Изучение препаратов наружной мембраны, мочевинных экстрактов и супернатантов культуральной жидкости 16 штаммов V. cholerae El Tor О1 и О139 серогрупп разного происхождения. Выявление гидролазов методом субстратного электрофореза в полиакриламидном геле.
Аннотация к работе
В работе использовано 16 штаммов V. cholerae О1 El Tor и V. cholerae О139, полученных из музея живых культур Иркутского противочумного института, которые были разделены на две группы: первая группа - токсигенные штаммы, выделенные от больных и из ООС во время вспышки холеры, вторая группа - нетоксигенные штаммы, выделенные из ООС в благополучный по холере период. 1, 2, 3, 4, 5), что субклеточные фракции (препараты НМ и МЭ), а также препараты СКЖ, полученные из большинства штаммов холерного вибриона Эль Тор и холерного вибриона O139 серогруппы, содержат гидролазы, обладающие хитозаназной, липолитической, лецитиназной, муциназной, РНКАЗНОЙ и протеазной активностью. С применением зимографического метода показано, что в препаратах СКЖ токсигенного V. cholerae O1 биовара Эль Тор (И-1300) и четырех нетоксигенных штаммов этого биовара (129-05-B, И-1368, И-638, И-680) обнаружено 8-9 полипептидов с хитозаназной активностью (рис 1А, Б треки 2, 3, 4, 7, 8). У препаратов МЭ, полученных из взятых в исследование штаммов обнаружено от одного до пяти полипептидов с хитозаназной активностью, у препаратов НМ отмечается от одной до четырех активных полипептидных полос, менее интенсивно гидролизующих субстрат. Анализ гелей после переноса при исследовании липолитической активности в субклеточных фракциях показал, что препарат МЭ токсигенного штамма V. cholerae Эль Тор O1 М-878 содержит шесть активных белков (рис.
Список литературы
мембрана серогруппа супернатант штамм
1. Адамов А.К. Метаболический иммунитет к холере / А.К. Адамов - Саратов: Изд-во Саратовского университета., 1982. - 176 с.
2. Ашмарин И.П., Воробьев А.А. Статистические методы в микробиологических исследованиях / И.П. Ашмарин, А.А. Воробьев. - Л.: Медгиз., 1962. - 180 с.
4. Finkelstein R.A. Vibrio cholerae hemagglutinin/protease, colonial variation, virulence, and detachment / R.A. Finkelstein, M Boesman-Finkelstein, Y. Chang, [et al.] // Infect. Immun. - 1992. - Vol.60, N2. - P.472-478.
5. Galen J.E. Role of Vibrio cholerae neuraminidase in the function of cholera toxin / J.E. Galen, J.M. Ketley, A. Fasano [et al.] // Infect. Immun. - 1992. - Vol.60, N2. - P. 1358-1362.
6. Heussen C. Electrophoretic analysis of plasminogen activators in polyacrylamide gels containing sodium dodecyl sulfate and copolymerized substrates / C. Heussen, E.B. Dowdle // Anal. Biochem. - 1980. - Vol.102, N1. - P. 196-202.
7. Lantz M.S. Zymographic techniques for detection and characterization of microbial proteases / M.S. Lantz, P. Ciborowski // Methods Enzymol. - 1994. - Vol.235. - P. 563-594.
8. Mondal M. The Vibrio cholerae extracellular chitinase CHIA2 is important for survival and pathogenesis in the host intestine / M. Mondal, D. Nag, H. Koley [et al.] // PLOS One. - 2014. - Vol. 9, N9. - P. e103119.
9. Seper A. Extracellular nucleases and extracellular DNA play important roles in Vibrio cholerae biofilm formation / A. Seper, V.H.I. Fengler, S. Roier [et al.] // Mol. Microbiol. - 2011. - Vol. 82, N4. - P. 1015-1037.
10. Shinoda S. Proteases produced by Vibrio cholerae and other pathogenic vibrios: pathogenic roles and expression / S. Shinoda - New York: Springer, 2011. - P. 245-258.
11. Zang P. Targeting druggable enzymome by exploiting natural medicines: An in silico-in vitro integrated approach to combating multidrug resistance in bacterial infection / P. Zang, A. Gong, P. Zhang [et al.] // Pharm. Biol. - 2016. - Vol.54, N4. - P. 604-618.