Вплив основних медіаторних систем організму на експресію поверхневих глікопротеїдів лейкоцитів - Автореферат

Однак відсутні дані про звязок між експресією манозомістних мембранних структур (МММС) лейкоцитів та відомими показниками їх функціональної активності, не вивчено, як змінюються ці структури під впливом медіаторів і регуляторних пептидів і які перетворення відбуваються в них за умов експериментальної патології. Враховуючи важливість МММС лейкоцитів у реалізації їх функціональної активності, необхідно дослідити вплив основних медіаторів організму та регуляторних пептидів на їх експресію. Дослідження є плановою науково-дослідною роботою Української медичної стоматологічної академії (Полтава) "Вплив основних медіаторних систем організму на експресію деяких поверхневих глікопротеїдів лейкоцитів", номер держреєстрації 0196U021066, та фрагментом тем: “Вивчення механізмів взаємодії тканинних пептидів та імунокомпетентних клітин”, номер держреєстрації 0197U014012, і науково-дослідної роботи, що фінансується за Державним контрактом, “Створення лікарських біопрепаратів вермілат, панкреолат, нефролат (тваринного походження) та організація їх промислового виробництва”, № держреєстрації 0199U001598. На основі визначення експресії МММС лейкоцитів вивчити роль основних медіаторних систем організму та пептидних комплексів у регуляції функціонального стану лейкоцитів для поглиблення знань про фізіологічну регуляцію клітин імунної системи. Вивчити вплив адренергічних, пуринергічних, гістамінергічних, холінергічних медіаторів та регуляторних пептидних комплексів на експресію МММС лейкоцитів. лейкоцит експресія манозомістний мембраннийДля визначення можливості використання модифікованого методу для оцінки функціонального стану лейкоцитів був проведений кореляційний аналіз між експресією МММС лімфоцитів і ПМЯЛ та відомими показниками їх функціональної активності. На Т-лімфоцитах визначали рівень експресії мембранного маркеру CD3 і на В-лімфоцитах - CD22 за допомогою непрямого імунофлуоресцентного методу [С. Кальцієвим іонофором А 23187 (SIGMA, США) у концентраціях 50; 100 i 200 НМ проводили активацію кальцієвих каналів, 10 % розчином ізоптину (KNOL, Німеччина) в концентраціях 0,12; 0,24 і 0,48 МКМ - блокаду кальцієвих каналів. Для дослідження впливу регуляторних пептидів на експресію МММС лімфоцитів та ПМЯЛ при патологіях, повязаних із порушенням медіаторних систем організму, були проведені досліди in vivo. Блокада a-, b-адренорецепторів кордароном у концентрації 98,3 НМ знижувала експресію МММС лімфоцитів на 47 %, а в концентрації 2,0 МКМ - підвищувала на 31 %.На грунті аналізу експресії манозомістних мембранних структур лейкоцитів в модельних системах in vitro та за умов експериментальної патології показано, що досліджені медіаторні системи організму та регуляторні пептидні комплекси впливають на їх функціональний стан. На основі виявлення впливу модуляції адренергічної, пуринергічної, холінергічної та гістамінергічної систем організму на експресію манозомістних мембранних структур лейкоцитів показано, що ефекти адренергічної системи реалізуються переважно через ?-адренорецептори; активація пурино-і холінорецепторів викликає посилення експресії манозомістних мембранних структур лейкоцитів; ефекти гістамінергичної системи реалізуються на лімфоцитах переважно через гістамінові Н2-рецептори, на поліморфноядерних лейкоцитах - через гістамінові Н1-рецептори.

Основний зміст роботи

На грунті аналізу експресії манозомістних мембранних структур лейкоцитів в модельних системах in vitro та за умов експериментальної патології показано, що досліджені медіаторні системи організму та регуляторні пептидні комплекси впливають на їх функціональний стан.

Запропонована модифікація непрямого лектин-пероксидазного методу дає можливість оцінювати функціональний стан лейкоцитів на основі аналізу експресії манозомістних мембранних структур цих клітин, яка корелює з фагоцитарною активністю та лізосомальними катіонними білками поліморфноядерних лейкоцитів і з мембранними маркерами лімфоцитів CD3, CD22.

На основі виявлення впливу модуляції адренергічної, пуринергічної, холінергічної та гістамінергічної систем організму на експресію манозомістних мембранних структур лейкоцитів показано, що ефекти адренергічної системи реалізуються переважно через ?-адренорецептори; активація пурино- і холінорецепторів викликає посилення експресії манозомістних мембранних структур лейкоцитів; ефекти гістамінергичної системи реалізуються на лімфоцитах переважно через гістамінові Н2-рецептори, на поліморфноядерних лейкоцитах - через гістамінові Н1-рецептори.

Активація кальцієвих каналів іонофором А 23187 посилює експресію манозомістних мембранних структур лімфоцитів та поліморфноядерних лейкоцитів; блокада кальцієвих каналів ізоптином у концентраціях 0,12 і 0,48 МКМ зменшує їх експресію, що свідчить про кальційзалежний характер експресії манозомістних мембранних структур.

Інсулін, як ростовий фактор, дозозалежно збільшує експресію манозомістних мембранних структур лімфоцитів та поліморфноядерних лейкоцитів.

Антиоксидант мексидол посилює експресію манозомістних мембранних структур лімфоцитів, а поліморфноядерних лейкоцитів - знижує.

Пептидні комплекси вермілату, нирок та фрагменти гемоглобіну у нормі знижують експресію манозомістних мембранних структур лімфоцитів та поліморфноядерних лейкоцитів.

Регуляторні пептидні комплекси позитивно впливають на функціональний стан лейкоцитів при патологічних станах, зокрема пітуїтрин нормалізує експресію манозомістних мембранних структур лімфоцитів при гострому стресі; пептидний комплекс печінки - при інтоксикації тетрахлорметаном; синтетичний пептид Про-Глу-Ліз-Асп-Арг-Лей - при аутоімунному нефриті; кордіалат та вермілат нормалізує експресію манозомістних мембранних структур при інфаркті міокарду; пептидні фрагменти гемоглобіну і природний комплекс нирок здатні знижувати ці показники відповідно при фенілгідразиновій анемії та аутоімунному нефриті.

1. Боброва Н.А., Куценко Л.А. Пептидергическая регуляция экспрессии маннозосо держащих мембранных структур лейкоцитов при экспериментальном инфаркте миокарда // Проблеми екології та медицини. 1997. Т. 1, № 1-2. С. 27-29.

2. Боброва Н.А., Кайдашев И.П. Влияние некоторых медиаторов на экспрессию маннозосодержащих структур мембран лейкоцитов in vitro // Иммунология. 1998. № 1. С. 13-15.

3. Гейко О.А., Боброва Н.А., Кайдашев И.П. Сравнительное изучение активности естественного пептидного комплекса почек и его синтетических аналогов при аутоиммунном нефрите // Экспериметальная и клиническая фармакология. 1998. Т. 61, № 4. С. 44-47.

4. Запорожець Т.М., Боброва Н.О., Кайдашев І.П. Зміни експресії манозовміщуючих мембранних структур лейкоцитів під впливом пептидного комплексу гемоглобіну у здорових тварин та за умов гемолітичної анемії // Проблеми екології та медицини. 1999. Т. 3, № 1-2. С. 132-134.

5. Боброва Н.А., Важничая Е.М., Кайдашев И.П. Влияние регуляторных пептидов на экспрессию маннозосодержащих мембранных структур лейкоцитов при остром стрессе // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 2000. № 4. С. 11-13.

6. Пат. 45149 А України МПК 6185/14/. Спосіб оцінки функціонального стану лейкоцитів. - Боброва Н.О., Кайдашев І.П. - № 2001063710; Заявл. 01.06.2001; Опубл.15.03.2002; Бюл. № 3.

7. Кайдашев І.П., Боброва Н.О., Важнича О.М., Мошко Л.В. Стан манозомістких мебранних структур лімфоцитів і гранулоцитів при гострому стресі. // Тези доповідей Міжнародної конференції ""Фізіологія та патологія імунітету, гемостазу та перекисного окислення ліпідів"". Полтава. 1997. С. 25.

8. Боброва Н.А., Соколенко В.Н. Влияние блокатора кальциевых каналов на состояние поверхностных гликопротеидов лейкоцитов человека // Матеріали конференції молодих вчених ""Фізіологія і патологія перекисного окислення, гемостазу та імуногенезу"". Полтава. 1999. С. 5-6.

9. Кайдашев И.П., Веснина Л.Э., Гейко О.А., Боброва Н.А., Квак О.В., Рябенко В.В., Ножинова О.А., Губенко И.Я., Соколенко В.Н., Чекалина Н.И., Запорожец Т.Н. Пептиды, представляемые молекулами главного комплекса гистосовместимости, как перспективные препараты иммунотропной терапии // Матеріали IV Української науково-практичної конференції з актуальних питань алергології та клінічної імунології "Імунологія та алергологія". Київ. 1999. № 3. С. 66.

10. Bobrova N.A., Nozhinova O.A., Kaydashev I.P. The influence of ?-adrenoreceptor agonists and antagonists on to functional state of leukocytes // Proc. the 3rd Annual Conference ""Alergy Asthma Clinical Immunology"". Lodz (Poland). 2001. P. 136.