Фармакологічні властивості та альфа-субодиничний склад нікотинових ацетилхолінових рецепторів нейронів вегетативних гангліїв щура - Автореферат

НАЦІОНАЛЬНА АКАДЕМІЯ НАУК УКРАЇНИ ІНСТИТУТ ФІЗІОЛОГІЇ ІМ. О. О.Роботу виконано у відділі фізіології вегетативної нервової системи Інституту Фізіології ім. Кожний нейрон ВШГ, підщелепного ганглія та субепікардіального сплетення може експресувати декілька підтипів НХР, а нейрони в межах ганглія відрізняються за спектром представлених підтипів НХР. За наявністю додаткового блокуючого ефекту дії двох антитіл різної специфічності на АХ-викликані струми встановлено, що нейрони ВШГ експресують a3-та а7-субодиниці НХР, які входять до складу різних рецепторів. Работа посвящена исследованию а-субъединичного состава никотиновых холинорецепторов (НХР) нейронов верхнего шейного (ВШГ), подчелюстного ганглиев и субэпикардиального сплетения крыс.На нейронах исследованных ганглиев установлено наличие a3-, a4-, a5-, и а7-субъединиц НХР. По наличию дополнительного блокирующего эффекта при действии двух антител разной специфичности на АХ-вызванные токи установлено, что нейроны ВШГ экспрессируют a3-и а7-субъединицы НХР, которые входят в состав разных рецепторов.І якщо питанню про субодиничний склад НХР верхнього шийного ганглія (ВШГ) у науковій літературі присвячено досить багато робіт, і про субодиничний склад НХР нейронів інтракардіальних гангліїв можна також знайти окремі публікації, то роботи присвячені субодиничному складу НХР нейронів підщелепного ганглія відсутні. Богомольця НАН України: “Вивчення звязку між субодиничним складом нікотинових холінорецепторів нейронів вегетативних гангліїв та їх функціями”, “Електрофізіологічні та фармакологічні властивості нейронних нікотинових холінорецепторів з різним а-субодиничним складом симпатичних та парасимпатичних гангліїв”, а також “Субодиничний склад молекули нікотинового холінорецептора нейронів вегетативних гангліїв”. Основною метою даної роботи було визначення якісного а-субодиничного складу НХР нейронів вегетативних гангліїв щура - верхнього шийного, підщелепного та нейронів субепікардіального сплетення, а також зясування механізмів блокуючої дії мекаміламіну та азотнокислого свинцю. З використанням методу внутрішньоклітинного відведення ацетилхолін-викликаних потенціалів (АХ-потенціалів) нейронів субепікардіального сплетення щура, використовуючи антитіла, що є специфічними до агоніст-звязуючого центру a3-, a4-, a5-та а7-субодиниць НХР (амінокислотні залишки 181-192) встановити а-субодиничний склад НХР даних парасимпатичних нейронів. Згідно результатів даного дослідження, нейронні НХР гангліїв, що досліджені, несуть на собі всі а-субодиниці, відкриті у вегетативній нервовій системі, поза залежністю від того які органи вони іннервують. а-Субодиничний склад НХР нейронів відрізняється як від ганглія до ганглія, так само і від нейрона до нейрона.Так, Ішихара із співавторами (Ishihara K., et al., 1995) дійшли висновку, що НХР найчутливішої до свинцю групи нейронів містять у собі а7-субодиниці НХР, в той час, коли НХР іншої групи нейронів містять комплекси a4b2 чи a3b4 субодиниць. При використанні в якості блокатора іонів свинцю, ми показали наявність a7-, a3b2-та a3b4-субодиниць НХР на нейронах ВШГ щура, які, за літературними даними (Papke R.L., 2001), блокує МКМ, а дані, що були отримані з використанням специфічних антитіл проти a3-, a4-та а7-субодиниць, підтвердили присутність цих субодиниць НХР. При аплікації окремих антитіл, a3-та а4-субодиниці були знайдені на 56-57 % нейронів, тоді як a5-та а7-субодиниці спостерігали на 77-78 % нейронів. В комбінації чи то з a5-, чи то з а7-субодиницею дана субодиниця була присутня на 50-53 % нейронів, а в комбінації з а4-субодиницею чи з (a4 a7), (a5 a7) та (a4 a5) субодиницями - на 33% нейронів. Ці дані наштовхують на думку, що всі а3-вмісні нейроні також мають чи то a7-, чи то а5-субодиницю, і щонайменше половина з них також має а4-субодиницю. а3-субодиниця є суттєвим компонентом НХР нейронів вегетативних гангліїв (Balestra B., et al., 2000).Методами петч-клемп в конфігурації “ціла клітина” та внутрішньоклітинного мікроелектродного відведення були досліджені фармакологічні властивості нікотинових ацетилхолінових рецепторів (НХР) нейронів вегетативних гангліїв та їх передбачуваний а-субодиничний склад. Досліджені механізми блокуючої дії мекаміламіну та іонів свинцю на недисоційовані нейрони верхнього шийного ганглія (ВШГ) щура, а також дії специфічних антитіл проти a3-, a4-, a5-та а7-субодиниць НХР на нейрони ВШГ, підщелепного ганглія та субепікардіального сплетення щура. Аналіз залежностей амплітуд трансмембранних струмів від дози агоніста та незалежне від підтримуваного на мембрані потенціалу блокування АХ-викликаних струмів надають підстави говорити про переважно конкурентний механізм блокування нейронних НХР мекаміламіном та іонами свинцю.

ОСНОВНИЙ ЗМІСТ РОБОТИ