Ферментативна активність і морфокінетичні властивості сперміїв людини до і після низькотемпературного консервування - Автореферат

бесплатно 0
4.5 219
Дослідження ступеня збереження ферментативної активності та морфокінетичних показників сперми донорів при кріоконсервуванні. Оцінка впливу різних середовищ інкубації сперміїв на рухливість гамет, на збереження мембран і конденсацію хроматину в клітинах.

Скачать работу Скачать уникальную работу

Чтобы скачать работу, Вы должны пройти проверку:


Аннотация к работе
Національна академія наук України Ферментативна активність і морфокінетичні властивості сперміїв людини до і після низькотемпературного консервуванняРобота виконана в Інституті проблем кріобіології і кріомедицини НАН України Науковий керівник: академік НАН України, доктор медичних наук, професор, лауреат Державних премій СРСР та України Грищенко Валентин Іванович, Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України, директор ІПКІК НАН України, м. Офіційні опоненти: доктор медичних наук Компанієць Антоніна Михайлівна, Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України, завідувач відділу кріопротекторів, м. Харків доктор біологічних наук, професор Гладкова Алла Іванівна, Інститут проблем ендокринної патології АМН України, завідувач лабораторією репродуктивної ендокринології, м. Захист відбудеться “__24__”_____січня____2006 року о__13.30_ годині на засіданні спеціалізованої Вченої ради Д 64.242.01 в Інституті проблем кріобіології і кріомедицини НАН України за адресою: 61015, м.Для лікування безпліддя розроблені і більш широко застосовуються методи допоміжних репродуктивних технологій (ДРТ), зокрема метод штучної інсемінації спермою чоловіка або донора. Для реалізації раніш розробленого в ІПКІК НАН України методу надшвидкого заморожування сперми людини [Грищенко В.И., Калугин Ю.В., Лучко Н.А., 1998] виготовляються спеціальні алюмінієві контейнери і застосовується складна апаратура, яка забезпечує необхідний режим заморожування. Розробка спрощеної, але не менш ефективної технології кріоконсервування чоловічих гамет, яка не передбачає застосування спеціального устаткування буде сприяти більш широкому використанню методів інсемінації спермою чоловіка або донора в центрах по лікуванню безпліддя. У вивченні сперми людини досягнуто значних результатів, зокрема у дослідженні гамет та механізмів їхнього ушкодження на різних етапах низькотемпературного консервування (НТК). Таким чином, активність ферментів у сполученні з морфологічними характеристиками клітин може бути критерієм оцінки морфофункціонального стану статевих клітин до кріоконсервування та ефективності методів низькотемпературного консервування і, зокрема, кріозахисних середовищ, які використовуються при заморожуванні сперми людини.Кріоконсервування зразків сперми проводили під захистом середовища гліцерин-лактоза-жовток (ГЛЖ) у полімерних трубочках довжиною 70-80 мм, з зовнішнім діаметром 3,8 мм та товщиною стінок 120 мкм [Осташко Ф.И., 1990], які поміщали в ультратермостат, що потім переносили в холодильник, і на першому етапі охолоджували зі швидкістю1-2°С/мин до температури 8±2°С. Далі зразки переносили до металевого контейнера, який встановлювали на поверхні рідкого азоту і охолоджували зі швидкістю 80°С/мин до температури-70-75°С на протязі 1 хвилини, після чого трубочки занурювали у рідкий азот. Середню кількість дефектів на один спермій з морфологічними порушеннями визначали за допомогою індексу тератозооспермії, що дорівнює відношенню суми кількості всіх дефектів, визначених у 200 сперміях, до відсотка атипічних форм. Були досліджені еякуляти 90 чоловіків, праця яких повязана зі шкідливими умовами: 1 - праця зі надвисокочастотним (НВЧ) обладнанням; 2 - робота з компютером більш 6-7 годин на добу; 3 - хімічне виробництво; 4 - мали тривале переохолодження; 5 - зварники; 6 - вантажники; 7 - водії; 8 - спортсмени-борці; у групу 9 (контроль) входили 94 кандидата у донори і донорів сперми, праця яких не була безпосередньо повязана зі шкідливими умовами (рис.1). Контакт же сперміїв із КС 1, 4, призводив до достовірного зменшення рухливості сперміїв у порівнянні з контролем (рис.3).У дисертації наведені теоретичне узагальнення і нове вирішення наукової проблеми, що стосується поліпшення методу кріоконсервування сперми донорів шляхом розробки нескладної та ефективної технології Ії заморожування, яка не потребує спеціального обладнання. Визначення морфокінетичних властивостей та оцінка ферментативної активності сперміїв людини дозволили комплексно оцінити ефективність розробленого методу кріоконсервування чоловічих гамет.

План
ОСНОВНИЙ ЗМІСТ РОБОТИ

Вы можете ЗАГРУЗИТЬ и ПОВЫСИТЬ уникальность
своей работы


Новые загруженные работы

Дисциплины научных работ





Хотите, перезвоним вам?