Факторы и условия, регулирующие функциональную активность буккальных эпителиоцитов и их взаимодействие с Candida albicans - Диссертация

бесплатно 0
4.5 213
Функциональная активность эпителиоцитов слизистых оболочек. Ингибирование внутриклеточных сигнальных путей. Сущность и значение гормонов, иммуномодуляторов, цитокинов, микробных метаболитов. Приготовление факторов для воздействия на эпителиоциты.


Аннотация к работе
Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Факторы и условия, регулирующие функциональную активность буккальных эпителиоцитов и их взаимодействие с Candida albicansЗФР - забуференный физиологический раствор (РН 7,2-7,4) ЛГ - лютеинизирующий гормон ОРЗ - острое респираторное заболевание ЧБД - часто болеющие дети CD - маркеры клеточной дифференцировки (cluster of differentiation)Функциональная активность мукозальных клеток находит отражение в процессах клеточной дифференцировки, синтезе различных молекул, экспрессии рецепторов и отражает состояние местного и общего гомеостаза организма человека, а также его нарушения при патологии и старении [Маянский А.Н и соавт., 2004; Пальцев М.А.и соавт., 2012; Полякова В.О. и соавт., 2015]. TLRS являются мощными активаторами внутриклеточных сигнальных путей, таких как система нуклеарного фактора KB и МАР-киназ, которые способствуют синтезу функционально активных молекул (цитокины, молекулы межклеточной адгезии, рецепторы, белки острой фазы, ферменты, молекулы главного комплекса гистосовместимости и др.) мукозальными клетками [Маянский А.Н. и соавт., 2007; Baldwin Через продукцию данных медиаторов, эпителиоциты слизистых оболочек активно вовлекаются в воспалительные и иммунные реакции, транслируя сигналы лимфоцитам, макрофагам и дендритным клетками, присутствующим в lamina propria [Топтыгина А.П., Афанасьев С.С., 2009]. Для оценки функциональной активности эпителиоцитов слизистых оболочек в настоящее время используют различные методы, основанные на изучении их морфологии, выявлении клеточных маркеров и рецепторов (иммуногистохимия), продукции цитокинов, медиаторов, определении содержания ДНК (микроспектрофотометрия), а также уровня естественной колонизации нормальной микрофлорой [Банченко Г.В. и соавт. Задачи исследования: Определить влияние эндогенных и экзогенных факторов: половых гормонов, цитокинов, иммуномодуляторов, антисептиков и микробных метаболитов - на функциональную активность рецепторного аппарата эпителиоцитов слизистых оболочек при адгезивных контактах с C. albicans.Эпителиальные клетки слизистых оболочек входят в систему мукозального иммунитета, обеспечивающую первую линию защиты против колонизации различными патогенами [Маянский А.Н. Поддержание целостности и барьерных свойств эпителия обеспечивают три взаимноуравновешенные и одновременно протекающие процесса [ГЕМОНОВВ.В.,1996,Быков В.Л., 1997; Kalinin A.E.et all.,2002]: 1) регенерация - непрерывное образования клеток в самом глубоком (базальном) слое благодаря делению малодифференцированных предшественников; В составе многослойного пласта клетки эпителия находятся на разных стадиях морфофункциональной дифференцировки - от малодифференцированных предшественников в базальном слое (обеспечивают регенерацию эпителия) до высокоспециализированных клеток, которые по мере дифференцировки смещаются в поверхностные слои, подвергаясь десквамации [Банченко Г.В. и др., 1997, Быков В.Л.,1997], с признаками ороговения (наличие кератина) [Jacob H.S. et all.,1980]. Присутствие в эпителиальных чешуйках гидролитических ферментов (кислая фосфотаза, неспецифическая эстераза) также свидетельствуют в пользу участия клеток эпителия в защитных реакциях слизистой оболочки в качестве элемента, способного вызвать протеолиз микроорганизмов. Подобно другим клеткам, эпителиоциты секретируют различные медиаторы, которые оказывают влияние на развитие иммунных и воспалительных реакций.Клетки человека способны обнаруживать и распознавать структуры, общие для разных групп патогенов (PAMP), используя toll - подобные рецепторы [Akira S, 2003; MCCLURE et.all., 2014]. Toll-зависимая рецепция является пусковым моментом для активации эпителиальных клеток через каскад внутриклеточных реакций, в результате чего изменяется функциональная активность эпителиоцитов, которая может проявляться в виде усиленной секреции цитокинов, пептидных медиаторов, дифенсинов, ингибиторов провоспалительных агентов, цитокиновых и прочих рецепторов, молекул главного комплекса гистосовместимости и молекул межклеточных взаимодействий [Cario E., et al., 2002; Sasai M,et all., 2013; Weindl, G. et al., 2007; Weindl G. et all.,2010; Naglik J.R.,2011а; MCCLURE R. et.all., 2014]. Таким способом - через активацию TLRS - эпителиоциты могут принимать участие в регуляции врожденного и адаптивного иммунитета за счет трансдукции сигнала лимфоцитам, макрофагам и дендритным клеткам, присутствующим в Lamina propria [Топтыгина А.П., и др. В зависимости от локализации, в клетке выделяют рецепторы, расположенные на цитоплазматической мембране (TLR-1, TLR-2, TLR-4, TLR-5, TLR-6) или на мембранах внутриклеточных органелл - лизосом, эндосом, аппарата Гольджи.

План
ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Функциональная активность эпителиоцитов слизистых оболочек

1.2 Адгезивные взаимодействия мукозальных эпителицитов с микроорганизмами

1.3 Толл - подобные рецепторы эпителиоцитов слизистых оболочек

1.4 Внутриклеточные сигнальные пути эпителиоцитов

1.5 Факторы, способные влиять на функциональную активность эпителиоцитов

1.5.1 Гормоны

1.5.2 Цитокины

1.5.3 Иммуномодуляторы

1.5.4 Микробные метаболиты

1.6 Эпителиоциты слизистых оболочек в клинико-лабораторных исследованиях

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Объем исследований

2.2 Получение эпителиоцитов слизистых оболочек

2.3 Оценка естественной колонизации эпителиоцитов

2.4 Получение клеточной суспензии Candida albicans

2.5 Оценка адгезии в системе «эпителиоциты - C.albicans»

2.6 Приготовление факторов для воздействия на эпителиоциты

2.6.1 Получение продуктов метаболизма микроорганизмов

2.6.2 Женские половые гормоны

2.6.3 Цитокины

2.6.4 Иммуномодулирующие препараты

2.6.5 Антисептические средства

2.7 Определение уровня экспрессии Toll-подобных рецепторов на буккальных эпителиоцитах и жизнеспоспособности клеток

2.8 Ингибирование внутриклеточных сигнальных путей

2.8.1 Подавление активации транскрипционного фактора NF-KB

2.8.2 Ингибирование активности внутриклеточных митогенактивированных киназ ERK1/p38

2.9 Получение сыворотки человека

2.10 Определение уровня сывороточных иммуноглобулинов IGE и IGG

2.11 Определение уровня растворимых SCAM - I в сыворотке

2.12 Схема применения лизоцим-содержащего антисептического препарата у часто болеющих детей

2.13 Схема лечения больных с онихомикозом и микробной экземой с использованием иммуномодулирующих препаратов

2.14 Статистическая обработка результатов

ГЛАВА 3. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1 Влияние эндогенных и экзогенных факторов на адгезивность эпителиоцитов слизистых оболочек в экспериментальной системе с C. albicans in vitro

3.1.1 Влияние женских половых гормонов на адгезивность эпителиоцитов в системах с C. albicans

3.1.2 Влияние цитокинов на адгезивность эпителиоцитов в системах с C. albicans

3.1.3 Влияние иммуномодуляторов на адгезивность эпителиоцитов в системах с C.albicans

3.1.4. Влияние антисептических препаратов на адгезивные реакции мукозальных эпителиоцитов в системах с C. albicans

3.1.5 Влияние микробных метаболитов на адгезивность эпителиоцитов в системах с C. albicans

3.2 Участие внутренних метаболических путей в регуляции адгезивных реакций буккальных эпителиоциов

3.3 Условия и факторы, регулирующие экспрессию TLR-2 и TLR-4 на буккальных эпителиоцитах

3.3.1 Влияние половых гормонов на экспрессию toll-подобных рецепторов буккальными эпителиоцитами in vitro

3.3.2 Влияние цитокинов на экспрессию toll- подобных рецепторов буккальными эпителиоцитами in vitro

3.3.3 Влияние иммуномодулирующих препаратов на экспрессию toll- подобных рецепторов буккальных эпителиоцитов здоровых доноров in vitro

3.3.4 Влияние иммуномодулирующих препаратов на экспрессию toll- подобных рецепторов буккальных эпителиоцитов у пациентов с заболеваниями пародонта

3.3.5 Влияние антисептических препаратов на экспрессию toll- подобных рецепторов буккальными эпителиоцитами in vitro

3.3.6 Влияние микробных метаболитов на экспрессию toll- подобных рецепторов буккальными эителиоцитами

3.4 Естественная колонизация буккальных эпителиоцитов в оценке эффективности применения иммуномодуляторов и антисептиков при некоторых хронических патологиях

3.4.1 Естественная колонизация буккального эпителия больных с микробной экземой до и после лечения с использованием препарата «Полиоксидоний»

3.4.2. Естественная колонизация буккального эпителия взрослых с онихомикозом дрожжевого генеза до и после лечения с использованием препарата «Деринат»

3.4.3. Естественная колонизация буккального эпителия у часто болеющих детей до и после применения лизоцим - содержащего препарата

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
Заказать написание новой работы



Дисциплины научных работ



Хотите, перезвоним вам?