Діагностичне та патогенетичне значення матриксної металопротеїнази-9 у хворих на демієлінізуючі та інфекційні захворювання нервової системи - Автореферат

Демієлінізуючі захворювання нервової системи до цього часу залишаються найбільш актуальною проблемою сучасної неврології. Останнє нерозривно повязано з поглибленим дослідженням різноманітних ланок патогенезу даного захворювання, у вивченні якого зберігається ще достатньо білих плям (І.А. Метою роботи стало уточнення ролі ММП-9 та її тканинного інгібітора (ТІМП-1) в патогенезі демієлінізуючих захворювань нервової системи в порівнянні з інфекційними і розробка на основі цього нових підходів у діагностиці та лікуванні розсіяного склерозу. Вивчити концентрації ММП-9 та ТІМП-1 у сироватці та лікворі хворих на демієлінізуючі захворювання нервової системи (розсіяний склероз) у порівнянні з інфекційною патологією ЦНС. Вивчити динаміку вищеназваних показників у хворих на розсіяний склероз та з інфекційною патологією в залежності від різних параметрів спинномозкової рідини (цитоз, порушення барєрної функції, тощо).Всього було обстежено 20 здорових осіб і 153 хворих з різноманітною неврологічною патологією. Серед останніх у 60 пацієнтів було діагностовано згідно критеріїв Позера достовірний РС та у 47 - інфекційні захворювання ЦНС (у 35 - бактеріальний менінгіт і у 12 - вірусний). Як групу порівняння досліджували 14 хворих боковим аміотрофічним склерозом (БАС) та 32 пацієнти з іншою неврологічною патологією, спинномозкова рідина яких характеризувалася відсутністю або наявністю ознак запалення та нормальною або порушеною функцією гематоенцефалічного барєра (ГЕБ). Клінічна характеристика хворих: Серед 60 хворих на РС (23 чоловіки та 37 жінок віком від 18 до 64 років) переважали хворі з реміттуючим перебігом захворювання (29), менше було пацієнтів з первинно-прогресуючим РС (19), у 12 пацієнтів діагноз РС було встановлено вперше в житті. Кореляція між концентрацією ММП-9 та числом клітин у лікворі була високо достовірною (p<0,0001), в той час як кореляція між концентрацією ММП-9 та QАЛЬБ. була незначною, а кореляція між QММП-9 та QАЛЬБ. була ще менш суттєвою.При загостренні РС у лікворі реєструвався цілий ланцюг параметрів, що вказують на екзацербацію процесу: плеоцитоз лімфоцитарного характеру з домішкою IGG-позитивних плазматичних клітин, легке порушення проникності гематоенцефалічного барєра, інтратекальний синтез імуноглобулінів, олігоклональні IGG-волокна та підвищений титр антитіл до вірусів кору, краснухи простого герпесу й оперізуючого лишаю, MRZ-реакція. У пацієнтів із інфекційною патологією ЦНС на відміну від хворих на РС та БАС виявлялось суттєве зростання концентрації ММП-9 у лікворі при недостатньому зростанні вмісту її інгібітора - ТІМП-1, що свідчило про порушення ензимного гомеостазу. Вміст ММП-9 був найвищим у хворих з гранулоцитарним плеоцитозом (бактеріальний менінгіт) та найнижчим у хворих із переважно лімфоцитарним (вірусні захворювання). Рівні ММП-9 та ТІМП-1 у сироватці крові були підвищеними як у хворих із інфекційною патологією (БМ, ВМ), так і у хворих на РС. Підвищення концентрації ММП-9 та ТІМП-1 в сироватці хворих розсіяним склерозом вище норми (1827 нг /мл та 637 нг /мл відповідно) навіть при відсутності неврологічної симптоматики та інших лабораторних ознак є свідченням загострення хвороби та потребує призначення лікування для запобігання подальшому прогресуванню запального процесу.

ОСНОВНИЙ ЗМІСТ РОБОТИ

У дисертації наведені теоретичне узагальнення та нове рішення задачі - уточнення ролі ММП-9 та її тканинного інгібітора ТІМП-1 у патогенезі демієлінізуючих захворювань нервової системи у порівнянні з іншими інфекціями ЦНС та розробка на основі цього нових підходів до діагностики та критеріїв ефективності лікування розсіяного склерозу.

2. При загостренні РС у лікворі реєструвався цілий ланцюг параметрів, що вказують на екзацербацію процесу: плеоцитоз лімфоцитарного характеру з домішкою IGG-позитивних плазматичних клітин, легке порушення проникності гематоенцефалічного барєра, інтратекальний синтез імуноглобулінів, олігоклональні IGG-волокна та підвищений титр антитіл до вірусів кору, краснухи простого герпесу й оперізуючого лишаю, MRZ-реакція.

3. ММП-9 у спинномозковій рідині хворих на розсіяний склероз та нейродегенеративні захворювання (БАС) не виявлялася. У пацієнтів із інфекційною патологією ЦНС на відміну від хворих на РС та БАС виявлялось суттєве зростання концентрації ММП-9 у лікворі при недостатньому зростанні вмісту її інгібітора - ТІМП-1, що свідчило про порушення ензимного гомеостазу.

4. Підвищення вмісту ММП-9 у лікворі не залежало від стану барєрної функції, а знаходилось у прямій залежності від вираженості плеоцитозу, а також клітинного складу. Вміст ММП-9 був найвищим у хворих з гранулоцитарним плеоцитозом (бактеріальний менінгіт) та найнижчим у хворих із переважно лімфоцитарним (вірусні захворювання). Тому ММП-9 може розглядатися як маркер імунокомпетентних клітин, а визначення її у лікворі застосовуватись як альтернативний метод дослідження при проведенні диференціальної діагностики між інфекційними та неінфекційними захворюваннями центральної нервової системи.

5. Рівні ММП-9 та ТІМП-1 у сироватці крові були підвищеними як у хворих із інфекційною патологією (БМ, ВМ), так і у хворих на РС. При демієлінізуючій патології вони були нижчими, ніж при інфекційній. При загостренні реміттуючого РС відбувалося одночасне зростання вмісту ММП-9 та ТІМП-1 у сироватці без порушення нормального взаємовідношення між ензимом та інгібітором, що свідчить про збереження ензимного гомеостазу.

6. Для хворих на первинно-прогресуючий розсіяний склероз було характерним порушення взаємовідношення між ензимом та його інгібітором сироватки, що свідчило про виснаження компенсаторних механізмів регуляції активності ММП.

7. Стабілізація РС супроводжувалась зниженням вмісту ММП-9 у сироватці та нормалізацією порушених взаємовідношень між ММП-9 та ТІМП-1. При неефективному лікуванні зберігалися підвищений вміст ММП-9 і ТІМП-1 та / або порушення співвідношення між ними. Визначення концентрації ММП-9 і ТІМП-1 у сироватці хворих на розсіяний склероз може служити критерієм ефективності терапії та показником, що дозволяє прогнозувати розвиток можливої екзацербації та бути підставою для призначення профілактичного лікування.

ПРАКТИЧНІ РЕКОМЕНДАЦІЇ

1. Вміст ММП-9 у лікворі може використовуватися як диференціально-діагностичний критерій при відсутності можливості дослідження цитозу спинномозкової рідини. Підвищення концентрації ММП-9 у лікворі вище норми (< 6 нг /мл) слід розцінювати як ознаку інфекційно-запалювального процесу в ЦНС.

2. Визначення концентрації ММП-9 і ТІМП-1 у сироватці хворих на розсіяний склероз може служити критерієм ефективності терапії. Якщо в процесі лікування не досягнуто нормалізації вмісту ММП-9 і ТІМП-1 та взаємовідношення між ними, то незважаючи на позитивну клініко-неврологічну динаміку терапію доцільно продовжити.

3. Підвищення концентрації ММП-9 та ТІМП-1 в сироватці хворих розсіяним склерозом вище норми (1827 нг /мл та 637 нг /мл відповідно) навіть при відсутності неврологічної симптоматики та інших лабораторних ознак є свідченням загострення хвороби та потребує призначення лікування для запобігання подальшому прогресуванню запального процесу. склероз інфекційний нервовий розсіяний

Перелік робіт, опублікованих за темою дисертації

1. Ющенко М.Л. Диференційоване застосування плазмаферезу в лікуванні хворих на розсіяний склероз // Експериментальна і клінічна медицина. - 1999.-т.2, № 1.-с.104-115

2. Ющенко М.Л. Матрикс металлопротеиназы при заболеваниях нервной системы воспалительного и невоспалительного генеза // Медицина сегодня и завтра.- 2000.- № 1.-с.69-72

3. Ющенко М.Л. Биохимические и иммунологические изменения в ликворе больных рассеянным склерозом в период обострения заболевания // Український вісник психоневрології.-2000.-т.8, № 3.-с.25-27

4. Ющенко М.Л. Динамика содержания матрикс металлопротеиназы-9 и ее тканевого ингибитора ТІМР-1 в сыворотке больных рассеянным склерозом при лечении ?-интерфероном // Медицина сегодня и завтра.- 2001.-№ 1.- с.94-96

5. Ющенко М.Л. Роль содержания эндогенных протеиназ и их тканевых ингибиторов в диагностике обострений рассеянного склероза // Врачебная практика.- 2001.- № 1 с. 71-73

6. Деклараційний патент на винахід 31310А, Україна, МКИ А 61 М 1/10, А 61 М 1/14, А 61 М 1/36. Спосіб лікування хворих на розсіяний склероз / Дубенко Є.Г., Ющенко М.Л., Лопатченко Є.К.- № 98084235; заявлено 04.08.1998, опубл. 29.03.2000 Бюл. № 2; опубл. 15.12.2000 Бюл. № 7-11 (Ющенко М.Л особисто відбирались хворі на РС для лікування плазмафарезом, проаналізовані результати лікування, оформлена заявка на винахід).

7. Yushchenko M., Mader M., Bitsch A., Kitze B., Bogumil T., Dressel A., Kolb A., Elitok E., Bahner D., Poser S. and Weber F. Treatment with interferon-в1b (IFN-в1b) suppressed serum level of matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) in patients with primary progressive multiple sclerosis (PPMS) // Multiple sclerosis. Clinicel and laboratory research: Ectrims / Actrims 99 15th congr. of the Europ.Comm. for Treatment and Research in Multiple Sclerosis: 4th Annual Meeting of Americas Comm. for Treatment and Research in Multiple Sclerosis Basel / Switzerland September 15-18, 1999 Joint RIMS-CMSC Symposium Basel / Switzerland September 14-16, 1999.-№ 67 (Ющенко М.Л. особисто проведено дослідження вмісту ММП-9 та ТІМП-1 методом ELISA та цимографії в лікворі та сироватці хворих, проаналізовано отримані результати).

8. Wolfgang Beuche, Maryna Yushchenko, Michael Mader, Malgorzata Mali-schewska, Klaus Felgenhauer, Frank Weber Matrix metalloproteinase-9 is elevated in serum of patients with amyotrophic lateral sclerosis // NEUROREPORT.- 2000.-Vol. 11, № 16.- p.3419-3422 (Ющенко М.Л. особисто проведено дослідження вмісту ММП-9 та ТІМП-1 методом ELISA та цимографії в лікворі та сироватці хворих, проаналізовано отримані результати).

9. Maryna Yushchenko, Frank Weber, Michael Mader, Ulrike Scholl, Malgorzata Malischewska, Hayrettin Tumani, Klaus Felgenhauer, Wolfgang Beuche Matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) in human cerebrospinal fluid (CSF): elevated levels are primarily-related to CSF cell count // Journal of Neuroimmunology.-2000.- 110,1-2.- p.244-251

(Ющенко М.Л. особисто проведено дослідження ММП-9 методом ELISA та цимографії у лікворі та сироватці хворих, проаналізовано отримані результати).

10. Yushchenko M., Weber F., Malischewska M., Azeh I., Tumani H. Felgenhauer K., Mader M., Beuche W. Matrix-Metalloproteinase-9 (MMP-9) im Liquor: Die Konzentration korreliert primar mit der Zellzal und nicht mit der Schrankenfunktion Abstracts 7 Forschungskonferenz der Neurologischen Klinik und Poster Followup des Neurologen-Kongresses 99.-Gottingen, 3.2 - 5.2.2000 (Ющенко М.Л. особисто проведено дослідження вмісту ММП-9 у лікворі та сироватці хворих).

11. Maryna Yushchenko, W. Beuche, Malgorzata Malischewska, K. Felgenhauer, M. Mader und F. Weber Matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) im Serum von Patienten mit amyotrophischer Lateralsclerose // Abstracts Abschiedssymposium fur prof. Dr. K.Felgenhauer 8 Forschungskonferenz der Neurologischen Klinik 3. Poster Followup Baden - Baden.- Gottingen, 18.1 - 20.1.2001(Ющенко М.Л. особисто проведено визначення вмісту ММП-9 та ТІМП-1 у сироватці та лікворі хворих).