Функциональная и рецепторная характеристика белков суперсемейства иммуноглобулинов в процессе онто- и иммуногенеза у животных - Автореферат

Функциональная и рецепторная характеристика белков суперсемейства иммуноглобулинов в процессе онто-и иммуногенеза у животных АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Работа выполнена в Государственном научном учреждении «Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии им. Научный консультант: доктор биологических наук, профессор Верховский Олег Анатольевич Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор Поляков Виктор Филиппович доктор медицинских наук, профессор Булычева Татьяна Ивановна доктор биологических наук, профессор Емельяненко Петр АлексеевичВ практическом аспекте оценка состояния иммунной системы основывается на количественной характеристике иммунокомпетентных клеток и антител, и является основой контроля эффективности и безопасности вакцин, иммунокорригирующих препаратов, использующихся в ветеринарии (Дамбаева С.В. и соавт.,2000, Обухова О.О. и соавт., 2004, Крапивина Е.В. и соавт.,2005, Донник И.М. и соавт.,2005, Крапивина Е.В. и соавт.,2006, Шахов А.Г и соавт,2006, Дегтярев В.П, 2006). Среди мембраносвязывающих белков IGSF большой интерес представляют рецепторы находящиеся на поверхности Т-и НК-клеток (CD2), макрофагов (Fc-рецепторы) и В-лимфоцитов (BCR - антигенный рецептор В-клетки). Диссертация выполнена в соответствии с планом НИР ВИЭВ 01.01.05 М (МП), 01.02.01 М ГНТП «Разработать и освоить производство моноспецифических антисывороток и моноклональных антител для количественно определения уровня иммуноглобулинов в биологических жидкостях организма животных», «Разработать методы иммуноанализа на основе поли-и моноклональных антител для оценки иммунного статуса животных и иммунологической эффективности различных биологических препаратов», 02.02.11 РНТП «Изучить механизмы формирования иммунного ответа у животных в процессе онто-и иммуногенеза, разработать и усовершенствовать методы иммунологического мониторинга». Впервые определены формы локализации поверхностных иммуноглобулинов В-клеток у крупного рогатого скота в различные периоды онтогенеза и проведен корреляционный анализ содержания растворимого и мембраносвязанного IGM в периферической крови животных данного вида. Основные результаты работы доложены на: - на Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 30-летию ВНИИТИБП «Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов», Щелково, 2000 г.; Международном симпозиуме «Биология клетки в культуре», Санкт-Петербург, 2001 г.; Международной учебно-методической и научно-практической конференции, посвященной 85-летию МГАВМ и Б им.К.И.Скрябина, 2004; научной конференции «30 лет развития современных направлений клеточной биотехнологии», Москва, ВИЭВ, 2005 г.; секции «Ветеринарная биотехнология» Отделения ветеринарной медицины РАСХН, 2005 г.,2008 г.; Международной научной конференции «Современные проблемы клеточной биотехнологии и сохранение генетических ресурсов», Москва, 2006 г.;Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы инфекционной патологии и иммунологии животных», посвященной 100-летию со дня рождения Я.Р.Коваленко, Москва, 2006 г.; Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы ветеринарии в современных условиях», посвященной 60-летию Краснодарского научно-исследовательского ветеринарного института,2006 г.; 20-21-и 22-ой Международных ежегодных конференциях Европейского сообщества по изучению китообразных (ECS), Гдыня-2006 г., Сан-Себастьян - 2007 г., Эгмонд-2008 г.; Международной конференции «Физиология и патология иммунной системы», Москва, 2008 г.; Ученом Совете, Методической комиссии ВИЭВ, 1995-2008 г.; межлабораторном заседании научных сотрудников ВИЭВ, 2009 г.На основе полученных МКА С2 и G9 приготовлены реагенты для количественного определения уровня IGM рогатого скота в биологических жидкостях организма животных в РДП и мембранных IGM (SIGM) В-клеток методами РИФ и ИПО. С использованием иммунохимически чистых препаратов IGG и IGA крупного рогатого скота и IGG1 мышей были изготовлены моноспецифические антисыворотки, которые использовались в дальнейших исследованиях по определению уровня иммуноглобулинов и количества иммунокомпетентных клеток, несущих на своей поверхности иммуноглобулины (SIG-клеток) при различных формах иммунного ответа. Для изучения локализации SIG клетки и определения количества В-лимфоцитов был оптимизирован метод иммунопероксидазного окрашивания (ИПО) клеток с использованием моно-и поликлональных антител к Ig крупного рогатого скота и мышей. Таким образом, согласно полученным результатам, уровень IGA-В-лимфоцитов превышает (3,8%) количество IGG-клеток (2,6%), что согласуется с данными о том, что основными клетками, синтезирующими IGA, являются В-лимфоциты кишечника (Conley M.E., 1987, Першин Б.Б. и соавт., 2001). В результате проведенных исследований установлено, что в первые сутки после инъекции вакцины в селезенке достоверно повышается количество В-клеток (рис.5) и уровень IGG1 (рис.