Функціональна активність та імуногенність тропоміозин-тропонінового комплексу кардіоміоцитів при дилатаційній кардіоміопатії - Автореферат

Національна академія наук УкраїниРоботу виконано в Інституті молекулярної біології і генетики НАН України. Науковий керівник: доктор біологічних наук, професор, академік НАН України Мацука Геннадій Харлампійович, Інститут молекулярної біології і генетики Козлов Едуард Андрійович, Інститут молекулярної біології і генетики Захист дисертації відбудеться "28" жовтня 2003 року о 10.00 годині на засіданні спеціалізованої вченої ради Д26.237.01 Інституту молекулярної біології і генетики НАН України (м.Київ 03143, вул.Хвороба характеризується дилатацією (розширенням) та погіршенням здатності до скорочення лівого або двох шлуночків серця, прогресуючим погіршенням симптомів серцевої недостатності, зниженням фракції викиду крові до 15-20 % від норми та є однією з основних причин для пересадки серця (Mestroni, 1994). Метою роботи було вивчення молекулярних основ функціональної активності та виявлення особливостей імуногенності тропоміозин-тропонінового регуляторного комплексу міокарда людини при розвитку ДКМП. порівняти імуногенність ТМ ТАТН, виділених із міокарда хворого на ДКМП з такими ж білками, виділеними із міокарда практично здорової людини; міокард кардіоміопатія кардіоміоцит білок проімунізувати піддослідних лабораторних тварин (миші лінії Balb/с) найбільш імуногенними з досліджуваних білків для того, щоб спробувати індукувати ДКМП-подібне захворювання у піддослідних тварин та дослідити вплив імунізації на розвиток очікуваного індукованого аутоімунного ураження міокарда; визначити кількісний вміст шаперону Hsp70 як одного з головних факторів згортання білка в кардіоміоцитах при ДКМП у людини.ТМ із міокарда людини, яка загинула від ДКМП, та із міокарда практично здорової людини, яка загинула внаслідок нещасного випадку, виділяли за методом Міше (Mische, 1987) з модифікаціями. В результаті наших модифікацій, по-перше, було зменшено кількість промивок мязового фаршу, по-друге, у кожний розчин було додано інгібітор протеаз фенілметилсульфонілфторид у концентрації 0,2 ММ, що значно підвищило вихід, чистоту та активність одержаних препаратів. ТН із міокарда людини, яка загинула внаслідок ДКМП, із міокарда особи, яка померла внаслідок ішемічної кардіоміопатії (ІКМП), та із міокарда практично здорової людини, яка загинула в результаті нещасного випадку, виділяли за методом Барської та Гусєва (Барская, Гусев, 1981) із модифікаціями. Було проскриновано сироватки 62 хворих на ДКМП, сироватки 34 хворих на ІКМП та сироватки 21 практично здорового донора. У цих пацієнтів відсоток перевищення рівня АТ (? %) над аналогічними показниками здорових донорів складав: 75,9 - для ТН з міокарда хворого на ДКМП; 57,9 - для ТН з міокарда хворого на ІКМП та 48,3 - для ТН зі здорового міокарда, та був достовірно вище (р<0,05), ніж аналогічні показники в групі ІКМП.У дисертаційній роботі досліджено молекулярні механізми, що задіяні у розвитку такої аутоімунної органоспецифічної патології людини як дилатаційна кардіоміопатія (ДКМП), і встановлено, що певну роль у цьому відіграють структурно-функціональні зміни регуляторних білків скоротливого апарату міокарда, зокрема тропонінового комплексу. Розроблено метод реконструкції скоротливого апарату кардіоміоцитів із окремих структурних та регуляторних білків, для чого адаптовано і модифіковано стосовно міокарда людини існуючі методи виділення препаратів тропоміозину і тропонінового комплексу. Досліджено імуногенність регуляторних білків міокарда в нормі і при дилатаційній кардіоміопатії і встановлено, що при патології імуногенність тропоміозину не змінюється, а імуногенність тропонінового комплексу підвищується порівняно з нормою. Підвищена імуногенність тропонінового комплексу кардіоміоцитів при патології супроводжується змінами його функціональної активності, зокрема здатності підвищувати чутливість до кальцію реконструйованого скоротливого апарату, що може свідчити про конформаційні зміни в структурі окремих тропонінових субодиниць. Встановлено, що однією з можливих причин конформаційних змін тропонінового комплексу при дилатаційній кардіоміопатії може бути порушення роботи шаперону Hsp70.

Основний зміст