Дослідження системи HLA та цитокінів при первинній відкритокутовій глаукомі - Автореферат

У світі зареєстровано понад 80 млн. хворих на глаукому та їх кількість постійно збільшується. Первинна відкритокутова глаукома (ПВКГ) складає до 90% випадків серед всіх різновидів глауком (Волков В.В., 2007; Нестеров А.П., 2004). Прогрес молекулярної генетики у вивченні глаукоми відкриває нові можливості для виявлення факторів, що впливають на розвиток та перебіг первинної відкритокутової глаукоми та пошуку показників її ранньої діагностики. Визначити специфічності генів HLA DRB1 і HLA DQB1 у крові хворих на первинну відкритокутову глаукому та здорових людей. Дослідити специфічності генів HLA DRB1 і HLA DQB1 у конюнктиві хворих на первинну відкритокутову глаукому та встановити кореляційний звязок між виявленими специфічностями у крові та конюнктиві хворих на первинну відкритокутову глаукому.У групі хворих на первинну відкритокутову глаукому, в порівнянні з групою здорових людей, достовірна різниця мала місце по специфічностях DRB1*01 - 27,5±4,99% (10±3,58 % - у контрольній групі) - р <0,01 та DRB1*13 - 32,5±5,24% (8,57±3,35% - у контрольній групі) - р <0,001. Серед чоловіків хворих на первинну відкритокутову глаукому та чоловіків контрольної групи достовірна різниця була визначена по DRB1*01 - 24,32±7,05% (6,25±4,28% - у контрольній групі) - р <0,05 та у DRB1*13 - 32,43±7,69% (9,37±5,15% - у контрольній групі) - р <0,05 специфічностей гена HLA DRB1. Серед жінок хворих на первинну відкритокутову глаукому та у жінок контрольної групи достовірна різниця була визначена у DRB1*01 - 30,23±7,0% (10,52±4,97% - у контрольній групі) - р <0,05 та у DRB1*13 - 32,56±7,15% (7,89±4,30% - у контрольній групі) - р <0,01 специфічностей гена HLA DRB1. Нестабільність ВОТ у хворих на первинну відкритокутову глаукому може бути повязана із наявністю у пацієнта DQB1*0602-0608 специфічності, яка спостерігалася у 39,28±9,27% хворих на глаукому (р <0,05). У хворих на первинну відкритокутову глаукому із низьким рівнем відтоку внутрішньоочної рідини достовірна різниця була визначена у DRB1*07 специфічності гена HLA DRB1 - 55,55±11,71% (р <0,05) та у DQB1*0304 специфічності гена HLA DQB1 - 55,55±11,71% (р <0,01).В етіопатогенезі первинної відкритокутової глаукоми значну увагу привертає вивчення генетичних факторів, таких як система HLA (human leukocyte antigens) паралельно з імунологічними показниками (інтерферон та фактор некрозу пухлин). Вдосконалення ранньої діагностики хворих на первинну відкритокутову глаукому, шляхом визначення специфічностей генів HLA DRB1 і HLA DQB1 та рівня цитокінів (інтерферону та фактора некрозу пухлин) дає змогу формувати групу ризику щодо розвитку первинної відкритокутової глаукоми та прогнозувати її клінічний перебіг. Визначено специфічності генів HLA DRB1 і HLA DQB1 у здорових людей та у хворих на первинну відкритокутову глаукому. В групі хворих на первинну відкритокутову глаукому, в порівнянні з групою здорових людей, достовірна різниця мала місце по специфічностях DRB1*01 - 27,5±4,99% (10±3,58% - у контрольній групі) - р<0,01 та DRB1*13 - 32,5±5,24% (8,57±3,35% - у контрольній групі) - р<0,001; DQB1*0602-0608 - 30±5,12% (8,57±3,35% - у контрольній групі) - р<0,001 та DQB1*0201 - 27,5±4,99% (8,57±3,35% - у контрольній групі) - р<0,01. Найбільше значення при первинній відкритокутовій глаукомі мають наступні специфічності: *13 специфічність гена HLA DRB1 відповідає за прогресування захворювання, порушення трофіки внутрішніх оболонок ока (визначено за Шлопак Т.В.); *0602-0608 специфічність гена HLA DQB1 відповідає за нестабільність рівня ВОТ, інтенсивність пігментації трабекули та шлемового каналу, порушення трофіки внутрішніх оболонок ока (визначено за Шлопак Т.В.); за стабільність перебігу глаукомного процесу - *0201 специфічність гена HLA DQB1; за зниження рівня легкості відтоку внутрішньоочної рідини - *07 специфічність гена HLA DRB1 та *0304 специфічність гена HLA DQB1.

ОСНОВНИЙ ЗМІСТ РОБОТИ

1. В етіопатогенезі первинної відкритокутової глаукоми значну увагу привертає вивчення генетичних факторів, таких як система HLA (human leukocyte antigens) паралельно з імунологічними показниками (інтерферон та фактор некрозу пухлин). Вдосконалення ранньої діагностики хворих на первинну відкритокутову глаукому, шляхом визначення специфічностей генів HLA DRB1 і HLA DQB1 та рівня цитокінів (інтерферону та фактора некрозу пухлин) дає змогу формувати групу ризику щодо розвитку первинної відкритокутової глаукоми та прогнозувати її клінічний перебіг.

2. Визначено специфічності генів HLA DRB1 і HLA DQB1 у здорових людей та у хворих на первинну відкритокутову глаукому. В групі хворих на первинну відкритокутову глаукому, в порівнянні з групою здорових людей, достовірна різниця мала місце по специфічностях DRB1*01 - 27,5±4,99% (10±3,58% - у контрольній групі) - р<0,01 та DRB1*13 - 32,5±5,24% (8,57±3,35% - у контрольній групі) - р<0,001; DQB1*0602-0608 - 30±5,12% (8,57±3,35% - у контрольній групі) - р<0,001 та DQB1*0201 - 27,5±4,99% (8,57±3,35% - у контрольній групі) - р<0,01.

3. Встановлено звязок між специфічностями генів HLA DRB1 і HLA DQB1, виявленими в крові хворих на первинну відкритокутову глаукому, та результатами клінічних і інструментальних методів дослідження глаукоми. Найбільше значення при первинній відкритокутовій глаукомі мають наступні специфічності: *13 специфічність гена HLA DRB1 відповідає за прогресування захворювання, порушення трофіки внутрішніх оболонок ока (визначено за Шлопак Т.В.); *0602-0608 специфічність гена HLA DQB1 відповідає за нестабільність рівня ВОТ, інтенсивність пігментації трабекули та шлемового каналу, порушення трофіки внутрішніх оболонок ока (визначено за Шлопак Т.В.); за стабільність перебігу глаукомного процесу - *0201 специфічність гена HLA DQB1; за зниження рівня легкості відтоку внутрішньоочної рідини - *07 специфічність гена HLA DRB1 та *0304 специфічність гена HLA DQB1.

4. Встановлено кореляційний звязок (94,7% подібності) між вмістом специфічностей генів HLA DRB1 і HLA DQB1 у крові та в конюнктиві хворих на первинну відкритокутову глаукому. Результати свідчать про можливість використання обох шляхів відбору матеріалу (з крові та конюнктиви) для проведення генетичного дослідження по виявленню специфічностей генів HLA DRB1 та HLA DQB1 у пацієнтів із первинною відкритокутовою глаукомою.

5. Визначено збільшення рівня цитокінів (інтерферону та фактора некрозу пухлин) при прогресуванні глаукомного процесу, особливо у пацієнтів після хірургічного лікування, а також у хворих жіночої статі. У хворих, яким були проведені хірургічні втручання встановлено збільшення рівня інтерферону при прогресуванні глаукомного процесу - 6,39±0,33 log2 Од/мл (р<0,05) та при нестабільному рівні внутрішньоочного тиску - 5,88±0,28 log2 Од/мл (р<0,05). У підгрупі хворих, які отримували лише гіпотензивне лікування, рівень інтерферону дещо менший серед хворих із прогресуванням глаукомного процесу - 5,63±0,28 log2 Од/мл (р<0,05) та при нестабільному рівні внутрішньоочного тиску - 5,45±0,21 log2 Од/мл (р<0,05).

6. У хворих яким були проведені хірургічні втручання виявлено збільшення рівня ФНП при прогресуванні глаукомного процесу - 36,62±2,68% (р<0,05) та при нестабільному рівні внутрішньоочного тиску - 35,08±2,43% (р<0,05). У підгрупі хворих, які отримували лише гіпотензивне лікування, рівень фактора некрозу пухлин підвищувався незначно - 19,19±1,54% (р<0,05), у порівнянні з контролем (14,31±0,40%).

7. Показана доцільність проведення імуногенетичних досліджень (визначення специфічностей генів HLA DRB1 та HLA DQB1 в полімеразній ланцюговій реакції та цитокінів - інтерферону та фактора некрозу пухлин) в діагностиці первинної відкритокутової глаукоми.

ПРАКТИЧНІ РЕКОМЕНДАЦІЇ

На основі отриманих результатів досліджень рекомендовано визначення специфічностей генів HLA DRB1 та HLA DQB1 для встановлення груп ризику щодо розвитку первинної відкритокутової глаукоми у пацієнтів.

При наявності певних специфічностей генів або їх асоціацій у хворих на ПВКГ можна прогнозувати клінічний перебіг захворювання паралельно з даними інших методів обстеження.

Визначення рівнів цитокінів (фактора некрозу пухлин та інтерферону) у хворих на первинну відкритокутову глаукому може бути прогностичним при оцінці перебігу глаукомного процесу, особливо після проведення антиглаукомних операцій, а також ефективності терапії хворих.

1. Жабоєдов Г. Д. Взаимосвязь между системой HLA-антигенов и первичной открытоугольной глаукомой / Г. Д. Жабоедов, П. Н. Салата // Актуальні питання медичної науки та практики : збірник наукових праць Запорізької медичної академії післядипломної освіти. - Запоріжжя, 2006. - Вип. 69. - Книга 2. - С. 64-66 (здобувач провів збір матеріалу, дослідження, статистичну обробку одержаних результатів та їх узагальнення, підготував роботу до друку).

2. Салата П. М. Визначення імуногенетичних показників при первинній відкритокутовій глаукомі / П. М. Салата // Офтальмологічний журнал. - Одеса. - № 6. - 2007. - С. 49-52.

3. Салата П. М. Рівні цитокинів у хворих на первинну відкритокутову глаукому / П. М. Салата // Український науково-медичний молодіжний журнал. - Київ: ТОВ „Видавництво „КІМ”. - 2007. - № 4. - С. 63-65.

4. Салата П. М. Дослідження гіпотензивного ефекту при застосуванні ксалатану, тимололу та пілокарпіну в різних комбінаціях у пацієнтів із первинною відкритокутовою глаукомою / П. М. Салата // Актуальные проблемы медицины и биологии : сб. - Київ, 2007. - № 2 (35). - С. 91-101.

5. Салата П. М. Використання в алгоритмі діагностики первинної відкритокутової глаукоми імуногенетичних показників / П. М. Салата // Вісник наукових досліджень - Тернопіль. - 2008. - № 1(50). - С. 48-55.

6. Салата П. М. Результати дослідження генів системи HLA, інтерферону та фактора некрозу пухлин у хворих на первинну відкритокутову глаукому та у здорових осіб / П. М. Салата // Український науково-медичний молодіжний журнал. - Київ: ТОВ „Видавництво „КІМ”. - 2008. - № 1-2. - С. 69-72.

7. Салата П. М. Патент на корисну модель № 29947 Україна, МПК (2006), А 61В3/00, G 01 № 33/49. Спосіб діагностики первинної відкритокутової глаукоми. / Салата П. М. Заявник та патентовласник. -

№ а 200702338; заявл. 25.06.2007, Бюл. № 9; опубл. 11.02.2008, Бюл. № 3.

8. Салата П. М. Сучасні погляди на патогенез первинної відкритокутової глаукоми / П. М.Салата // Актуальные проблемы медицины и биологии : сб. - Київ, 2005. - № 1 (33). - С. 57-68.

9. Салата П. М. Імуногенетичні аспекти первинної відкритокутової глаукоми / П. М.Салата // Молодь та поступ біології : зб. тез ІІ міжнародної конференції студентів і аспірантів, 21-24 березня 2006р. : тези доп. - Львів, 2006. - С. 443-444.

10. Куриліна О. І. Вивчення експресії антигенів системи HLA в конюнктиві хворих на первинну відкритокутову глаукому після застосування ксалатану / О. І. Куриліна, П. М. Салата // Матеріали ХІ зїзду офтальмологів України, 16-19 травня 2006 р. : тези доп. - Одеса, 2006. - С. 51-52 (здобувач провів збір матеріалу, обстеження хворих, приймав участь в генетичних дослідженнях, здійснив статистичну обробку результатів, проаналізував і узагальнив результати досліджень та підготував роботу до друку).

11. Салата П. М. Імуногенетичні показники ранньої діагностики первинної відкритокутової глаукоми / П. М. Салата // Український науково-медичний молодіжний журнал : 60 ювілейна науково-практична конференція студентів та молодих вчених [“Актуальні проблеми сучасної медицини”] : тези доп. - Київ: ТОВ „Видавництво „КІМ”, 13-15 листопада 2006. - С. 129.

12. HLA antigens and primary open-angle glaucoma / G. D. Zhaboedov, O. I. Kurilina, P. M Salata // 6TH International Glaucoma Symposium, 28-31 March 2007 : Abstracts Book. - Greece : Athens, 2007. - P. 74 (здобувач провів обстеження хворих, взято участь у проведенні генетичних досліджень, узагальнив результати, висновки, підготовив роботу до друку).

13. Салата П. М. Визначення генетичних маркерів первинної відкритокутової глаукоми / П. М. Салата // Новітні підходи до лікування в сучасній медицині : матеріали 5-ої міжнародної науково-практичної конференції студентів та молодих вчених, 17-19 квітня 2007 р. : тези доп. - Ужгород, 2007. - С. 104-105.

14. Салата П. М. Дослідження генів системи HLA у хворих на первинну відкритокутову глаукому / П. М. Салата // Актуальні питання експериментальної та клінічної медицини : матеріали міжнародної науково-практичної конференції студентів, молодих вчених, лікарів та викладачів, 25-26 квітня 2007 р. : тези доп. - Суми, 2007. - С. 208.

15. Салата П. Н. Иммуногенетические изменения у больных с первичной открытоугольной глаукомой / П. Н. Салата // Актуальные проблемы офтальмологии : сб. науч. работ по материалам ІІ Всерос. науч. конф. молодых ученых, 13 июня 2007г. [под ред. Х. П. Тахчиди]. - М. : ФГУ „МНТК „МНТК „Микрохирургия глаза им. акад. С. Н. Федорова Росмедтехнологии” : тезисы докл. - Москва, 2007. - С. 150-151.

16. Investigation of the HLA DRB genes in Ukrainian patients with primary open-angle glaucoma / G. Zhaboedov, O. Kurilina, P. Salata // World Glaucoma congress, 18-21 July 2007 : Abstracts Book. - Singapore, 2007. - P. 67-68 (здобувач провів обстеження хворих, взято участь у проведенні генетичних досліджень, узагальнив результати, висновки, підготовував роботу до друку).

17. Салата П. М. Визначення специфічностей гена HLA DQB1 у хворих на первинну відкритокутову глаукому / П. М. Салата // Український науково-медичний молодіжний журнал. - Київ: ТОВ „Видавництво „КІМ”. - 2007. - № 3. - С. 168. ( Спецвип. : 61 Міжнародна науково-практична конференція студентів і молодих вчених [“Актуальні проблеми сучасної медицини”], 24-26 жовтня 2007р. : тези доп. - Київ).

18. Салата П. М. Дослідження специфічностей генів HLA DRB1 та HLA DQB1 в крові хворих на первинну відкритокутову глаукому / П. М. Салата // Науковий вісник Національного медичного університету імені О.О. Богомольця. - 2008. - № 17. - С. 171-172. (Спецвип. : матеріали Міжнародної науково-практичної конференції, присвяченої 60-річчю ВООЗ, Всесвітньому Дню Здоровя 2008р., захисту здоровя від змін клімату, 7-8 квітня 2008р. : тези доп.).