить гематологические параметры линя, выращенного в искусственных условиях установки с замкнутым водоснабжением и окуня оз. В результате исследований установлено, что у двухгодовалых линей повышена доля эозинофилов в крови, что указывает на возможное проявление аллергической реакции. Виштынецкого, свидетельствует о нормальном физиологическом состоянии окуня и, следовательно, отражает благоприятные экологические условия в оз. The objects of the research is a blood of a tench, raised in unnatural (artificial) conditions of the plant with an self-contained water supply and a blood of perch of Vishtenets in Kaliningrad region.1) определить длину, массу, индекс почки, печени и селезенки, лейкоцитарную формулу двухгодовалых линей, выращенных в УЗВ; 2) определить концентрацию гемоглобина, эритроцитов, лейкоцитов, общего белка в сыворотке крови, среднее содержание гемоглобина в эритроците, лейкоцитарную формулу производителей линя, выращенных в УЗВ; 3) определить цитометрические параметры эритроцитов производителей линя, выращенных в УЗВ; 4) определить концентрацию гемоглобина, эритроцитов, лейкоцитов, количество общего белка в сыворотке крови, среднее содержание гемоглобина в эритроците, лейкоцитарную формулу окуня оз. 5) определить цитометрические параметры эритроцитов окуня оз.Между созревающими самками и самцами линя не выявлено достоверных различий в лейкоцитарной формуле, что говорит о единообразии клеточного состава белой крови внутри вида среди одновозрастных рыб, выращенных в одинаковых условиях и отражает отсутствие полового диморфизма по этому показателю у линя в этот период онтогенеза. В сыворотке крови самок линя в сравнении с самцами достоверно больше концентрация общего белка, что связано с особенностями белкового метаболизма у самок в период роста ооцитов. Более низкая концентрации гемоглобина, СГЭ и более высокая концентрация эритроцитов в крови самцов из УЗВ в сравнении с самцами р.Неманин говорит о преобладании незрелых эритроцитов в крови окуня из УЗВ, т.е. об активации эритропоэза, что отражает менее благоприятные условиях для самцов, выращиваемых в УЗВ. Более высокая температура воды в рыбоводных емкостях УЗВ приводит к уменьшению СГЭ, доли малых лимфоцитов и общего числа лимфоцитов; способствует увеличению концентрации лейкоцитов, общего белка в сыворотке крови, доли нейтрофильных метамиелоцитов и больших лимфоцитов. Впервые установлен гематологический статус окуня оз.Виштынецкого по концентрации гемоглобина, эритроцитов, лейкоцитов, общего белка в сыворотке крови, среднему содержание гемоглобина в эритроците, отношению эритроцитов к лейкоцитам, лейкоцитарной формуле крови, цитометрическим параметрам эритроцитов.

4. Содержание расчетно-пояснительной записки (перечень подлежащих разработке вопросов):

1. Выявлен высокий процент псевдоэозинофилов в крови двухгодовалых линей, выращиваемых в условиях УЗВ, что, вероятно, связано со специфическими условиями выращивания в УЗВ.

2. Между созревающими самками и самцами линя не выявлено достоверных различий в лейкоцитарной формуле, что говорит о единообразии клеточного состава белой крови внутри вида среди одновозрастных рыб, выращенных в одинаковых условиях и отражает отсутствие полового диморфизма по этому показателю у линя в этот период онтогенеза.

3. В сыворотке крови самок линя в сравнении с самцами достоверно больше концентрация общего белка, что связано с особенностями белкового метаболизма у самок в период роста ооцитов.

4. Цитометрический анализ эритроцитов производителей линя показал, что эритроциты у самцов линя крупнее, чем у самок. Средняя площадь эритроцитов составляет у самцов и самок соответственно 94,060 ± 0,758 и 87,300±0,882 мкм2, периметр соответственно 36,630 ±0,186 и 35,060±0,202 мкм.

5. Более низкая концентрации гемоглобина, СГЭ и более высокая концентрация эритроцитов в крови самцов из УЗВ в сравнении с самцами р.Неманин говорит о преобладании незрелых эритроцитов в крови окуня из УЗВ, т.е. об активации эритропоэза, что отражает менее благоприятные условиях для самцов, выращиваемых в УЗВ.

6. Более высокая температура воды в рыбоводных емкостях УЗВ приводит к уменьшению СГЭ, доли малых лимфоцитов и общего числа лимфоцитов; способствует увеличению концентрации лейкоцитов, общего белка в сыворотке крови, доли нейтрофильных метамиелоцитов и больших лимфоцитов.

7. Уровень гематологических показателей крови линя из УЗВ и р.Неманин свидетельствует о несколько лучшем физиологическом состоянии вторых.

8. Впервые установлен гематологический статус окуня оз.Виштынецкого по концентрации гемоглобина, эритроцитов, лейкоцитов, общего белка в сыворотке крови, среднему содержание гемоглобина в эритроците, отношению эритроцитов к лейкоцитам, лейкоцитарной формуле крови, цитометрическим параметрам эритроцитов.

9. Лейкоцитарный состав крови окуня оз. Виштынецкое представлен основными клетками - моноцитами, лимфоцитами (большими и малыми), нейтрофильными миелоцитами и метамиелоцитами, палочко- и сегментоядерными нейтрофилами, эозинофилами.

10. Отсутствие достоверных различий в лейкоцитарной формуле окуня оз. Виштынецкого, выловленного на различных станциях, свидетельствует о сходстве физиологического состояния окуня в различных районах озера и благоприятных экологических условиях в водоеме.

11. У окуня оз. Виштынецкого с возрастом достоверно увеличивается концентрация гемоглобина, снижается концентрация эритроцитов, доля нейтрофильных метамиелоцитов и больших лимфоцитов, площадь, периметр, большая ось, округлость и вытянутость эритроцитов. Концентрация лейкоцитов в крови окуня к трем годам достоверно увеличивается, а к четырем снова уменьшается.

12. У окуня оз. Виштынецкого в сравнении с окунем Куршского залива достоверно больше концентрация гемоглобина, лейкоцитов, СГЭ, доля нейтрофильных миелоцитов, метамиелоцитов, сегментоядерных нейтрофилов, эозинофилов, моноцитов, больших лимфоцитов и меньше концентрация общего белка в сыворотке крови и доля малых лимфоцитов, что свидетельствует о лучшем физиологическом состоянии окуня оз. Виштынецкого. Это подтвердили и достоверные различия по цитометрическим показателям эритроцитов.

Обозначения и сокращения

Блф - большой лимфоцит

Г - гига (109)

Л - лейкоциты

М - среднее значение показателя

Мн - миелоцит нейтрофильный

Мо - моноцит

Млф - малый лимфоцит

Ммн - метамиелоцит нейтрофильный

ОЧЛФ - общее число лимфоцитов

ОЧН - общее число нейтрофилов

Пб - псевдобазофил

Пн - палочкоядерный нейтрофил

Пэ - псевдоэозинофил

Сн - сегментоядерный нейтрофил

Т - тера (1012)

ЦП - цветной показатель

Э - эозинофил

Эр - эритроцит

Эр/Л - отношение эритроцитов к лейкоцитам

А - большая ось эритроцита

В - малая ось эритроцита

Fk - фактор формы круга, Fk = 4PS/P2

Fe - фактор формы эллипса, Fe = S/PAB

Fo - округлость, Fo = 45/Pf2, где f2 - максимальный индекс Фере

Hb - гемоглобин m - ошибка средней n - количество исследованных рыб

Р - периметр эритроцита р - уровень значимости

S - площадь эритроцита t - температура воды

Введение

Важнейшей составной частью обеспечения населения страны пищевой продукцией является рыба, доля которой в рационе питания должна составлять не менее 20 кг в год на душу населения. Однако в последние годы объемы промысла ценных в пищевом отношении видов рыбы значительно сократились. По этой причине потребление рыбы в России на душу населения в настоящее время находится на уровне всего 10-11 кг в год, что значительно ниже медицинской нормы [42].

В условиях, когда уловы океанической рыбы сокращаются, а рыбные запасы внутренних водоемов поддерживаются за счет искусственного воспроизводства, единственным и надежным источником увеличения объемов пищевой рыбопродукции является аквакультура.

Физиологическое состояние рыбы зависит от условий ее выращивания. Поэтому поиск оптимальных решений, направленных на повышение жизнестойкости рыбы и наиболее полной реализации ее роста в различных условиях, становится все более актуальным [9].

Рыбы, как в естественных, так и в искусственных условиях выращивания, подвергаются воздействию различных по природе и происхождению стресс-факторов. При этом стрессовая реакция у рыб сопровождается изменением функционального состояния защитных систем организма и отражается, в первую очередь, на гематологических и иммунологических показателях [41].

Периферическая кровь, как и система крови в целом, обладает ярко выраженными трофической и защитной функциями. Благодаря нейрогуморальной регуляции и другим факторам клеточный состав периферической крови поддерживается на определенном уровне и в определенных соотношениях. Изменения в системе крови являются ответной реакцией организма рыб на изменения внешних и внутренних факторов. Таким образом, морфологический анализ крови является одним из тонких и объективных методов контроля за физиологическим состоянием организма [26]. Поэтому значение морфологических показателей крови в определении физиологического состояния организма рыб огромно, тем более, что сведения по показателям крови окуня оз. Виштынецкого и линя весьма ограничены.

Линь отличается высокими пищевыми качествами и востребован на потребительском рынке. Он является популярным объектом спортивного рыболовства. В странах Западной Европы линь ценится лишь немногим ниже форели. Он неприхотлив по отношению к комбикормам и в целом этот вид лабилен к условиям окружающей среды [43].

В отечественной научной литературе имеются ограниченные сведения по гематологической характеристике производителей линя, выращенных в различных условиях.

Окунь оз. Виштынецкое является многочисленным видом. Обладает высокими вкусовыми качествами. Однако данных, характеризующих кровь этого ценного объекта, до настоящего времени нет. Определение гематологических показателей окуня позволяет оценить не только его физиологическое состояние, но и установить экологические условия места обитания.

Целью наших исследований являлось изучение гематологических показателей производителей линя, выращенных в УЗВ и окуня оз. Виштынецкого.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи: 1) определить длину, массу, индекс почки, печени и селезенки; и лейкоцитарную формулу крови двухгодовалых линей, выращенных в условиях (УЗВ);

2) определить концентрацию гемоглобина, эритроцитов, лейкоцитов, общего белка в сыворотке крови, среднее содержание гемоглобина в эритроците, отношение эритроцитов к лейкоцитам, лейкоцитарную формулу крови, цитометрические параметры эритроцитов производителей линя, выращенных в условиях (УЗВ);

3) определить показатели красной и белой крови окуня, выловленного на различных станциях оз. Виштынецкого.1. Аксютина З.М. Элементы математической оценки результатов наблюдений в биологических и рыбохозяйственных исследованиях: - М.: Пищ. пром-сть, 1968. - 287 с.

2. Аленичев С.В., Рыжков Л.П. цитоморфологический состав крови и динамика гематологических показателей окуня Онежского озера в условиях техногенного загрязнения // Вопросы ихтиологии 2000. - Т. 40. вып. 1.- С. 91-96.

3. Аминева В.А., Яржомбек А.А. Физиология рыб. - М.: Легк. и пищ. пром-сть. - 1984. - 200 с.

4. Антипова П.С. Изменение крови в связи с возрастом и некоторыми экологическими условиями. Автореф. дис…канд. биол. наук 03.00.10. - Ихтиология / Мосрыбвтуз. - М., 1947. - 22 с.

5. Баринова Г.М. Калининградская область. Климат. - Калининград: Янтарный сказ, 2002. - 45 с.

6. Берг Л.Н. - Промысловые рыбы СССР. Атлас. М.: Пищепромиздат, 1949. - 368 с.

7. Биохимия животных: Учеб. пособие / А.В. Чечеткин, И.Д. Головацкий, П.А. Калиман, В.И. Воронянский; под ред. А.В. Чечеткина. - М.: Высш. школа, 1982. - 511 с., ил.

8. Божко А.М., Смирнова И.С. Перспективы изменения метода морфофизиологических индикаторов при изучении рыбца в пределах ареала // Тез. 2 заседание по проблеме «Исследование продуктивности вида в пределах ареала». - Вильнюс: Мокслас, 1971. - С. 25-26.

9. Бойко М.Е. Изучение последствия тиреойдных гормонов и кортизола на рост, тиреойдный статус и показатели крови молоди осетра // Вопросы рыболовства. - т. 5, № 3 (19), 2004. - С. 500-508.

10. Вершигора А.Е. Основы иммунологии. - Киев: Высшая школа, 1980. - 502 с.

11. Вихман А.А. Системный анализ иммунологической реакции рыб в условиях аквакультуры. - М.: Экспедитор, 1996. - 176 с.

12. Волков Н.В. Экспериментальное исследование физиологии крови рыб при действии на них неблагоприятных факторов внешней среды - Петрозаводск, 1971. - 84 с.

13. Гальперин С.И. Физиология человека и животных М.: Высш. школа, 1977. - 653 с.

14. Гематологические показатели сеголетков стерляди при выращивании в бассейнах и садках на корме «Aller futura»в Калининградской области / Г.Г. Серпунин, Л.В Савина, Е.И. Хрусталев и др. // IV международная конференция аквакультуры осетровых рыб: достижения и перспективы развития, материалы / ВНИРО, БИОС. - Астрахань, 2006. - С. 271-273.

15. Географический атлас Калининградской области / Гл. ред. В.В. Орленок. - Калининградд: КГУ, ЦНИТ, 2002. - 276 с.

16. Гидрохимический режим Балтийского моря/ Е.И. Черновская, Н.М. Пастухова, А.Г. Буйневич и др. - Л., 1965. - 168 с.

17. Головина Н.А. Морфофункциональная характеристика крови рыб - объектов аквакультуры: автореф дис…доктора биол. наук 03.00.10. - Ихтиология / ВНИИПРХ. - М., 1996. - 53 с.

18. Гончаренок О.Е. Рыбоводно-биологические особенности искусственного воспроизводства линя (Tinka tinka L.) в условиях Калининградской области: дисс… канд. биол. наук. - Калининград, 2008. - 206 с.

19. Житенева Л.Д., Гориславская М.М. Гематологические показатели сельди Clupea pallasi pallasi Val. в зависимости от ее физиологического состояния // Вопросы ихтиологии. - 1986. - Т. 26. - Вып. 1. - 137-146

20. Житенева Л.Д., Макаров Э.В, Рудницкая О.А. Основы ихтиогематологии (в сравнительном аспекте) Ростов на Дону: изд-во Эверест, 2004. - 312 с.

21. Зайцева Н.Д. Общее количество гемоглобина в онтогенезе угря (Anguilla anguilla L.) и некоторые особенности его крови // Эколого-физиологические особенности крови рыб. - М.: Наука, 1968. - С. 89-93.

1. Зорризахра Д., Пурголям Р., Саеди А.А. Сравнительный анализ гематологических показателей заводской молоди осетровых, выдержанной в различных условиях // Осетровые на рубеже ХХІ века: тез. докл. Международной конф., Астрахань 11-15 сент 2000 г. - Астрахань, 2000. - С. 147-148.

2. Зубина Н.Ф. Динамика накопления гемоглобина в онтогенезе радужной форели // Обмен веществ и биохимия рыб. - М., 1967. - С. 171-176.

3. Иванов А.А. Физиология рыб: Учеб. пособие. - М.: Мир, 1989. - 359 с.

4. Иванова Н.Т. Атлас клеток крови рыб. - М.: Легк. и пищ. пром-сть, 1983. - 184 с.

5. Иванова Н.Т. Некоторые аспекты к основам ихтиогематологии / Н.Т. Иванова. Ростов-на-Дону: РГПУ, 2002. - 54 с.

6. Индустриальное рыбоводство в замкнутых системах / под ред. В.И. Филатова - М., 1991. - 89 с.

7. Ихтиопаталогия / Н.А. Головина, Ю.А. Стрелков, В.Н. Воронин и др., под ред. Н.А. Головиной, О.Н. Бауера. - М.: Мир, 2003. - 448 с., ил.

8. Казначеев Е.Н. Рыбы Каспийского моря. - М.: Легк. и пищ. пром-сть, 1963. - 179 с.

9. Квасова И.П. Сезонная характеристика количества крови и гемоглобина в организме налима // Эколого-физиологические особенности крови рыб. - М.: Наука, 1968. - С. 81-84.

10. Киселев А.Ю. Установки с замкнутым циклом водоиспользования и технологии выращивания в них объектов аквакультуры // Сер. Аквакультура: обзорная информация / ВНИИПРХ. - 1997. - Вып. 1. - 80 с.

11. Козлов В.И, Абрамович Л.С. Товарное осетроводство. - М., 1986. - 117 с.

12. Козлов В.И. Справочник фермера-рыбовода. - М.: ВНИРО, 1998,. - 448 с.

13. Комарова Г.В. Гематологические показатели окуня и красноперки ильменя Горичный / Вестн. Астраханского гос. техн. ун-т. - 1994. - № 1. - С. 80-82.

14. Константинов А.С. Общая гидробиология. - М., 1986. - 472 с.

15. Лабораторные исследования в ветиринарии: биохимические и микологические: справочник / Антонов Б.И., Яковлева Т.Ф., Дерябина В.И. и др. - М.: Агропромиздат, 1991. - 287 с.

16. Лакин Г.Ф. Биометрия. - М.: Высш. .школа 1980. - 293 с.

17. Лапирова Т.Б., Мкряков В.Р. Влияние некоторых стресс-факторов на функциональное состояние гуморального звена неспецифического иммунитета молоди карпа // Вопросы рыболовства. - Т.6, № 4 (24), 2005. - С. 771-776.

18. Мамонтов Ю.П. О мерах по развитию аквакультуры в Российской Федерации // Рыбное хозяйство - 2006. - № 3. - С. 20-21

19. Мамонтов Ю.П., Бочерук А.К., Катичева Л.Ю.Программа развития товарного осетроводства в системе росрыбхоза на период до 2000 года // Информационный пакет, серия Аквакультура. Рыбное хозяйство. - Всероссийский научно-исследовательский и проектно-конструкторский институт экономики, информации и АСУ рыб. хоз-ва России. - 1995. - № 1. - 34 с.

20. Мовчан В.А. Изучение физиологии прудового карпа // Тр. совещ. По физиологии быб. - М.: АНСССР, 1958. - С 251-254.

21. Моисееев П.А., Азизова Н.А. КУРАНОВАИ.И. Ихтиология. М.: легк. и пищ. пром-сть, 1981. - 384 с.

22. Никольский Г.В. Экология рыб. - М.: Высш. школа, 1963. - 368 с.

23. Плохинский Н.А. Алгоритмы биометрии. - М.: МГУ, 1980. - 150 с.

24. Правдин И.Ф. Руководство по изучению рыб - М.:1966. - 375 с.

25. Правдин И.Ф. Руководство по изучению рыб / И.Ф. Правдин. - М., 1966. - 375 с.

26. Пучков Н.В. Физиология рыб М.: 1954. - 371 с.

27. Расс Т.С. Жизнь Животных в 7 Томах. - М.: Просвящение, 1977. - Т. 4 Рыбы. - С.?

28. Рыбы: Популярный энциклопедический справочник / под ред. П.И. Жукова. -Минск, 1989. - 311 с.

29. Савина Л.В. Использование гематологических показателей рыб для оценки новой кормовой добавки МИК БАК и экологического состояния естественных водоемов: дисс… канд. биол. наук. Калининград, 2004. - 189 с.

30. Сементина Е.В. Оценка физиологического состояния рыбы при выращивании в различных условиях: дисс…магистра. Калининград, 2007 - 69 с.

31. Серпунин Г.Г. Гематологические показатели адаптации рыб: дисс. … д-ра биол. наук. - Калининград, 2002. - 482 с.

32. Серпунин Г.Г. Методы гематологических исследований рыб: методические указания для самостоятельной работы студентов высших учебных заведений по направлению 110900.68 - Водные биоресурсы и аквакультура / Г.Г. Серпунин, Л.В. Савина. - Калининград: КГТУ, 2005. - 54 с.

33. Смирнова А.В. Рыбоводно-биологическая характеристика производителей и потомства линя р. Немонин. - дисс…магистра. Калининград, 2007 - 115 с.

34. Смирнова Е.Н. Морфо-экологический анализ развития рыб // Сб. научн. тр. / Института морфологии животных.- 1967.- С. 65-69.

35. Смирнова Л.И. Сезонные изменения лейкоцитарного состава крови леща и окуня // Гидробиологический журнал.,1966. - № 4. - С. 71-74.

36. Смит Л.С. Введение в физиологию рыб. - М., 1986. - 45 с.

37. Справочник по физиологии рыб / Яржомберг А.А, Лиманский В.В, Щербина Т.В и др - М: высш.школа,1986. - 192 с.

38. Стеффенс В. Индустриальные методы выращивания рыб / В. Стеффенс. - М., 1983.- 311 с.

39. Строганов Н.С. Физиологическая приспособляемость рыб к температуре воды. - М., 1956.- 152 с.

40. Технология комбинированного выращивания камбалы, форели и налима в установках с замкнутым циклом водоснабжения / Е.И. Хрусталев, А.Ю. Киселев, А.Н. Илясов и др. - М., 1995. - 13 с.

41. Тромбицкий И.Д. Картина крови прудовых рыб в норме и при паразитных заболеваниях: Автореф. дис… канд. биол. наук. - М., 1984. - 21 с.

42. Тылик К.В. Ихтиофауна водоемов Калининградской области / К.В Тылик. - Калининград, 2003. - 135 с.

43. Тылик К.В. Рыбы трансграничных водоемов России и Литвы. Калининград: ФГОУ ВПО КГТУ, 2007. - 128 с.

44. Федорченко В.И., Новоженин Н.П., В.Ф. Зайцев. Товарное рыбоводство. - М., 1991. - 175 с.

45. Шабалина А.А., Князева А.М. Изменение количества гемоглобина в крови радужной форели в зависимости от рациона, возраста, веса и стадии зрелости // Изв. / ГОСНИОРХ. - Л., 1969. - Т.68. - С. 72-78.

46. Шварц С.С., Смирнов В.С. Метод морфофизиологических индикаторов в экологии наземных животных // Сб. науч. тр. / Ин-т экологии растений и животных. - УФАН СССР, 1967. - вып.58. - С. 459-466.

47. Шварц С.С., Смирнов В.С. Метод морфофизиологических индикаторов в экологии наземных животных // Сб. научн. тр. / Институт экологии растений и животных. - УФАН СССР, 1967. - вып. 58. - С. 459-466.

48. Яхненко В.М. Морфологическая характеристика крови рыб оз. Байкал / Новосибирск, 1984. - 121 с.