Дослідження стану різних фондів тривалентного заліза в плазмі крові щурів при гіперпродукції. Вивчення властивостей екзогенного акцептору на основі комплексу унітіолу з залізо-аскорбатом. Визначення особливостей динаміки вмісту нітрозильних комплексів.
Аннотация к работе
При низьких (фізіологічних) концентраціях він як внутрішньо-клітинний та міжклітинний месенджер здійснює в організмі важливі сигнальні і регуляторні функції, зокрема, контролює активність гуанілатциклази і ряду інших ключових ферментів, тонус судин, нейромедіацію, агрегацію тромбоцитів, функцію клітин імунної системи тощо (Moncada S. et all,1999, Palmer R. et all, 1988). Високі концентрації NO в організмі можуть створюватися екзогенними та ендогенними чинниками. Надходження в організм екзогенних донорів NO (оксидів азоту, N-и S-нітрозосполук, неорганічних і органічних нітратів тощо), які є одними з основних антропогенних забруднювачів довкілля, може збільшувати концентрацію NO до токсичного рівня, і це є небезпека для здоровя людини. Мета та задачі дослідження: Метою роботи було дослідити методом ЕПР закономірності змін обміну NO в організмі щурів за умов його гіперпродукції, що викликана різними чинниками, та можливість корекції цих порушень. Дослідити динаміку вмісту нітрозильних комплексів в умовах підвищення рівня NO в організмі з екзогенних джерел (інтоксикація щурів, що викликана нітритом натрію та нітропрусидом натрію) та активації ендогенного синтезу NO у щурів (інєкції вакцини БЦЖ та інтратрахеальна інсталяція азбестового волокна).За допомогою методу електронного парамагнітного резонансу (ЕПР) виявлені раніше невідомі особливості обміну NO в організмі в умовах його гіперпродукції, встановлені нові шляхи регуляції обміну заліза в плазмі крові і розроблені методи корекції порушень обміну NO, а саме: 1.Гіперпродукція NO за рахунок екзогенних джерел (разове введення щурам нітропрусиду натрію (30мг/кг) та субхронічне введення нітриту натрію (12 мг/кг)) призводить до появи нітрозильного комплексу гемоглобіну Hb-NO (38 МКМ і 4,6 МКМ відповідно) та зростання кількості метгемоглобіну (в 4,6 і 3,6 разів) в крові, утворення динітрозильних комплексів негемового заліза DNIC (7,9 МКМ і 3,4 МКМ) в тканині печінки. 2.Введення щурам вакцини БЦЖ перитоніально і азбестового волокна інтратрахеально призводить до збільшення кількості NO в різних тканинах організму, появі DNIC в печінці та макрофагах, Hb-NO в крові та збільшення METHB. 3.Збільшення в організмі щурів рівня NO, що викликано індукцією його синтезу, на відміну від дії екзогенних донорів NO, пригнічує електронтранспортні процеси в мітохондріях. Кількість лабільного Fe 3 в крові може бути використаною як діагностичний показник зростання рівня NO в організмі людей і тварин. Препарат конкурує за звязування NO з гемоглобіном і має цитопротекторні властивості при дії на тимоцити донорів NO.
План
ОСНОВНИЙ ЗМІСТ РОБОТИ
Вывод
За допомогою методу електронного парамагнітного резонансу (ЕПР) виявлені раніше невідомі особливості обміну NO в організмі в умовах його гіперпродукції, встановлені нові шляхи регуляції обміну заліза в плазмі крові і розроблені методи корекції порушень обміну NO, а саме: 1.Гіперпродукція NO за рахунок екзогенних джерел (разове введення щурам нітропрусиду натрію (30мг/кг) та субхронічне введення нітриту натрію (12 мг/кг)) призводить до появи нітрозильного комплексу гемоглобіну Hb-NO (38 МКМ і 4,6 МКМ відповідно) та зростання кількості метгемоглобіну (в 4,6 і 3,6 разів) в крові, утворення динітрозильних комплексів негемового заліза DNIC (7,9 МКМ і 3,4 МКМ) в тканині печінки. Нормалізація цих змін у часі збільшується в такій послідовності: Hb-NO, DNIC, METHB.
2.Введення щурам вакцини БЦЖ перитоніально і азбестового волокна інтратрахеально призводить до збільшення кількості NO в різних тканинах організму, появі DNIC в печінці та макрофагах, Hb-NO в крові та збільшення METHB. Під впливом обох чинників зміни вказаних показників мають схожу динаміку і тісно корелюють між собою. Максимальне їх збільшення відбувається на 10-тий день, а коефіцієнт кореляції між DNIC та METHB становить 0,95-0,97 (p<0.05), що дозволяє розглядати метгемоглобінемію як наслідок виникнення нітрозативного стресу.
3.Збільшення в організмі щурів рівня NO, що викликано індукцією його синтезу, на відміну від дії екзогенних донорів NO, пригнічує електронтранспортні процеси в мітохондріях.
4.Індукована різними чинниками гіперпродукція NO в організмі супроводжується накопиченням в плазмі крові лабільного окисленого заліза Fe 3 та зменшенням його вмісту в трансферині. Кількість лабільного Fe 3 в крові може бути використаною як діагностичний показник зростання рівня NO в організмі людей і тварин.
5.Створено препарат “Нітоксидел” - залізосірчаний комплекс унітіолу з залізо-аскорбатом, що здатен утворювати з NO динітрозильний комплекс, який є більш стійким, ніж природні DNIC. Препарат конкурує за звязування NO з гемоглобіном і має цитопротекторні властивості при дії на тимоцити донорів NO.
6.Препарат “Нітоксодел” зменшує прояви нітрозативного стресу у щурів, що викликаний введенням донорів NO і вакцини БЦЖ.
2. Дмитренко Н.П., Сноз С.В., Шандренко С.Г., Кишко Т.О., Смердова Л.Н., Веременко Л.М. Влияние акцепторов оксида азота на критериально значащие биохимические показатели у крыс с нитритной нагрузкой // Современные проблемы токсикологии. - 1998. - № 1. - С.24-28.
3. Кишко Т.О., Шандренко С.Г., Дмитренко Н.П. Об участии оксида азота и супероксида в апоптозе тимоцитов, визванном папаверином и нитропруссидом натрия // Современные проблемы токсикологии. - 2001. - № 1. - С. 26-31.
4. Дмитренко М.П.,Шандренко С.Г. ЭПР-ные характеристики, отражающие синтез оксида азота у крыс в ответна инъекцию вакцины БЦЖ// Укр. біохім. журн. - 2001.-73,№3.-С.55-60.
5. Дмитренко Н.П., Кишко Т.О., Шандренко С.Г. О роли ксантиноксидази в цитотоксическом действии нитратов и нитритов // Укр. біохім. журн. -2001. - 73, №6. - С.113-118.
6. Горпинченко И.И., Дмитренко Н.П., Мирошников Я.О., Шандренко С.Г. Лечение больных с эрекционной дисфункцией воздействием на обмен оксида азота// Журн. АМН України. - 2001. - 7, №2. - С.364-368.
7. Дмитренко М.П., Смердова Л.Н.,Шандренко С.Г. Метод визначення участі оксиду азоту в механізмі дії хімічних речовин// Современные проблемы токсикологии.-2002.- №4.- С.93-95
8. Проданчук Г.Н., Шандренко С.Г., Кишко Т.О., Дмитренко Н.П. Новые аспекты механизма токсического действия гидроксиламина// Современные проблемы токсикологии. - 2006.- №1.-С.37-46
9. Дмитренко М.П., Михайленко В.М., Главин А.А., Сноз С.В., Кишко Т.О., Шандренко С.Г., Смердова Л.Н. Обмен N-нитрозодиметиламина у крыс со стрептозотоциновым диабетом// Современные проблемы токсикологии.-2006.- № 4.- С.21-26.
10. Дмитренко Н.П., Кузьминский С.М., Попко В.І., Сноз С.В., Щандренко С.Г., Шиліна В.Ф. Вивчення впливу нового акцептора оксиду азоту імуферину на деякі показники стану імунітету// Збірник тез. першої національної науково-практичної конференції з проблем ВІЛ/СНІД. Київ, 24-26 січня 1995 р. - С.87-88.
11. Дмитренко Н.П., Шандренко С.Г., Сисецький А.П. Альтернативні варианти біохімічних ефектів дії нітратів на організм людей з ішемічною хворобою серця //Тези доп. VII Укр. біохім. зїзду. Київ, 1997. -ч.І. - С.125-126
12. Дмитренко М.П., Сноз С.В., Шандренко С.Г., Кішко Т.О., Смердова Л.М., Веременко Л.М. Вплив акцепторів оксиду азоту на критеріально значущі біохімічні показники щурів з нітритною інтоксикацією // Тези доп. VII Укр. біохім. зїзду. Київ, 3-6 вересня 1997 р.- ч.ІІІ.- С.25-26.
13. Dmitrenko N.P., Shandrenko S.G., Snoz S.V., Kishko T.O., Smerdova L.N. Investigation the new drug nitoxidel - nitric oxides acceptor // Abstracti of 2-nd Parnas Conference. Gdansk, Arthurs Court, 11-13 September 1998. - P. 46
14. Горпинченко І.І., Дмитренко М.П., Мирошников Я.О., Шандренко С.Г. Застосування комплексної методики індукування виробки монооксиду азоту в лікуванні хворих з еректильною дисфункцією// Матеріали конференції "Актуальні проблеми фармакології і токсикології".Київ, 7-8 грудня 2000 р.- С.9-10
15. N.P.Dmitrenko, T.O.Kishko, S.G. Shandrenko. About a role of xanthine oxidase in reduction and displaying of cytotoxic action nitrate and nitrite// Abstracts of EUROTOX. Turkey, Istanbul, Military Museum, 13-16 September 2001.- Toxicol.Lett.-2001.-123.-Supl.1.-Р.41
16. M.Dmitrenko, L.Smerdova, S.Shandrenko. N0 role in N-nitrosodimethylamine, Sodium nitroprusside and nitroglycerine cytotoxic action to rat peritoneal macrophages// Abstracts of EUROTOX. Turkey, Istanbul, Military Museum, 13-16 September 2001.- Toxicol.Lett.-2001.-123.-Supl.1.-Р.79.
17. Kishko T.O., Shandrenko S.G., Dmitrenko M.P. Cytotoxic action of nitrate and nitrite due to nitrate reductase activity of xanthine oxidase system in rat organism // Programme and Abstract of Intracellular Signalling in Plant and Animal Systems (ISPAS). Kyiv, Ukraine, 9-14 September, 2001.
18. М.П.Дмитренко, Т.О.Кішко, С.Г.Шандренко. Роль ксантиноксидоредуктази в механізмі цитотоксичної дії як ферментної системи, що синтезує активовані кисневі метаболіти і відновлює нітрати// Тези доповідей І зїзду Токсикологів України. Київ, 11-13 жовтня 2001 р. - С.52-53.
19. Л.М.Смердова, С.Г.Шандренко. Дослідження цитотоксичної дії донорів оксиду азоту на перитоніальні макрофаги щурів за допомогою пастки NO// Матеріали VIII Українського біохімічного зїзду. Чернівці, 1-3 жовтня 2002р. -Укр.біохім.журнал, -74,№4а, - 2002. -С.82.
20. Дмитренко Н.П., Шандренко С.Г. Коррекция уровня оксида азота в организме//Материалы научной конференции "Медикобиологические проблемы противолучевой и противохимической защиты. Россия, Санкт-Петербург, 20-21 мая 2004 г. - С.340-341.
21. Шандренко С.Г., Кишко Т.О., Дмитренко М.П., Сноз С.В., Шиліна В.Ф. NO синтез при азбестовій інтоксикації// Тези доповідей ІІ зїзду токсикологів України. Київ, 12-14 жовтня 2004 р. - С.52-53.
22. Шандренко С.Г. Утворення лабільного Fe3 в крові при підвищенні рівня оксиду азоту // Тези доповідей ІІ зїзду токсикологів України. Київ, 2004. - С.135-136.
23. Проданчук Г.М., Шандренко С.Г., Кішко Т.О., Дмитренко М.П. Особливості токсичної дії гідроксиламіну // Тези доповідей ІІ зїзду токсикологів України. Київ, 12-14 жовтня 2004 р. - С.69-70.
24. Проданчук Г.Н., Шандренко С.Г., Кишко Т.О., Дмитренко Н.П. Новые аспекты в механизме токсического действия гидроксиламина// Тези доповідей VI Міжнародної науково-практичної конференції "Актуальні проблеми токсикології. Безпека життєдіяльності людини" присвяченої 100-річчю з дня народження Л.І.Медведя. Київ, 1-3 жовтня 2005 р.- С.58-59
25. Спосіб зниження рівня оксиду азоту в організмі людини і тварин: Патент на винахід UA 21154/ Дмитренко М.П., Шандренко С.Г. - №95073456; Заявл. 24.07.95; Опубл. 27.02.08, Бюл. №1.
Спосіб визначення сумарного вмісту N-нітрозоамінів: Патент на винахід UA 17375/Дмитренко М.П., Шандренко С.Г., Кішко Т.О. - №960205552; Заявл. 15.02.96; Опубл. 31.10.97, Бюл. №5.