Проведення дослідження гострої токсичності корвітину при внутрішньочеревинному введенні у щурів. Визначення середньоефективної дози препарату при експериментальній нирковій недостатності. Характеристика нефротропних властивостей полівінілпіролідону.
При низкой оригинальности работы "Експериментальне обґрунтування застосування препарату "Корвітин" при нирковій недостатності", Вы можете повысить уникальность этой работы до 80-100%
Термінальна стадія ниркової недостатності для підтримки життя хворих потребує використання методів замісної терапії, які мають високу вартість. Аналіз даних літератури свідчить, що комплекс фармакологічних властивостей деяких флавоноїдів, зокрема кверцетину, можна використати в комплексному лікуванні ниркової недостатності (Ковалев В.Б. c соавт., 1999; Satyanarayana P.S. et al., 2001; Galisteo M. et al., 2004). Дослідити нефротропні властивості полівінілпіролідону (ПВП) при парентеральному введенні, окремо та у складі корвітину, на інтактних тваринах та щурах з нирковою недостатністю. У роботі вперше проведено дослідження середньоефективних доз корвітину при внутрішньоочеревинному введенні у щурів з нирковою недостатністю. Доведено, що препарат «Корвітин», який широко використовується в кардіологічній практиці, є перспективним засобом для лікування хворих на ниркову недостатність, та обґрунтовано доцільність його застосування у добовій дозі 8 мг/кг при проведенні клінічного етапу досліджень.Також одним із дослідних обєктів був розчин ПВП для парентерального введення з концентрацією діючої речовини 20 мг/мл, яка забезпечує необхідну дозу ПВП у певному обсязі рідини - еквівалентну вмісту у корвітині при його введенні тваринам. Дослідження фармакологічних властивостей корвітину на тлі аутоімунного гломерулонефриту у щурів було проведено на моделі нефриту Хеймана у модифікації (Вихерт А.М. с соавт., 1973) у порівнянні з леспенефрилом з визначенням дослідних показників станом на 120-у добу. При дослідженні середніх ефективних доз корвітину як середня летальна доза було прийняте значення, отримане на попередньому етапі експериментів, що дорівнює 5000 мг/кг, як найвища досліджувана доза препарату, при якій не спостерігалося летальності тварин. Примітки: * - p ? 0,05 відносно інтактних тварин; ** - p ? 0,05 відносно тварин з патологією; ? - p ? 0,05 відносно тварин, що отримували корвітин у еквівалентній дозі за ПВП. В групі тварин, де застосовували корвітин, цей показник був вірогідно вищим за рівень у щурів з контрольною патологією та дещо перевищував його у тварин, що отримували референс-препарат леспенефрил, що може бути повязано з його високою діуретичною активністю.При вивченні середньоефективних доз корвітину в умовах розвитку ниркової недостатності у лабораторних тварин було визначено, що його ЕД50 складає 33,8 ± 5,6 мг/кг. Полівінілпіролідон при парентеральному введенні у дозах, еквівалентній ЕД50 корвітину та вдвічі більшій (30 та 60 мг/кг, відповідно), у щурів на тлі розвитку ниркової недостатності не чинить негативного впливу на показники функціонального стану нирок, інтенсивність деструктивних процесів, білковий та азотистий обмін, а також не викликає погіршення структури ниркової тканини. При застосуванні у тварин з гострою нирковою недостатністю корвітин у дозі 33,8 мг/кг чинить позитивний вплив на перебіг патології, що підтверджується зниженням проявів нефротичного синдрому, покращанням функціональних показників нирок та показників азотистого обміну.
План
ОСНОВНИЙ ЗМІСТ РОБОТИ
Вывод
При вивченні середньоефективних доз корвітину в умовах розвитку ниркової недостатності у лабораторних тварин було визначено, що його ЕД50 складає 33,8 ± 5,6 мг/кг. За токсикологічними характеристиками корвітин є препаратом практично нетоксичним для організму людини, оскільки експериментально визначений показник ЛД50 перевищує 5000 мг/кг при внутрішньоочеревинному введенні у щурів.
Полівінілпіролідон при парентеральному введенні у дозах, еквівалентній ЕД50 корвітину та вдвічі більшій (30 та 60 мг/кг, відповідно), у щурів на тлі розвитку ниркової недостатності не чинить негативного впливу на показники функціонального стану нирок, інтенсивність деструктивних процесів, білковий та азотистий обмін, а також не викликає погіршення структури ниркової тканини.
При застосуванні у тварин з гострою нирковою недостатністю корвітин у дозі 33,8 мг/кг чинить позитивний вплив на перебіг патології, що підтверджується зниженням проявів нефротичного синдрому, покращанням функціональних показників нирок та показників азотистого обміну.
В умовах розвитку експериментальної хронічної ниркової недостатності корвітин у дозі 33,8 мг/кг покращує функціональні показники нирок, нормалізує показники електролітного обміну та виявляє помірну гіпоазотемічну дію, підвищуючи виведення продуктів азотистого обміну за рахунок посилення клубочкової фільтрації, і не поступається при цьому референс-препарату леспенефрилу.
Препарат корвітин у дозі 33,8 мг/кг чинить позитивний вплив на перебіг ниркової недостатності у лабораторних тварин на тлі аутоімунного гломерулонефриту, що підтверджується зниженням проявів нефротичного синдрому, покращанням функціональних показників нирок та показників клінічного аналізу крові, нормалізацією показників білкового, азотистого обмінів, процесів ПОЛ та вмісту ендогенного N-ацетилглюкозаміну.
За даними гістоморфологічних досліджень, корвітин у дозі 33,8 мг/кг сприяє збереженню морфо- та ультраструктури нирок щурів на тлі експериментального гломерулонефриту з нирковою недостатністю.
Корвітин може бути рекомендований для проведення клінічних досліджень як засіб для лікування хворих на хронічну ниркову недостатність. При цьому препарат доцільно вводити у добовій дозі 8 мг/кг або 560 мг/доба.
Список литературы
1. Вплив кверцетину при парентеральному введенні на функціональні показники нирок щурів з нирковою недостатностю на тлі хронічного гломерулонефриту / Д.С. Харченко, І.А. Зупанець, С.К. Шебеко, І.А. Отрішко // Клінічна фармація. - 2009. - № 2 (13). - С. 50-53. (Особистий внесок здобувача: проведення експериментальних досліджень, участь в аналізі й узагальненні отриманих даних).
2. Зупанець І.А. Дослідження гострої токсичності та середньоефективних доз кверцетину при парентеральному введенні в умовах розвитку ниркової недостатності у щурів / І.А. Зупанець, С.К. Шебеко, Д.С. Харченко // Фармакологія та лікарська токсикологія. - 2009. - № 1 (8). - С. 28-33. (Особистий внесок здобувача: проведення експериментальних досліджень, підготовка статті).
3. Зупанець І.А. Дослідження впливу парентеральної форми кверцетину на перебіг гострої ниркової недостатності у щурів / І.А. Зупанець, С.К. Шебеко, Д.С. Харченко // Медична хімія. - 2009. - № 1 (11). - С. 98-102. (Особистий внесок здобувача: проведення експериментальних досліджень, участь в аналізі й узагальненні отриманих даних, підготовка статті).
4. Зупанець І.А. Експериментальне вивчення фармакологічних властивостей парентеральної форми кверцетину в умовах розвитку хронічної ниркової недостатності / І.А. Зупанець, С.К. Шебеко, Д.С. Харченко // Вісник фармації. - 2009. - № 2 (58). - С. 75-78. (Особистий внесок здобувача: проведення експериментальних досліджень, аналіз й узагальнення отриманих даних, підготовка статті).
5. Харченко Д.С. Изучение влияния кверцетина при парентеральном введении на биохимические показатели крыс с почечной недостаточностью на фоне хронического гломерулонефрита / Д.С. Харченко, И.А. Зупанец, С.К. Шебеко // Фармаком. - 2009. - № 2. - С. 117-121. (Особистий внесок здобувача: проведення експериментальних досліджень, участь в аналізі й узагальненні отриманих даних, підготовка статті).
6. Створення ефективних лікарських засобів нефропротекторної та гіпоазотемічної дії на основі флавоноїдів / І.А. Зупанець, І.О. Дудар, С.К. Шебеко, А.С. Шаламай, Д.С. Харченко // Інформаційний лист. - К., 2009. - №140. - 8 с.
7. Методи експериментального моделювання ураження нирок для фармакологічних досліджень / С.Ю. Штриголь, В.М. Лісовий, І.А. Зупанець, С.К. Шебеко, Н.Ф. Маслова, А.І. Гоженко, Л.В. Яковлєва, І.І. Заморський, О.В. Товчига, Д.С. Харченко. - Х.: Вид-во НФАУ, 2009. - 48 с.
8. Зупанець І.А. Дослідження ефективності Корвітину при нирковій недостатності у щурів / І.А. Зупанець, С.К. Шебеко, Д.С. Харченко // Матеріали VII Всеукраїнської науково-практичної конференцї з міжнародною участю „Клінічна фармація в Україні”. - Х., 2007. - С. 148-150.
9. Харченко Д.С. Фармакологічне вивчення біохімічних показників щурів з гломерулонефритом під впливом кверцетину при парентеральному введенні / Д.С. Харченко, С.К. Шебеко // Матеріали VIII Всеукраїнської науково-практичної конференцї з міжнародною участю „Клінічна фармація в Україні”. - Х., 2008. - С. 117-118.
10. Харченко Д.С. Дослідження функціональних показників нирок щурів з гломерулонефритом під впливом кверцетину при парентеральному введенні / Д.С. Харченко, І.А. Зупанець, С.К. Шебеко // Матеріали Всеукраїнської науково-практичної конференцї студентів та молодих вчених „Актуальні питання створення нових лікарських засобів”. - Х., 2008. - С. 225.
11. Харченко Д.С. Дослідження показників азотистого обміну у щурів з гломерулонефритом під впливом кверцетину при парентеральному введенні. / Д.С. Харченко, І.А. Зупанець, С.К. Шебеко // Матеріали V Всеукраїнської науково-практичної конференції з міжнародною участю «Досягнення та перспективи клінічної фармакології». - Вісник Вінницького Національного медичного університету. - 2008. - №12. - С.251.
12. Kharchenko D.S. The research of quercetin parenteral form influence on the course of experimental glomerulonephritis / D.S. Kharchenko // Drug Information Journal. - 2009. - Vol. 2 (43). - P. 228-229.
Харченко Д.С. Експериментальне обґрунтування застосування препарату «Корвітин» при нирковій недостатності. - Рукопис.
Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата фармацевтичних наук за спеціальністю 14.03.05 - фармакологія. - Національний фармацевтичний університет, Харків, 2009.
У ході експериментальних досліджень вивчено гостру токсичність та середньоефективні дози препарату корвітин при внутрішньоочеревинному введенні у щурів з нирковою недостатністю. Визначено, що його середньоефективна доза складає 33,8 мг/кг, що дозволило у подальших експериментальних дослідженнях обґрунтовано застосовувати саме цю дозу.
Встановлено, що ПВП, який входить до складу корвітину, при парентеральному введенні у дозах, еквівалентній середній ефективній та вдвічі вищій, не чинить негативного впливу на функціональний стан нирок інтактних тварин та перебіг у щурів ниркової недостатності.
На різних моделях ниркової недостатності встановлено, що під впливом корвітину відбувається зниження проявів нефротичного й набрякового синдромів, нормалізація показників функціонального стану нирок, показників електролітного обміну, клінічних та біохімічних показників крові, зниження інтенсивності процесів вільнорадикального окиснення та деструкції у нирковій тканині, що обумовлює загальний позитивний вплив препарату на перебіг захворювання. Також визначено, що застосування корвітину сприяє збереженню морфо- та ультраструктури нирок щурів на тлі експериментального гломерулонефриту з нирковою недостатністю.
Таким чином, препарат корвітин можна рекомендувати для подальшого клінічного вивчення з метою застосування в терапії ниркової недостатності.
Харченко Д.С. Экспериментальное обоснование применения препарата «Корвитин» при почечной недостаточности. - Рукопись.
Диссертация на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук по специальности 14.03.05 - фармакология. - Национальный фармацевтический университет, Харьков, 2009.
На первом этапе исследований была изучена острая токсичность и определена средняя эффективная доза корвитина в условиях развития почечной недостаточности, вызванной подкожным введением хромата калия. Установлено, что средняя эффективная доза корвитина для крыс составляет 33,8 мг/кг.
В результате исследования нефротропных свойств ПВП было установлено, что раствор ПВП при парентеральном введении в дозах 30 и 60 мг/кг у крыс на фоне развития почечной недостаточности не оказывает негативного влияния на показатели общего и функционального состояния почек животных. Кроме того, раствор ПВП в вышеуказанных дозировках также не оказывал влияния на морфоструктуру почечной ткани интактных крыс и крыс с контрольной патологией.Далее было проведено изучение фармакологических свойств корвитина в условиях развития острой почечной недостаточности на модели глицеринового нефроза у крыс. В ходе исследования было установлено, что корвитин нормализует показатели функционального состояния почек и азотистого обмена лабораторных животных, а также оказывает общее положительное влияние на течение заболевания, при этом не уступая референс-препарату леспенефрилу. Наследующем этапе исследований было изучено влияние препарата на течение хронической почечной недостаточности у крыс, вызванной подкожным введением сулемы. Полученные данные свидетельствуют, что корвитин позитивно влияет функциональное состояние почек, нормализует показатели азотистого обмена, что подтверждается снижением уровня креатинина и мочевины крови и увеличением их клиренса, значительно снижает летальность животных, улучшает показатели электролитного обмена и оказывает общее положительное влияние на течение заболевания, не уступая при этом референс-препарату леспенефрилу, а по некоторым показателям даже превосходя его.
На заключительном этапе исследований было изучено влияние корвитина на течение хронической почечной недостаточности у крыс с аутоиммунным гломерулонефритом. Было обнаружено, что при применении корвитина происходит не только снижение проявлений нефротического синдрома, но и улучшение функционального состояния почек крыс, нормализация показателей клинического анализа крови, азотистого обмена. Также под воздействием исследуемого препарата наблюдалось повышение содержания эндогенного N-ацетилглюкозамина в ткани почек и соответствующее снижение его содержания в сыворотке крови, что говорит о снижении интенсивности процессов свободнорадикального окисления и деструкции в почечной ткани. В результате исследований морфоструктуры почечной ткани животных с гломерулонефритом оказалось, что наибольшее позитивное влияние проявил корвитин, так как при его применении наблюдалась нормализация гистологической картины почек, приближение ее к картине у интактных животных с наличием некоторых патологических изменений при минимальной степени их проявлений. Это выражалось в достоверном снижении оптической плотности базальных мембран в сравнении с контрольной патологией и референс-препаратом леспенефрилом, снижении пролиферации мезангиоцитов и размеров мезангиального мактрикса, нормализации тубуло-интерстициального компонента почек. Также аналогичное позитивное влияние исследуемого препарата на ультраструктуру почечной ткани было обнаружено при электронно-микроскопическом исследовании. На основании проведенных исследований корвитин можно рекомендовать для дальнейшего клинического изучения с целью применения в терапии почечной недостаточности. Ключевые слова: корвитин, нефропротекторное действие, гипоазотемическое действие, почечная недостаточность.
Kharchenko D.S. The experimental foundation of the application of the medication «Korvitin» in the therapy of renal failure. - Manuscript.
The thesis for a scientific degree of the candidate of pharmaceutical sciences in speciality 14.03.05 - pharmacology. - National University of Pharmacy, Kharkiv, 2009.
During the pharmacological investigations an acute toxicity and an average effective dose of the medication «Korvitin» at intraperitoneal introduction in rats with renal failure were studied. It was determined, that an average effective dose is 33,8 mg/kg and this dose was used in the next investigations.
It was established, that polyvinylpyrrolidone, one of the korvitin aids, didnt influence on the kidneys functional state and clinical course of renal failure at intraperitoneal introduction in the average effective dose and in the dose twice more.
In various models of renal failure it was determined, that korvitin reduced clinical presentations of nephrotic and hydropic syndromes, normalized parameters of a kidneys function state, electrolyte metabolism indexes, blood clinical and biochemical indexes, intensity of free radical oxidization and destruction processes in renal tissue, which stipulates general positive influence of preparation on clinical course of disease. Also it was established, that korvitin application makes fore conservation of kidneys morfo- and ultrastructures in rats with experimental glomerulonephritis and renal failure.
