Дирофиляриоз плотоядных - Курсовая работа

Дирофиляриоз плотоядных - широко распространенное инвазионное заболевание, встречающееся во многих странах мира, особенно в странах тропического и субтропического региона, В странах с умеренным климатом дирофиляриоз чаще диагностируется у животных приехавших из эндемичных районов. На территории бывшего СССР отмечены многочисленные случаи обнаружения гельминтов подотряда Filariata у собак и человека, практически во всех случаях, гельминты идентифицированы как D. repens. Затем начинается быстрый рост личинок и к 6-му дню, времени первой линьки, личинки имеют длину 217±4 мк, при ширине 34±2 мк. Личинки IV стадии достигают длины около 18мм и ширины 0,5мм приблизительно через 60-70 дней, когда наблюдается четвертая линька, за это время происходит дальнейшее увеличение длины тела, наблюдается быстрое развитие половой системы. Частичная закупорка концевых ветвей печеночной артерии микрофиляриями вызывает небольшие, но существенные нарушения в кровоснабжении печени, что приводит к развитию хронических дегенеративных изменений в этом органе, обычно отмечаемых при дирофиляриозе, а гипоксия служит определяющим моментом в развитии ишемии в печени.Это заболевание все чаще попадает в поле зрения не только ветеринарных и медицинских специалистов, но и широкой массы населения. Интерес к дирофиляриозу обусловлен широкой циркуляцией возбудителя в природной среде и отсутствием надлежащих мер по выявлению и дегельминтизации зараженных животных - облигатных дефинитивных хозяев (домашних собак и кошек).

Дирофиляриоз плотоядных - широко распространенное инвазионное заболевание, встречающееся во многих странах мира, особенно в странах тропического и субтропического региона, В странах с умеренным климатом дирофиляриоз чаще диагностируется у животных приехавших из эндемичных районов. Однако в ряде стран Европы и СНГ зарегистрированы случаи местных инвазий. В последние 20 лет дирофиляриоз стали диагностировать в странах с умеренным климатом, где раньше он не встречался. Основным возбудителем заболевания в США, Канаде и в Европе является D. immitis, локализующаяся в правом желудочке и легочной артерии. На территории бывшего СССР отмечены многочисленные случаи обнаружения гельминтов подотряда Filariata у собак и человека, практически во всех случаях, гельминты идентифицированы как D. repens. Данный паразит локализуется преимущественно в подкожной клетчатке и в полостях тела. О паразитировании D, immitis у животных на территории СНГ имеются лишь отдельные сообщения. Заболевание дирофиляриозом протекает преимущественно в скрытой форме и только у 20-25% животных развиваются клинические признаки болезни, зачастую приводящие к гибели. В Российской Федерации дирофиляриоз встречается довольно часто, однако изучен он недостаточно. Имеются лишь отдельные упоминания о случаях заражения плотоядных и людей этой нематодой. Вместе с тем владельцы собак часто обращаются за помощью к ветеринарным специалистам по поводу заражения их питомцев возбудителями дирофиляриоза и даже, нередко, гибелью их от этой инвазии.

1. Краткие сведения о болезни и возбудителе

1.1 Историческая справка

Первый случай обнаружения D. immitis в сердце собаки описал Panthot в 1679г., второй случай спустя столетие в 1718г, констатировал Peyronnie. Род Dirofllaria, основан Railliet et Henry в 1911г. для двух филярий, паразитирующих у собак и некоторых млекопитающих: D. immitis и D. repens Raile. Название рода образовано из двух латинский слов: "diro" - злой и "fila" - нить. В последующие годы к этому роду разными авторами отнесено много видов, как вновь обоснованных, так и фигурирующих в качестве представителей Filaria senso lato (скрытое ощущение, чувство). Yorke et Maplestone в 1926г. причисляют к Dirofllaria уже 11 видов. Faust в 1937г. провел изучение филярий из правой половины сердца морского льва (Zalophus californiensis), погибшего в зоопарке в Новом Орлеане. В распоряжении этого автора оказалось 9 самцов и 13 самок половозрелых паразитов из сердца и множество микрофилярий из периферической крови. Морфологически эта филярия не отличалась от типичной D. immitis. Поскольку изученная Фаустом филярия является несомненным представителем рода Dirofllaria, он присваивает ей наименование D. spirocauda Leidy, 1856г. Desportes (1939-1940), познакомившись с работой Любимова, изучавшего нематод найденных в правой половине сердца тюленя Phoca vitulina, справедливо утверждал, что у ластоногих в крови паразитируют две различных филярии: одна - Skryabinaria spirocauda (Leidy, 1858), относящаяся к Setariinae, а другая - найденная Фаустом, которая принадлежит к Filariinae и отличается от D, immitis только обитанием у другого хозяина. Вторично этот вид был обнаружен у морского льва Тейлором с соавторами, 1961.

1.2 Морфология возбудителя

Возбудители дирофиляриоза относятся к классу круглых червей Nematoda, отряду Spirurida, подотряду Filariata, сем. Filariidae, роду Dirofllaria. В литературе описано 6 видов нематод, относящихся к двум родам. Это - Dirofllaria immitis, D. repens, D. ursi, Dipetalonema (Acanthochilonema) reconditum, D.(A.) grassi и D.(A.) dracunculoides. Наибольшее распространение в мире и патогенное значение имеют D. immitis и D. repens.

На территории Российской Федерации распространенны возбудители инвазии: D. repens и D. immitis, являющиеся облигатными паразитами плотоядных семейств Псовых и Кошачьих; D. ursi - бурого медведя и амурского тигра.

D. immitis - длинная нематода серо-белого цвета, покрытая тонко исчерченной кутикулой, раздельнополая, паразитирует в правом желудочке сердца, в правом предсердии и, иногда, в полой вене и легочных артериях. Редко дирофилярий можно найти в необычных для этого паразита местах: глазах, головном и спинном мозге, бронхиолах, брюшной полости, подкожных тканях, в матке, в левом желудочке сердца, в брюшной аорте, феморальной артерии, печени. Аберрантная инвазия наиболее характерна для человека и представителей семейства кошачьих, которые являются неадекватными хозяевами дирофилярий.

Самец. Достигает 120-180мм длины и 1,124-1,128 мм максимальной ширины. Ширины тела в области конца пищевода равна 0,877 мм и в области ответвления клоаки 0,192 мм. Узкий цилиндрический пищевод достигает длины 1,462 мм, максимальная ширина его в задней части 0,124 мм. Нервное кольцо располагается на расстоянии 0,30-0,40 мм от головного конца. Хвостовой конец конически закруглен и снабжен двумя узкими боковыми крыльями. Ответвления клоаки располагаются на расстоянии 0,136 мм, максимальная ширина ее в задней части 0,032 мм. Малая спикула достигает 0,188-0,200 мм длины и 0,029 мм максимальной ширины. Рулек отсутствует. Хвостовые сосочки у отдельных экземпляром располагаются различно, а потому не могут служить диагностическим признаком вида. Обычно наблюдается 4-5 прианальных сосочков с правой стороны и 3-4 сосочка с левой стороны тела. Количество прианальных сосочков варьирует от 3 до 6 пар, Хвостовой конец спиралевидно закручен.

Самка. Длина тела 250-300мм, максимальная ширина 0,750- 1,514 мм (фото 2). Ширина тела в области конца пищевода 0,482- 0,913 мм, в области отверстия вульвы 0,636-1,014 мм и близ хвостового конца 0,144-0,187 мм. Пищевод 1,084-1,600 мм длины и 0,116-0,140 мм максимальной ширины. Хвостовой конец закруглен. Анус открывается почти субтерминально. Отверстие вульвы находится на расстоянии 1,651-2,762мм от головного конца.

Личинки длиной 0,220-0,340 мм и шириной 0,005-0,007 мм (по толщине равны диаметру эритроцитов).

В, repeits - нитевидная нематода светло-серого цвета, паразитирует в подкожной клетчатке, между сухожилиями ног, в почках, лимфоузлах, реже в полостях тела и соединительной ткани; у человека около 50% всех зарегистрированных случаев приходится на дирофиляриоз с локализацией возбудителя под кожей век, в слизистой оболочке и под конъюнктивой, реже - в глазном яблоке. Зарегистрированы случаи дирофиляриоза с нетипичной локализацией возбудителя - в мужских половых органах (мошонке, яичке, пенисе), маточной трубе, плевре, брыжейке, сальнике. D. repens чаще других филярий регистрируется у человека в странах с умеренным климатом, в том числе и на территории бывшего СССР.

Самец длина тела 48-70 мм, ширина 0,37-0,45 мм. Хвостовой конец самца имеет небольшие латеральные крылья и снабжен каудальньши сосочками, количество и расположение их может сильно варьировать. Прианальных сосочков обычно 2 или 4 с одной стороны и 5 или 6 с другой. Длина хвоста 0,066-0,080 мм. Левая сторона значительно длиннее правой и достигает длины 0,456- 0,590 мм (по Vodel, 1927 и Railliet et Henry, 1911), левая скула в своей наружной части снабжена крыловидной мембраной. Правая скула имеет желобовидную форму и длина ее ОД 85-0,206 мм.

Самка. Длина тела 100-170 ммэ ширина 0,447-0,552 мм. Длина пищевода 1,05-1,53 мм, длина его передней мускульной части 0,49- 0,54 мм. Пищевод отделен от кишечника тремя маленькими клапанами. Нервное кольцо расположено на расстоянии 0,305- 0,368 мм от головного конца. Цервикальные сосочки и экскреторное отверстие не обнаружены. Вульва окаймлена слегка выступающими губами, лежит на расстоянии 1,84-1,92 мм от головного конца. Вагина длинная, около 3,42 мм. У некоторых экземпляров вагина и яйцеводы описывают многочисленные петли, которые тянутся сначала вперед, затем заворачиваются кзади и соединяются с матками, занимающими почти всю полость тела. Скрученные яичники расположены в заднем конце тела. Кишечник тонкий, более или менее прямой. Анус расположен почти терминально. Хвост с тупым кончиком, слегка загнут нейтрально.

Личинка имеет длину 0,207-0,360 и ширину 0,005-0,008 мм

1.3 Биология развития

Дирофилярий, как и все другие представители подотряда Filariata, являются биогельминтами, то есть их развитие происходит с участием промежуточных хозяев - комаров родов Aedes, Anopheles, Culex и др. Стьюбен (1954) установил, что, помимо комаров, промежуточными хозяевами D. immitis могут быть и блохи Ctenocephalus и др. Итальянский исследователь Калуцци (1964) проследил развитие личинок D.repens (в экспериментальных условиях) до инвазионной стадии в клещах Ixodes ricinus, Rhipicephalus sanguineus, слепнях Tabanus bovis, Haematopota variegata, Chysops .coecutiens и в моските Phlebotomus perniciosus Для филярий животных и человека характерно наличие биологических ритмов. Микрофилярии концентрируются в периферических кровеносных сосудах обычно в вечернее время, когда многие насекомые проявляют наибольшую активность и чаще всего нападают на своих хозяев. Различают периодические, субпериодические и непериодические штаммы этих нематод. Периодические штаммы появляются в поверхностных сосудах или слоях кожи только в определенное время суток. Количество микрофилярий непериодических штаммов в поверхностных слоях довольно постоянное. Субпериодические штаммы характеризуются постоянным наличием определенного количества микрофилярий в периферических сосудах, концентрация их возрастает в период наибольшей активности переносчиков. Максимальное количество личинок D.immitis в периферической крови животных наблюдается в 6:00 и в 18:00 часов, что совпадает с двумя пиками активности их промежуточных хозяев - комаров. Самки дирофилярий рождают личинок непосредственно в кровь, откуда их заглатывают комары при кровососании. Одна самка D. immitis рождает до 30 тысяч личинок в сутки. Продолжительность жизни микрофилярий в организме дефинитивного хозяина от 2 лет до 5 лет. Фюллеборн в 1908г установил, что микрофилярии, попавшие в организм промежуточного хозяина, уже через 2 ч 30 мин - 3 ч 40 мин находятся в мальнигиевых сосудах, в клетках стенок которых и происходит их дальнейшее развитие. По данным Тейлор (1960), микрофилярии вначале проходят так называемую стадию «сосиски», то есть укорачиваются и утолщаются. На четвертый день после попадания в комара они становятся почти вдвое короче и втрое шире их длина 150±10 мк, ширина 21 1 мк. Затем начинается быстрый рост личинок и к 6-му дню, времени первой линьки, личинки имеют длину 217±4 мк, при ширине 34±2 мк. Расстояние от головного конца до нервного кольца 36 мк, до экскреторной поры 110 мк, до полового зачатка 190 мк, до анальной поры 395 мк. Вторая линька происходит на 13-14 день, и инвазионные личинки мигрируют в голову комаров. Размер инвазионной личинки на 17-ый день после начала развития - 1300 мк, ширина 28 мк. Расстояние от головного конца до нервного кольца 160 мк, генитального зачатка 535 мк, до ануса 1220 мк.

Развитие личинок D. immitis в комарах Aedes aegypti в лабораторных условиях (при температуре 26°С и относительной влажности 80 %) до инвазионной стадии идет 15-17 дней. Срок развития личинок D. repens зависит от вида промежуточного хозяина. Веббер и Хоукинг в 1955г показали, что при температуре 24-27°С и одинаковой влажности личинки достигают инвазионной стадии в Anopheles stephensii через 12-13 дней и в An. Maculipennis через 12-13 дней и в A. aegypti - через 13-21 день. Микрофилярии могут проникать в кровь дефинитивного хозяина не только в процессе сосания, но и активно - через кожу; когда личинка разрывает ткани ротовых элементов комара и выселяется на поверхность кожи, активно внедряясь в последнюю. При скоплении значительного количества микрофилярий в мальпигиевых сосудах комаров, происходит разрушение этих экскреторных органов, в результате чего насекомые погибают. Имеются указания на гибель 50% комаров, зараженных личинками дирофилярий.

Развитие D. immitis в организме дефинитивного хозяина изучали Кюм, Итагаки (1955) и Ориель (1961), которые вводили под кожу собак инвазионных личинок, выделенных из экспериментально инвазированных комаров. Первые из этих авторов установили, что миграция паразитов в сердце наблюдается только после четвертой линьки, а Ориель изучил развитие нематод в собаках. Личинки обнаруживаются под кожей собак и имеют длину 1,09-1,65мм и диаметр 0,024-0,029мм. Пищевод достигает длины тела личинок и его разделение на мускульную и железистую части четко выражено. У самцов на пятый день развития в собаках появляется многоклеточный спикулярный зачаток. Генитальный зачаток имеет размеры 16x6-8 мк и состоит не менее чем из 12 клеток. У самок он лежит под пищеводом медио - нейтрально, приблизительно в 200 мк от головного конца, у самцов - в 500 мк. Третья линька (первая в дефинитивном хозяине) имеет место между 9 и 12-ым днем, причем самцы иногда линяют раньше, чем самки. Личинки IV стадии достигают длины около 18мм и ширины 0,5мм приблизительно через 60-70 дней, когда наблюдается четвертая линька, за это время происходит дальнейшее увеличение длины тела, наблюдается быстрое развитие половой системы. После четвертой линьки заканчивается формирование половой системы и через 120 дней обнаруживается оплодотворенные самки. Микрофилярии в крови собак наблюдаются через 190-200 дней после инокуляции им инвазионных личинок. В процессе своего развития микрофилярии совершают соматическую миграцию в грудной клетке хозяина и входят в сосудистое русло, проникая в периферические вены, и достигают легочных артерий, преимущественно в каудальной части долей легкого. Откуда они затем мигрируют к месту своей постоянной локализации - в правый желудочек и легочные артерии. Продолжительность жизни гельминтов в организме животных от 4-5 месяцев до 5 лет у собак и около 2,5 лет у кошек. Известны случаи трансплацентарной передачи микрофилярий щенкам.

1.4 Патогенез

Микрофилярии распределяются в капиллярах, небольших артериях, венулах и в более крупных сосудах. В небольших сосудах они медленно протекают с кровью, вызывая критическую гипоксию и нарушение питания тканей хозяина на клеточном уровне. Наиболее уязвимые органы - печень и легкие. Частичная закупорка концевых ветвей печеночной артерии микрофиляриями вызывает небольшие, но существенные нарушения в кровоснабжении печени, что приводит к развитию хронических дегенеративных изменений в этом органе, обычно отмечаемых при дирофиляриозе, а гипоксия служит определяющим моментом в развитии ишемии в печени. Хроническая гипоксия обуславливает резкое уменьшение синтеза протеинов (альбуминов) гепатоцитами, а это, в свою очередь, сказывается на уменьшении содержания энзимов в плазме крови. Половозрелые дирофилярии представляют собой очень серьезное препятствие для тока крови из правого желудочка в легочные артерии. Паразиты обычно локализуются в правом желудочке, простираясь среди полулунных клапанов в правую и левую главные ветви легочной артерии. Такое их расположение способствует увеличению давления в правом желудочке сердца и ведет к развитию сердечной недостаточности. Развивающихся дирофилярий можно обнаружить глубоко в небольших артериях легочных долей. Дирофилярии очень сильно действуют на стенку сосудов в местах паразитирования, вызывая появление нитевидных разрастаний интимы длинной до 6-8 см. Такие разрастания могут быть складчатыми, папиломатозными и ветвистыми. Кроме того, половозрелые дирофилярии обуславливают тромбозы небольших легочных артерий, а мертвые и погибающие паразиты приводят к их эмболии. Массы гельминтов могут накапливаться в задней полой вене, что приводит к затруднению движения крови и, в свою очередь, к острому, иногда фатальному синдрому, известному как "синдром полой вены". Он характеризуется возникновением гемолиза, гемоглобинурии, билирубинемии, желтухи, анорексии и коллапса. Смерть может наступить в течение 2-3 дней. В редких случаях отмечается блокада почечных капилляров микрофиляриями обусловленная отложением иммунных комплексов, что приводит к возникновению гломерулонефрита.

Определенную роль в патогенезе заболевания играют и бактерии Wolbachia. Их метаболиты действуют на иммунную систему хозяев - млекопитающих. Возможно, бактерии и ее продукты освобождаются и в процессе нормального развития филярий, а не только после их гибели. Антитела Ig G к WSP (поверхностные протеины Wolbachia) обнаруживали в сыворотке крови кошек, зараженных D. immitis, а также у людей, зараженных О. volvulus. Помимо стимуляции синтеза специфических антител молекулы Wolbachia вовлекаются в патогенез филяриатозов через воспалительные реакции с участием макрофагов, нейтрофилов и Т-лимфоцитов. Они вызывают продукцию фактора некроза опухолей (ФНО-а), интерлейкина и окиси азота макрофагами. Воспалительные цитокины генерируются макрофагами в ответ на липополисахариды наружной мембраны бактерий. Связанные с Wolbachia молекулы обуславливают развитие системного воспаления после применения диэтилкарбамазина (ДЭК, дитразин). Отдельные протеины бактерий (например, протеины теплового шока HSP 60, LPS и комплекс карбогидратных структур) могут имитировать хозяиные карбогидраты и липиды. Такая молекулярная мимикрия может служить камуфляжем поверхности патогена в хозяине и вызывать иммунопатологические (аутоиммунные) реакции.

2. Диагностика

2.1 Эпизоотологические данные

Дирофиляриоз распространен на всех материках за исключением Антарктиды. Однако основной ареал распространения приходится на страны с теплым и умеренным климатом и тропические зоны по всему миру, включая южную часть Европы и Канаду. В Британии отмечается только у импортируемых собак. За последние 20 лет D. immitis стал установившимся видом в северных районах США и части регионов Канады, северной Италии и северо-восточной Франции. Важные случаи инвазии были обнаружены в Нидерландах, Швеции, Венгрии, Швейцарии, Австрии, Польше и Германии. В анализе, посвященном распространению D. immitis в Германии, никаких местных инвазий D. immitis не выявлено, хотя частота инвазий у собак, побывавших в странах с эндемическими очагами, была высокой. Таким образом: 1) 13% собак с предварительным пребыванием (в анамнезе) в Африке, Северной Америке, Италии, Португалии, инвазированны D. immitis;

2) было установлено, что 10% собак, ввезенных в Германию из Италии, Испании или Португалии, инвазированны D. immitis;

3) 12% американских полицейских собак, использующихся на службе в войсках, размещенных в Германии, инвазированны D. immitis.

Дирофиляриоз собак часто встречается в Либерии, Буркина Фасо, Сьерра-Леоне, Таиланде, Лаосе, Суринаме, Колумбии, Гайоне, Панаме, Тринидаде, Тобаго, Доминиканской Республике, Белизе, Гондурасе, Сент-Люсии и на Гренаде. В Индии 4,7% собак инвазированно дирофиляриозом. В наибольшей степени заражены животные в возрасте от 3,5 до 7 лет. Чаще заражаются дворовые собаки (6,7%), комнатные реже (3,5%). Самцы больше подвержены инвазии, чем самки. В Малайзии микрофилярии D. immitis обнаружены в крови у 32,4% собак. У собак паразиты чаще встречаются у чистокровных породистых собак, чем у беспородных. Экстенсивность и интенсивность инвазии выше (до 100 и более микрофилярий в 1 мкл крови) у плотоядных с короткой гладкой шерстью (бульдоги, боксеры), чем у животных с длинной шерстью (немецкие овчарки, спаниели). В Суринаме 26% собак в возрасте одного года и старше заражены D. immitis. Микрофилярии обнаруживаются в периферической крови животных, интенсивность инвазии - в среднем 9 689 личинок в 1 мл крови. На территории бывшего СССР D. immitis зарегистрирована в Узбекистане, в Абхазии; в поймах рек Средней Азии и Казахстана; на Дальнем Востоке; в Хабаровском крае, Приморье, Узбекистане, на юге Казахстана, Закавказье и других районах. В странах бывшего СССР D. repens распространена в Казахстане, Узбекистане, Туркмении, Грузии, Армении, Украине, Белоруссии и России. В РФ эндемичными регионами являются: Астраханская, Волгоградская, Нижегородская, Саратовская, Ростовская, Рязанская, Воронежская, Владимирская, Московская, Липецкая, Новосибирская, Курская, Тамбовская, Тульская, Курганская, Пензенская, Горьковская, Ульяновская, Челябинская. Тюменская области, а также Алтайский, Краснодарский, Приморский, Ставропольский, Хабаровский края, Северная Осетия, Дагестан и Еврейская автономная область, Республики Башкортостан, Марий Эл и Татарстан. Рядом авторов дирофиляриоз установлен у 30,5% исследованных собак в Сурхавдарьинской области Узбекистана. В максимальной степени были инвазированны собаки породы немецкая овчарка в возрасте 5 лет (38,7%). Инвазированность собак в возрасте 2-4 лет была равной 21,4%, в возрасте 8-10 лет 19,1%. Зараженность городских собак дирофиляриозом, например, в Ростове-на-Дону колеблется от 3,6 до 30,0% в отдельных очагах (школа служебного собаководства МВД РФ, приют для бродячих собак и др.), в г. Новочеркасске от 18% до 60%. D. ursi регистрировали в Азии, Японии, США, Канаде, Северной Америке, в Приморье, на Сахалине и в Вологодской области.

2.2 Клинические признаки

У большинства собак с паразитированием в их организме небольшого количества особей D. immitis, явных признаков заболевания не проявляется. И только при значительной инвазии отмечается нарушение функционирования кровеносной системы, прежде всего, ввиду затруднения тока крови, что приводит к хронической застойной правосторонней сердечной недостаточности. Наличие большого количества активных гельминтов может вызвать эндокардит сердечных клапанов и пролиферативный легочной эндартериит, вероятно, в связи с ответной реакцией организма на продукты выделения паразитов. Кроме того, мертвые или погибающие гельминты могут вызвать легочную эмболию. Через 9 месяцев развивающееся легочное повышенное давление компенсируется гипертрофией правого желудочка, что может привести к застойной сердечной недостаточности, сопровождающееся обычно признаками отека и асцита. На этой стадии собака апатичная, слабая. У зараженных собак наблюдается затрудненное дыхание, кашель и общее истощение. При интенсивном заражении появляется анемия, воспаление почек и мочевого пузыря, сопровождающиеся гематурией. Нередко заболевание сопровождается рвотой, припадками и параличами конечностей. Гибель собак чаще происходит летом при явлениях истощения, водянки грудной и брюшной полостей, в результате нарушения деятельности сердца. Иногда болезнь сопровождается лихорадкой, эпилептоидными припадками и даже явлениями, симулирующими бешенство. Смерть наступает обычно от асфиксии. Заболевание часто сопровождается поражениями кожи в области головы, шеи и на лапах в виде папулезного дерматита: кожа в этих местах гиперемирована, папулы с гнойным или серозным содержимым, в котором обнаруживают личинок дирофилярий. Острый синдром полой вены характеризуется гемоглобинурией, желтухой и коллапсом. При слабой инвазии у работающих собак может отмечаться снижение рабочих качеств в периоды длительных нагрузок. При высокой интенсивности инвазии с заражением кожи нарушается периферическая нервная система, % результате чего наблюдают стойкое искривление шеи в одну сторону и парезы конечностей. Наиболее часто при дирофиляриозе встречаются: гипохромная анемия, нейтрофилия (20-80% случаев), эозинофилия (85%) и базофилия (60%).

2.3 Патологоанатомические изменения

При вскрытии обнаруживают паразитов обычно в правом желудочке и легочных артериях (D. immitis). Интенсивность инвазии бывает различной; чаще всего обнаруживают паразитов в количестве от 1 до 50 экземпляров. Однако описаны случаи нахождения 150 и более экземпляров у одной собаки. Обычно паразиты образуют клубки, обвивая сердечные клапаны. При паразитировании D. repens половозрелых гельминтов находят в подкожной клетчатке или в полостях тела животного.

2.4 Диагностика дирофиляриоза дирофиляриоз плотоядный собака болезнь

По данным многих авторов при постановке диагноза на дирофиляриоз необходимо учитывать следующие показатели: • Анамнестические данные - прибытие из эндемической области или нахождение в ней.

• Клинические признаки болезни, • Выделение микрофилярий из крови животного.

• Дополнительные лабораторные исследования

Личинок дирофилярий в крови можно обнаружить следующими лабораторными методами: · Прямая микроскопия капли свежей крови под малым увеличением микроскопа наиболее легкий, удобный и быстрый метод диагностики дирофиляриоза. Подвижные личинки паразита заметны по их активному движению между эритроцитами. Этот метод дает надежные результаты только при высокой интенсивности инвазии. Недостатками этого метода являются: трудность диагностирования дирофиляриоза при низкой интенсивности инвазии, необходимость иметь под рукой микроскоп в рабочем положении и предметные стекла, исследование необходимо проводить сразу же после взятия крови, что создает неудобства в работе. Кроме того, при малой подвижности микрофилярий их бывает трудно обнаружить среди большого количества эритроцитов. При высокой температуре окружающего воздуха, свежий мазок крови быстро высыхает, что создает дополнительные трудности в исследовании.

· Исследование цельной сыворотки крови - для исследования сыворотки крови в пробирку берут несколько миллилитров венозной крови от собаки. Кровь сворачивается, и микрофилярии мигрируют в сыворотку. Сыворотка со сгустком должна постоять в пробирке несколько часов. После этого пастеровской пипеткой берут несколько капель сыворотки со дна пробирки или из места на границе сыворотки и сгустка крови. Эти капли помещают на предметное стекло, накрывают покровным и исследуют под малым увеличением микроскопа на наличие подвижных микрофилярий. Если кровь до исследования находилась в холодильнике, то предметное стекло с каплями сыворотки выдерживают несколько минут при комнатной температуре для того, чтобы личинки дирофилярий восстановили свою подвижность. Недостатками этого метода диагностики являются: возможность постановки диагноза только через определенное время (около двух часов необходимо для отстаивания сыворотки крови). Преимущества метода: исследованиями на дирофиляриоз можно заниматься в свободное время, не отвлекаясь от основной работы; так как личинки дирофилярий сохраняют свою подвижность в сыворотке крови при комнатной температуре до трех суток, а в холодильнике при температуре 2... 4°С до одной недели. Даже после их гибели, при наличии определенного опыта, микрофилярии легко можно обнаружить в сыворотке крови. При сворачивании крови образуется сыворотка, объем которой почти в два раза меньше цельной крови, это способствует концентрации микрофилярий и облегчает их обнаружение при невысокой интенсивности инвазии. Кроме того, в сыворотке легче обнаружить микрофилярии, чем в цельной крови, так как в данном случае отсутствуют форменные элементы крови, мешающие исследованию.

· Метод Куликова - 20 мл венозной крови смешивают с 2 мл 3,8% водного раствора лимоннокислого натрия (цитрата натрия) и отстаивают 20-30 минут. По истечении этого времени в пробирке образуется 3 слоя: внизу - эритроциты, в середине - лейкоциты и микрофилярии, вверху - плазма крови. Берут пипеткой средний слой, каплями наносят на предметное стекло, накрывают покровным стеклом и исследуют при малом и среднем увеличении.

· Архиповой Д.Р. разработан количественный метод прижизненной диагностики дирофиляриозов собак основанный на применении меланжера для подсчета количества лейкоцитов и счетной камеры Фукс-Розенталя. Меланжер до метки I заполняют кровью и до метки II раствором, состоящим из ледяной уксусной кислоты, раствора фуксина и дистиллированной воды в соотношении 3:4:93. Для равномерного смешивания меланжер с кровью и раствором кладут на вибратор на 2-3 минуты. К чистой и сухой камере Фукс-Розенталя притирают покровное стекло до появления колец Ньютона. Затем раствор в меланжере встряхивают, и каплю (но не первую) раствора наносят на среднюю часть пластинки камеры и при увеличении микроскопа в 100 раз подсчитывают количество микрофилярий во всех квадратах. Полученное количество личинок умножают на 6,23, так как для 20 мм3 раствора потребовалось бы 6,23 объема камеры. Для определения количества микрофилярий в 1 мл крови число выявленных микрофилярий в 20 мм3 умножается на 50.

· Исследование крови для обнаружения микрофилярий может быть облегчено добавлением вещества, вызывающего гемолиз. При этом методе периферическую кровь собак исследуют сразу после взятия (на месте). Каплю крови помещают на предметное стекло, добавляют две капли дистиллированной воды или 1%-ного водного раствора уксусной кислоты, накрывают покровным и исследуют под малым увеличением микроскопа.

· При использовании метода с применением уксусной кислоты к 1 мл венозной крови сразу же приливают 5 мл 2%-ного раствора уксусной кислоты. Смесь центрифугируют при 1000 об/мин. В течение 3-5 минут. Надосадочную жидкость выливают, а осадок микроскопируют для обнаружения микрофилярий. При этом методе личинки погибают, и их бывает трудно обнаружить в исследуемом материале.

· Метод Руже-Мюленса - к крови добавляют пятикратный объем раствора: 5%-ный формалина 95 мл, уксусной кислоты 5 мл и концентрированного спиртового раствора генцианвиолета 2 мл. Смесь центрифугируется, надосадочная жидкость сливается, а осадок опять центрифугируют с водой и смотрят под микроскопом. Этот метод можно упростить: каплю крови помещают в пробирку с раствором и микроскопируют на следующий день.

· Метод Шуффнера - 10 капель крови помещают в 10 мл физиологического раствора, к которому предварительно добавили несколько капель раствора сапонина. После гемолиза, производят центрифугирование. Живые, подвижные личинки обнаруживаются в осадке.

· Модифицированный метод Кнотта дает хорошие результаты при практической постановке диагноза на наличие микрофилярий у собак, Метод заключается в следующем: к 1 мл венозной крови добавляют 10 мл 2%-ного раствора формалина. Этот раствор хорошо перемешивают и центрифугируют при 1500 об/мин. в течение 5 минут. Надосадочную жидкость удаляют, а осадок смешивают с равным объемом метиленового синего в разведении 1:1000 и оставляют для окрашивания на 5 минут. Окрашенный осадок микроскопируют для обнаружения фиксированных микрофилярий.

К дополнительным методам исследования относятся следующие: 1. Морфологические и биохимические исследования крови - не позволяют поставить точный диагноз на дирофиляриоз, но помогают определить патологические изменения в органах и тканях, которые могут быть связаны с дирофиляриозом. Наиболее часто при дирофиляриозе отмечают нормоцитарную, нормохромную или гипохромную анемию (гематокрит <20-30%), гемолитическую анемию, нейтрофилию, эозинофилию (85% случаев), базофилию (60% случаев), моноцитоз, тромбоцитопению. В тяжелых случаях, особенно если присутствует сердечная недостаточность, повышается активность АЛАТ и Ac AT, иногда отмечается гипербилирубинемия. Азотемия может быть внепочечного происхождения, если присутствуют дегидратация или порок сердца, или может быть вторична при гломерулонефрите. Гломерулонефрит может усложнять клиническую картину.

2. При исследовании мочи редко выявляют изостенурию, чаще наблюдается альбуминурия.

3. Рентгенография грудной полости - хотя и не является хорошим методом обнаружения дирофилярий, но позволяет косвенно определить степень инвазии по оценке легочных паренхиматозных изменений. Рентгенографические изменения, которые развиваются на ранних стадиях болезни (кардиомегалия правого желудочка, расширение легочных артерий, отчетливая демаркация легочных сосудов и периваскулярных уплотнений, особенно в каудальных долях), присутствуют в 85% случаев. Рентгенографические изменения включают увеличение правого желудочка (60% случаев), расширение легочной артерии и увеличение рентгенографической плотности легочных артерий (50%), а также извитость легочной артерии (50%). Если при этом имеет место сердечная недостаточность, то отмечается увеличение синуса полых вен, печени и селезенки, а также наблюдается плевральный выпот или асцит.

4. Эхокардиография - при высокой зараженности, когда гельминты локализуются в легочных артериях, правом желудочке и правом предсердии наблюдают: гипертрофию или расширение правого желудочка, перикардиальный выпот, парадоксальную подвижность перегородки, сплющивание и утолщение перегородки, недостаточность трехстворчатого клапана, повышение давления в легочных артериях. Электрокардиография - выявляет синусовую аритмию (тахикардию), признаки расширения правого желудочка и правого предсердия, нарушение проводимости.

5. Метод непрямой иммунофлюоресценции (МНИФ, IFA) используется для обнаружения антител к микрофиляриям и имеет специфическую полноценность при диагностике истинного дирофиляриоза, а так же тех случаев, когда личинки отсутствуют изза иммунного разрушения. При помощи иммуноферментного анализа (ИФА, ELISA) можно обнаружить антитела к дирофиляриям или сам антиген. МНИФ и ИФА разработаны за рубежом, где получили широкое распространение благодаря их точности, чувствительности, специфичности и быстроте диагностики. После успешной терапии дирофиляриоза методы ИФА (1 год) и МНИФ (6 месяцев) дают положительный результат при определении антител.

6. Лаборатория IDEXX, США, разработала новый диагностический тест, Snap 3 Dx, который одновременно диагностирует заражение собак векторными инфекционными заболеваниями: дирофиляриозом, болезнью Лайма и эрлихиозом. Тест выполняется в клинике с получением результатов через 8 минут. На Украине сделаны первые шаги в разработке нового диагностикума инвазии D. repens с помощью ПЦР (полимеразной цепной реакции).

2.5 Дифференциальная диагностика

Дирофиляриоз собак необходимо дифференцировать от демодекоза, дерматитов стафилококковой и другой этиологии, от бронхопневмоний и плевритов, пироплазмоза, лептоспироза, гломерулонефритов и асцитов незаразной этиологии.

Дифференциальная диагностика основана на обнаружении микрофилярий в крови собак, положительной реакцией на тесты МНИФ и/или ИФА. Кроме того, при выделении микрофилярий, необходимо установить их видовую принадлежность; поскольку только D. immitis и D. repens являются высокопатогенными. Быстрый и надежный метод дифференциации видов микрофилярий заключается в гистохимическом окрашивании на кислую фосфатазу.

3. Лечение

Лечение при дирофиляриозе включает в себя два этапа: 1. Применение препаратов направленных на уничтожение половозрелых особей;

2. Элиминация из организма животного личинок гельминта.

Оба этих этапа должны обязательно сопровождаться поддерживающей терапией, поскольку токсическое действие антигельминтных препаратов и токсинов паразита может привести к фатальному исходу. Кроме того, терапия при поражении половозрелыми формами гельминтов часто сопряжена с тромбоэмболическими осложнениями, особенно при высокой степени инвазии. Лечение при поражения половозрелыми формами гельминтов: арсенамид (синонимы - тиацетарсамид натрия, капарсолат) инъецируют внутривенно в дозе 0,001 г на 1кг массы тела животного ежедневно в течение 15 дней или в дозе 0,9 мл на 1кг массы (максимальная разовая доза 10 мл) один раз в месяц. Лечение можно повторить через 3-5 месяцев. Перед каждым введением за 2 недели необходимо давать витамины. Гельминты начинают погибать в течение первой недели после обработки, этот процесс завершается в пределах 3 недель. Гибнет от 46 до 96% паразитов, поэтому необходимо проведение повторных курсов. Тиацетарсамид - весьма токсичный препарат и может вызвать некроз кожи, гепаторенальную дисфункцию и эмболию легочной артерии мертвыми гельминтами. Некроз кожи можно предотвратить введением в месте инъекции физиологического раствора.

Филарсен (синонимы - дихлорофенарсин, халарсол) препарат дают внутрь в дозе 0,001 г на 1кг массы три раза в день ежедневно в течение 10 дней. Препараты мышьяка, используемые против половозрелых дирофилярий, не убивают их личинки. Они инактивируют оксидазные энзимы, содержащие сульфгидрильные группы (пируватоксидазу, трансаминазу, уреазу, печеночную холиноксидазу и др.). Животные, имеющие большую популяцию микрофилярий, исчерпывают запасы оксидазных энзимов, а введенные препараты мышьяка концентрируются в печени, где инактивируют оставшиеся оксидазы. Поэтому, побочное действие мышьяковистых препаратов на животных, больных дирофиляриозом, связано с клеточной гипоксией и аноксией: кровенаполнение, отек легких и геморрагии в этом органе, отек миокарда и гидроперикардит, токсикоз печени, тошнота, рвота, угнетение, кома и смерть. Освобождение от микрофилярий как первичного фактора, обуславливающего тканевую гипоксию в организме, снимает побочное действие препаратов мышьяка после их применения. Лучшим средством, при поражении половозрелыми формами гельминтов, является производное трехвалентной ртути, дигидрохлорид меларсамина. Было показано, что он наиболее эффективен (эффективность 94,2-95,7%) и более устойчив, чем тиацетарсамид натрия. Меларсам

Дирофиляриоз плотоядных - является эндемичной инвазией для зоны Северного Кавказа. Это заболевание все чаще попадает в поле зрения не только ветеринарных и медицинских специалистов, но и широкой массы населения. Интерес к дирофиляриозу обусловлен широкой циркуляцией возбудителя в природной среде и отсутствием надлежащих мер по выявлению и дегельминтизации зараженных животных - облигатных дефинитивных хозяев (домашних собак и кошек). Дирофиляриоз собак регистрируется уже не в единичных случаях, а массовыми поражениями животных. Истинная заболеваемость людей дирофиляриозом неизвестна, так как не ведется ее официальная регистрация. Вследствие недостаточной информированности врачей дирофиляриоз проходит под различными диагнозами непаразитарной этиологии. С 2003г. дирофиляриоз впервые включен в САНПИН 3.2 Л 333-03 "Профилактика паразитарных болезней на территории Российской Федерации". В связи с этим специалистам следует уделять больше внимания изучению данного заболевания, и поиску более эффективных методов лечения и профилактики.

1. Авдюхина Т. И., Постнова В. Ф., Абросимова Л. М. и др. Дирофиляриоз (D.repens) в Российской Федерации и некоторых странах СНГ: ситуация и тенденция ее изменения // Мед. паразитол. 2003. N 4. С. 44-48.

2. АРАКЕЛЬЯНР.С., Постнова В.Ф., Ковтунов А.И. Диагностика дирофиляриоза. // Труды Астраханской государственной медицинской академии, том № 30, 2004 г. с. 72-75.

3. Архипов И.А., Архипова Д.Р. // “Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями”. - М., 2004. - Вып. 5. - С. 42-44.

4. АРХИПОВИ.А., Архипова Д.Р. Дирофиляриоз. М., 2004. - 194 с.

5. Ветеринария № 4. 2008.- 20-21 с.

6. Державина Т.Ю.,Мертешева,А.А.Чернышева,Е.А. // Мед.паразитол.-2010.-№1.-С.46-47.

7. Корхов А.П.,Темиров Н,Э и др.//Мед.паразитол.-2009.-№1.-С.59-60.

8. Тихонова Е. П., Кузьмина Т. Ю., Тихонова Ю. С/ Сибирское медицинское обозрение. - Красноярск: Красноярский государственный медицинский университет, 2010. - № 3. - С. 99-101

9. Уркхарт Г, Эрмур Дж. Ветеринарная паразитология. М: Аквариум, 2000 г

10. Фисько М.А., Фирисов Н.Ф. Дирофиляриоз. Ростов н/Д, 2006. 110 с.

11. Х.Г. Ниманд, П.Ф. Сутер. Болезни собак. - М: Аквариум, 1998 г

Размещено на