Експериментальне обґрунтування профілактичного застосування L-лiзину есцинату та контрикалу при порушеннях мозкового кровообігу в умовах моделювання загальної широкосмугової вiбрацiї - Автореферат

Значне місце серед різних форм професійної патології посідає вібраційна хвороба, яка обумовлена дією на організм промислової та транспортної вібрації - місцевої та загальної [Алексеев С. В. та ін., 1988, Артамонова та В. Г. ін., 1996]. Ці порушення разом з вестибулярними розладами та зростанням активності нейронів призводять до розвитку гіпоксії мозку і зрушень прооксидантно-антиоксидантної рівноваги та, внаслідок цього, до активації перекисного окислення ліпідів (ПОЛ) [В. М. Ці порушення виникають безпосередньо під час дії вібрації та можуть мати критичні наслідки для людей відповідних професій. У той же час дані про активність ферментів протеолізу та стан інгібіторного потенціалу виявилися неоднозначними, що не дозволило зробити однозначний висновок про роль протеолізу в процесах ураження тканин в умовах загальної широкосмугової вібрації [І. Д. L-лізину эсцинат і контрикал перешкоджають уповільненню локального мозкового кровотоку, зниженню напруги кисню, пригніченню вазоконстрикторної реактивності, а також розвитку позаклітинного та внутрішньоклітинного набряку, метаболічного ацидозу, активації перекисного окислення ліпідів, розвитку набряково-дистрофічних змін у тканинах та зменшенню активності NO-синтетази в судинах мозку, які викликані дією загальної широкосмугової вібрації.Кроликам імплантовували 6 електродів - по 2 до кори великих півкуль, таламусу і гіпоталамусу та в кожному хронічному експерименті отримували до 2 спостережень щодо кожної з перелічених структур мозку. Вивчення АТА-БАЕЕ у сироватці крові за БАЕЕ полягало у визначенні а1-інгібітора протеіназ, активність якого вимірювали уніфікованим методом [В. Ф. Гістологічні зміни в сенсомоторній корі великих півкуль, таламусі, гіпоталамусі, стовбурі на рівні латеральних кутів ромбоподібної ямки та мозочку вивчали в гістологічних зрізах, забарвлених гематоксилін-еозином, та толуідиновим синім за Нісслем [Э. Використано наступні лікарські форми, дози та способи введення препаратів, що досліджувалися - L-лізину есцинат у вигляді 0,1% розчину виробництва української корпорації "Артеріум" в дозі 0,15 мг/кг, контрикал виробництва AWD-Pharma (Німетчина) в дозі 1000 Од/кг. L-лізину есцинат за впливом на перфузію поступається контрикалу в підкоркових структурах, але поперереджає уповільнення КТ в гіпоталамусі та викликає абсолютне зростання показника в корі великих півкуль (таб.2-годинна дія загальної широкосмугової вібрації зменшує обємну швидкість локального мозкового кровотоку у ненаркотизованих кроликів в корі (-11,68%, P<0,01) та гіпоталамусі (-9,82%, P<0,01), а також пригнічує констрикторні реакції мозкових судин на вдихання кисню в корі (-63,90%, P<0,01), таламусі (-38,46%, P<0,01) та гіпоталамусі (-53,06%, P<0,01). L-лізину есцинат (0,15мг/кг) зменшує уповільнення кровотоку в гіпоталамусі та викликає абсолютне зростання показника в корі великих півкуль ( 6,48%, Р<0,01), а контрикал (1000 ОД/кг) викликає абсолютне зростання кровотоку в усіх досліджених структурах ( 11,17%, Р<0,01). Контрикал краще зменшує пригнічення констрікторних реакції мозкових судин у таламусі (-13,85 %, Р<0,01), гіпоталамусі (-26,75%, Р<0,01) у порівнянні з L-лізином есцинатом (-25,72%, Р<0,01 і-45,65 %, Р<0,01 відповідно), в корі їх ефективність істотно не відрізняється (-22,95%, Р<0,01 та-23,81%, Р<0,01 відповідно), але L-лізину есцинат більшою мірою поновлював активність NO-синтетази. 2-годинна дія вібрації знижує напругу кисню в тканинах в корі (-18,60%, P<0,01) та гіпоталамусі (-18,96%, P<0,01), а через 8 годин у мозковій венозній крові спостерігаються ознаки метаболічного ацидозу - зрушення буферних основ (BE) у кислий бік (-152,34%, P<0,01) і зниження напруги вуглекислого газу (PCO2) в крові (-28,72%, P<0,01). Контрикал має більш значну антигіпоксичну дію, викликаючи абсолютне зростання РО2 в корі ( 6,45%, P0,05; PCO2 0,39%, P>0,05; L-лізину есцинат - BE 6,67%, P>0,05; PCO2-8,69%, P>0,05 щодо контрольного рівню), а L-лізину есцинат більшою мірою інгібує перекисне окислення ліпідів (ТБК-АП-16,97%, Р<0,01; контрикал - 3,82%, Р<0,01).

Основний Зміст роботи

У дисертації експериментально обгрунтовано новий підхід до вирішення проблеми підвищення ефективності фармакопрофілактики та корекції порушень мозкового кровообігу в умовах загальної широкосмугової вібрації (ЗШВ) шляхом використання L-лізину есцинату та контрикалу.

2-годинна дія загальної широкосмугової вібрації зменшує обємну швидкість локального мозкового кровотоку у ненаркотизованих кроликів в корі (-11,68%, P<0,01) та гіпоталамусі (-9,82%, P<0,01), а також пригнічує констрикторні реакції мозкових судин на вдихання кисню в корі (-63,90%, P<0,01), таламусі (-38,46%, P<0,01) та гіпоталамусі (-53,06%, P<0,01). Після 8-годинної дії вібрації гістологічно визначається спазм артеріол та розширення венул, а гістохімічно - зниження активності NO-синтетази в стінках судин і нейронах.

L-лізину есцинат (0,15мг/кг) зменшує уповільнення кровотоку в гіпоталамусі та викликає абсолютне зростання показника в корі великих півкуль ( 6,48%, Р<0,01), а контрикал (1000 ОД/кг) викликає абсолютне зростання кровотоку в усіх досліджених структурах ( 11,17%, Р<0,01).

Контрикал краще зменшує пригнічення констрікторних реакції мозкових судин у таламусі (-13,85 %, Р<0,01), гіпоталамусі (-26,75%, Р<0,01) у порівнянні з L-лізином есцинатом (-25,72%, Р<0,01 і -45,65 %, Р<0,01 відповідно), в корі їх ефективність істотно не відрізняється (-22,95%, Р<0,01 та -23,81%, Р<0,01 відповідно), але L-лізину есцинат більшою мірою поновлював активність NO-синтетази.

2-годинна дія вібрації знижує напругу кисню в тканинах в корі (-18,60%, P<0,01) та гіпоталамусі (-18,96%, P<0,01), а через 8 годин у мозковій венозній крові спостерігаються ознаки метаболічного ацидозу - зрушення буферних основ (BE) у кислий бік (-152,34%, P<0,01) і зниження напруги вуглекислого газу (PCO2) в крові (-28,72%, P<0,01). Крім того спостерігається активація перекисного окислення ліпідів у вигляді зростання вмісту ТБК-активних продуктів ( 83,67%, P<0,01) і пригнічння антиоксидантного захисту: зниження загальної антиокислюючої, каталазоподібної, пероксидазоподібної активністей, а також активності супероксиддісмутази і церулоплазміну.

Контрикал має більш значну антигіпоксичну дію, викликаючи абсолютне зростання РО2 в корі ( 6,45%, P0,05; PCO2 0,39%, P>0,05; L-лізину есцинат - BE 6,67%, P>0,05; PCO2 -8,69%, P>0,05 щодо контрольного рівню), а L-лізину есцинат більшою мірою інгібує перекисне окислення ліпідів (ТБК-АП -16,97%, Р<0,01; контрикал - 3,82%, Р<0,01).

У перші 4 години дії загальної вібрації знижується позаклітинний опір (R1) в корі (-35,80%, P<0,01), таламусі (-20,74%, P<0,01) та гіпоталамусі (-18,92%, P<0,01) та внутрішньоклітинний (R2) в корі (-12,87%, P<0,01), таламусі (-21,40%, P<0,01) та гіпоталамусі (-16,89%, P<0,01), що свідчить про розвиток позаклітинного та внутрішньоклітинного набряків. Після 8-годинної дії вібрації гістологічна картина в мозку кроликів характеризується набряково-дистрофічними змінами в тканинах, такими як периваскулярний і перицелюлярний набряк, втрата забарвлення за Нислем.

Результатом набряково-дистрофічних змін у тканинах після 8-годинної дії вібрації є сателлітоз, загибель окремих нейроцитів та нейронофагія, а також активація обмеженого протеолізу у вигляді зростання тріпсиноподібної (ТПА-БАЕЕ) ( 18,79%, P<0,01) та еластазоподібної (ЕПА) активності ( 40,83%, P<0,01), а також зниження інгібіторного потенціалу - антитріптичної активності (АТА-БАЕЕ) (-30,95%, P<0,01) та кислотостабільних інгібіторів (КСІ-БАЕЕ) (-29,56%, P<0,01).

У перші 4 години обидва препарати, особливо контрикал, усували переважно внутрішньоклітинний набряк (R2 в корі великих півкуль: контрикал - 23,38%, P>0,05; L-лізину есцинат - -0,97%, P>0,05 щодо контрольного рівню), а дія на позаклітинний набряк у L-лізину есцинату виявилася в усіх структурах, у контрикалу - лише в гіпоталамусі (R1 в корі великих півкуль: L-лізину есцинат - 3,30%, P>0,05; контрикал - -20,45%, P>0,05). Через 8 годин гістологічна картина свідчить про більшу ефективність L-лізину есцинату відносно періваськулярного набряку, а контрикалу - проти набряково-дистрофічних змін у нейроцитах та змін обмеженого протеолізу (ТПА-БАЕЕ 3,63%, P<0,05; ЕПА -17,95%, P<0,01; АТА-БАЕЕ 19,71%, P<0,01; КСІ-БАЕЕ 19,75%, P<0,01).

Практичні рекомендації: L-лізину есцинат та контрикал представляють інтерес для подальшого вивчення в якості засобів для профілактики та корекції цереброваскулярних порушень, які викликані загальної вібрацією.

L-лізину есцинат та контрикал перспективні для включення до комбінацій під час розробки фармакотерапії цереброваскулярних порушень при загальній вібрації.

1. Гавриш, А. Г. Вплив L-лізину есцинату та контрикалу на водно-електролітний баланс мозку при моделюванні дії загальної вібрації / А. Г. Гавриш // Ліки. - 2007. - № 1-2. - С. 54-58.

2. Белякова, А. Г. Протекторное действие контрикала при нарушениях кровоснабжения и кислородного баланса мозга, вызванных действием общей широкополосной вибрации / А. Г. Белякова, И. Д. Сапегин // Проблемы, достижения и перспективы развития медикобиологических наук и практического здравоохранения: Тр. Крым. гос. мед. ун-та им. С.И. Георгиевского. - Симферополь, 2008. - Т.144, Ч.ІІІ. - C.7-11. (Проведення експериментів, обробка результатів, участь в написанні статті).

3. Белякова, А. Г. Протекторное действие L-лизина эсцината при нарушениях кровоснабжения и кислородного баланса мозга, вызванных общей широкополосной вибрацией / А. Г. Белякова, И. Д. Сапегин // Медицина сегодня и завтра. - 2008. - №1. - С.11-15. (Проведення експериментів, обробка результатів, участь в написанні статті).

4. Белякова, А. Г. Вплив L-лізину есцинату та контрикалу на гістологічні зміни в мозку ненаркотизованих кроликів при моделюванні дії загальної вібрації / А. Г. Белякова, І. Д. Сапегін, Б. А. Насібулін // Вісник морфлогії. - 2008. - Т.14, №2. - С. 324-328. (Проведення гострих експериментів, отримання мозку, виготовлення препаратів, участь в написанні статті).

5. Влияние L-лизина эсцината и контрикала на кислотно-основное равновесие и кислородный баланс мозга бодрствующих кроликов при моделировании действия общей широкополосной вибрации / А. Г. Белякова, И. Д. Сапегин, П. Ф. Семенец, Н. Ю. Батищева // Таврический медикобиологический вестник. - 2008. - Т.11, №4(44). - С. 107-112. (Проведення гострих експериментів, отримання крові, вивчення показників кислотно-лужного стану, обробка результатів, участь в написанні статті).

6. Гаврыш, А. Г. Противоотечное действие L-лизина эсцината при моделировании общей широкополосной вибрации / А. Г. Гаврыш // Актуальные проблемы госпитальной медицины: Тез. докл. международной научно-практической конференции. - Севастополь, Военно-морской клинический госпиталь им. академика H.И. Пирогова Медицинской службы Черноморского флота Российской Федерации, 25-26 ноября 2004. - С.43.

7. Гавриш, А. Г. Антигіпоксична дія L-лізину есцинату при моделюванні загальної широкосмугової вібрації / А. Г. Гавриш // Актуальні проблеми фармакології та токсикології: Тези доп. конференції молодих вчених. - Київ, Інститут фармакології та токсикології АМН України, 22 грудня 2005. - С.16.

8. Гавриш, А. Г. Противоотечное действие контрикала при моделировании общей широкополосной вибрации / А. Г. Гавриш // Актуальные проблемы госпитальной медицины: Тез. докл. международной научно-практической конференции. - Севастополь, Военно-морской клинический госпиталь им. академика H.И. Пирогова Медицинской службы Черноморского флота Российской Федерации, 10-11 ноября 2005. - С.243.

9. Гавриш, А. Г. Антигипоксическое действие контрикала при моделировании общей широкополосной вибрации / А. Г. Гавриш // Вестник морского врача. - 2006. - №2(2). - С.141.

10. Гаврыш, А. Г. Противоотечное и антигипоксическое действие L-лизина эсцината при моделировании общей широкополосной вибрации / А. Г. Гаврыш // Фармакологія 2006 - крок у майбутнє: Тези доповідей ІІІ Національного зїзду фармакологів Україны. - Одеса, 17-19 жовтня 2006. - С. 37.

11. Гаврыш, А. Г. Влияние контрикала на локальное мозговое кровообращение и реактивность сосудов в период воздействия общей широкополосной вибрации / А. Г. Гаврыш // Актуальные проблемы госпитальной медицины: Тез. V международной научно практической конференции. - Севастополь, 26-27 октября 2007. - Вестник морского врача. - 2007. - №4. - С.201.

12. Гавриш, А. Г. Вплив L-лізину есцинат на локальний мозковий кровотік та реактивність судин під час дії загальної широкосмугової вібрації / А. Г. Гавриш // Актуальні питання фармакології: тези доп. науково-практичної конференції з міжнародною участю, присвяченої 70-річчю кафедри фармакології Вінницького Національного медичного університету ім. М.І. Пірогова. - Вінниця, 25-26 жовтня 2007. - Вісник Вінницького Національного медичного університету. - 2007. - №11 (2/2). - С.755.

13. Гавриш, А. Г. Противоотечное и антигипоксическое действие контрикала при моделировании общей широкополосной вибрации / А. Г. Гавриш // Клінічна фармація в Україні: матеріали VII Всеукраїнської науково-практичної конференції з міжнародною участю. - Харьків, 15-16 листопада 2007. - С.136-137.

14. Белякова, А. Г. Влияние контрикала на патоморфологические изменения в мозге бодрствующих кроликов, возникающие при моделировании действия общей широкополосной вибрации / А. Г. Белякова // Досягнення та перспективи клінічної фармакології: матеріали V Всеукраїнської науково-практичної конференції з міжнародною участю. - Вінниця, 12-13 травня 2008 // Вісник Вінницького Національного медичного університету. - 2008. - №12(1). - С.220-221.

15. Белякова, А. Г. Влияние L-лизина эсцинат на патоморфологические изменения в мозге бодрствующих кроликов, возникающие при моделировании действия общей широкополосной вибрации / А. Г. Белякова // Современные проблемы создания, исследования и апробация лекарственных средств. - Харьков, 19 марта 2008 // " Лекарства человеку". - 2008. - C.23-24.

16. Белякова, А. Г. Вплив L-лізину есцинату на кислотно-лужний стан мозку кроликів у стані неспання, що виникає при моделюванні дії загальної широкосмугової вібрації / А. Г. Белякова // Здобутки клінічної та експериментальної медицини: Матеріали підсумкової науково-практичної конференції. - Тернопіль: ТДМУ "Укрмедкнига", 2009. - С.110.