Розробка програмного забезпечення для тривимірної реконструкції біологічних об’єктів. Встановлення закономірностей морфогенезу надниркових залоз в умовах застосування імуностимулюючого препарату тимогену та після тимектомії в різних вікових групах.
Аннотация к работе
В останні десятиліття все більш зростає зацікавленість до пізнання ролі морфофункціональних змін у надниркових залозах як важливій ланці ендокринних органів, що відіграють значну роль у загальному ансамблі компенсаторно-пристосувальних реакцій усього організму. В умовах усезростаючої урбанізації, посилення стресових впливів на організм людини, вивчення адаптаційних змін у надниркових залозах, встановлення морфофункціональних зрушень у цих органах з метою їх корекції й досягнення оптимального рівня функціонування набуває все більшого значення. Численними експериментальними даними встановлено, що наднирки знаходяться в антагоністичних відносинах з тимусом (Чеснокова В.М., Хмельницкий О.К. и соавт., 1989). Важливість вивчення морфофункціонального стану надниркових залоз в умовах зміненого імунного статусу зумовлює актуальність цього дослідження. Встановити закономірності морфогенезу надниркових залоз в умовах застосування імуностимулюючого препарату тимогену та після тимектомії в різних вікових групах та при різних строках спостереження.Контролем до цієї групи були тварини, яким внутрішньоочеревинно вводили фізіологічний розчин в еквівалентних до тимогену обємах протягом 10 днів. Площа сітчастої зони коркової речовини надниркових залоз при тимектомії у статевонезрілих щурів помітно збільшується щодо контролю в усіх строках спостереження, проте максимальні показники реєструються також на 30-ту добу спостереження - показник відхилення від контролю на 38,16% (Р<0,05) вищий за контрольні значення. Показники площі ядер адренокортикоцитів сітчастої зони коркової речовини надниркових залоз значно більші за контрольні, починаючи вже з 7-ї доби спостереження, максимальна різниця між значеннями дослідних та контрольних тварин відзначається на 15-ту добу спостереження і відхилення щодо контролю становить 25,78%. Кількість ядер адренокортикоцитів на 1000 мкм2 сітчастої зони коркової речовини наднирків менша від показників контролю в статевонезрілих тварин протягом усіх строків спостереження, але максимальні відмінності фіксуються на 30-й день спостереження і відрізняються від контролю на 23,16%. Кількість ядер адренокортикоцитів на 1000 мкм2 зменшується щодо контролю вже на 7-му добу спостереження на 15,80% (Р<0,05), на 30-ту добу максимальні відмінності - 20,31% (Р<0,05), у кінцевих строках різниця між показниками дослідних та контрольних груп зникає.За даними тривимірної реконструкції надниркових залоз за серійними гістологічними зрізами встановлено нові особливості будови наднирків: мозкова речовина, як правило, зміщена по повздовжній осі до одного з полюсів, у деяких випадках мозкова речовина може сягати зовнішньої сполучнотканинної капсули, її обємна частка не перевищує 10% від обєму всієї залози. При аналізі обємних часток зон коркової речовини встановлено, що пучкова зона займає 60-70%, тоді як клубочкова та сітчаста зони коркової речовини 16 - 20% та 14-19% відповідно. Встановлено, що при тимектомії збільшення обєму залози відбувається переважно за рахунок збільшення обємної частки пучкової зони та, у меншій мірі, за рахунок обєму сітчастої зони коркової речовини. За даними морфометрії встановлено макро-та мікроморфометричні показники надниркових залоз, що змінювалися під дією тимектомії: абсолютна та відносна маса, обєм, абсолютна та відносна площа пучкової та сітчастої зон коркової речовини, площа ядер адренокортикоцитів пучкової та сітчастої зон коркової речовини, кількість ядер на 1000 мкм2 вищевказаних ділянок коркової речовини. На світлооптичному рівні після тимектомії спостерігається потовщення зовнішньої сполучнотканинної капсули, збільшення видимих розмірів адренокортикоцитів пучкової та сітчастої зон коркової речовини надниркових залоз.
План
Основний зміст роботи
Вывод
Морфофункціональний стан надниркових залоз при імуносупресіїї характеризується збільшенням їх функціональної напруги, що супроводжується зростанням ряду показників морфометричних параметрів органів. Стимуляція імунітету, навпаки, супроводжується зменшенням функціональної активності й морфометричні показники при цьому впливі менші за показники контрольних груп. Вказані зміни були характерними в групах статевонезрілих та статевозрілих щурів практично в усіх строках після тимектомії або закінчення введення тимогену. У групі старих тварин достовірні відміни від контролю спостерігалися лише на ранніх строках спостереження.
За даними тривимірної реконструкції надниркових залоз за серійними гістологічними зрізами встановлено нові особливості будови наднирків: мозкова речовина, як правило, зміщена по повздовжній осі до одного з полюсів, у деяких випадках мозкова речовина може сягати зовнішньої сполучнотканинної капсули, її обємна частка не перевищує 10% від обєму всієї залози. Встановлено відсоткове співвідношення обємних часток зовнішньої сполучнотканинної капсули, зон коркової та мозкової речовини в цілісному органі. У наднирку значна обємна частка припадає на пучкову зону (56 - 63%), тоді як клубочкова зона складає 16 - 20% і сітчаста 12 - 13%. При аналізі обємних часток зон коркової речовини встановлено, що пучкова зона займає 60-70%, тоді як клубочкова та сітчаста зони коркової речовини 16 - 20% та 14-19% відповідно. Встановлено, що при тимектомії збільшення обєму залози відбувається переважно за рахунок збільшення обємної частки пучкової зони та, у меншій мірі, за рахунок обєму сітчастої зони коркової речовини.
За даними морфометрії встановлено макро- та мікроморфометричні показники надниркових залоз, що змінювалися під дією тимектомії: абсолютна та відносна маса, обєм, абсолютна та відносна площа пучкової та сітчастої зон коркової речовини, площа ядер адренокортикоцитів пучкової та сітчастої зон коркової речовини, кількість ядер на 1000 мкм2 вищевказаних ділянок коркової речовини. Зміна морфометричних параметрів клубочкової зони коркової речовини та мозкової речовини при зазначених впливах, навпаки, не зафіксовано. Причому, максимум відмін від контролю для більшості морфометричних показників встановлено на 30 добу спостереження: показник відхилення для маси наднирків становив 66,32% для статевонезрілих та 40,40% для статевозрілих, обєм збільшився на 48,40% та 30,05% відповідно. Площа пучкової зони коркової речовини в статевонезрілих щурів мала максимальні показники відміни від контролю на 30 добу спостереження - 45,91%, в статевозрілих - 24,59%. В старих тварин - 10,87% на 7 добу після тимектомії.
На світлооптичному рівні після тимектомії спостерігається потовщення зовнішньої сполучнотканинної капсули, збільшення видимих розмірів адренокортикоцитів пучкової та сітчастої зон коркової речовини надниркових залоз. На гістопрепаратах відмічено появу в статевонезрілих тварин клітин з гігантськими ядрами, гіпертрофованих адренокортикоцитів у стадії декомпенсації, адренокортикоцитів, що гинуть, збільшення кровонаповнення судин мікроциркуляторного русла та їх виразності.
При ультрамікроскопічному дослідженні наднирків тимектомованих тварин встановлено збільшення видимих розмірів ядер адренокортикоцитів, розширення капілярів, збільшення кількості та розмірів мітохондрій. Спостерігається також зменшення кількості ліпідних включень у цитоплазмі адренокортикоцитів та більш розвинутий щодо контролю гладкий ендоплазматичний ретикулум.
Зменшення вказаних морфометричних показників надниркових залоз у статевонезрілих та статевозрілих щурів протягом усіх термінів спостереження. У тварин старечого віку, навпаки, відміни від контрольних морфометричних показників фіксувалися лише не ранніх строках спостереження - 7-му та 15-ту добу. Так, зменшення маси надниркових залоз становило 33,32% у статевонезрілих та 27,49% у статевозрілих, у старих тварин цей показник достовірно відрізнявся лише на 7-му та 15-ту добу на 13,4% та 11,19% відповідно. Показники площі пучкової та сітчастої зон були достовірно менші за контрольні у групах статевонезрілих та статевозрілих тварин протягом усіх строків спостереження за максимумом виразності відмін від контролю на 30-ту добу - 31,3% (статевонезрілі) та на 7-му добу - 17,7% (статевозрілі).
На світлооптичному рівні при введенні тимогену встановлено зменшення товщини пучкової та клубочкової зон коркової речовини, видимої площі адренокортикоцитів та їх ядер у даних зонах наднирків, зменшення кровонаповнення та виразності капілярів кровоносного русла; потоншення зовнішньої сполучнотканинної капсули. На ультрамікроскопічному рівні при введенні тимогену встановлено зменшення щодо контролю розмірів та зміну форми ядер адренокортикоцитів, зменшення кількості й розмірів мітохондрій; помірний щодо контролю розвиток гладкого ендоплазматичного ретикулуму, появу великої кількості ліпідних включень, що займають значну площу цитоплазми адренокортикоцитів.
За даними дискримінантного аналізу, найбільш значний вплив на морфометричні показники наднирків щурів тимектомія та ведення тимогену здійснювали у випадку зі статевонезрілими та дорослими тваринами на 30-ту добу спостереження, у старих тварин достовірний вплив фіксувався тільки на 7-му - 15-ту добу спостереження.
Практичні рекомендації
Введення в організм імуносупресивних або імуностимулюючих препаратів супроводжується зміною морфофункціонального стану надниркових залоз. У звязку з цим у лікувальній практиці при викоркової речовинистані цих засобів бажано контролювати стан надниркових залоз.
При оперативному видаленні тимуса за показаннями в статевонезрілих, статевозрілих та навіть в осіб у віці виражених старечих змін необхідно звертати увагу на можливість збільшення гормональної активності надниркових залоз, яку, можливо, треба буде коректувати.
Оскільки за даними нашого дослідження, збільшення морфометричних показників надниркових залоз при імуносупресивних станах відбувається переважно за рахунок пучкової зони коркової речовини наднирка, корекції потребує в першу чергу глюкокортикоїдна функція залози.
Отримані дані можна рекомендувати до використовування в науковій та практичній роботі анатомів, ендокринологів, імунологів, онкологів, хірургів та інших спеціалістів, у практиці яких зустрічаються захворювання, що супроводжуються порушеннями імунологічного статусу.
Список литературы
1. Овчаренко В.В. Використання компютерних методів морфометрії в експерименті по вивченню морфофункціонального стану надниркових залоз. // Український морфологічний альманах. - 2003. - Том 1, № 1. - С. 46-47.
2.Овчаренко В.В. Електронно-мікроскопічне дослідження морфофункціонального стану надниркових залоз після введення тимогену тваринам в експерименті. // Український медичний альманах. - 2004. - Том 7, № 2. - С. 131-133.
3.Овчаренко В.В. Ультрамікроскопічні зміни в корі надниркових залоз щурів під впливом тимектомії. // Український медичний альманах. - 2003. - Том 6, №2. - С. 174-176.
4.Овчаренко В.В. Органометричні показники надниркових залоз щурів при тимектомії та застосуванні препарату тимогену. // Український медичний альманах. - 2004. - Том 7, № 1. - С. 120-122.
5.Ультрабудова органів імунної та ендокринної систем в умовах імуностимуляції. Ковешніков В.Г., Кащенко С.А., Болгова О.С., Овчаренко В.В., Нужна О.К. // Biomedical and Biosocial Anthropology. - 2004. - № 2. - С. 165-167. (Здобувачем здійснена та частина теоретичної та практичної роботи, що стосується надниркових залоз).
6.Кащенко С.А., Болгова Е.С. Овчаренко В.В. Динамика изменений в щитовидных железах, надпочечниках и плечевых костях крыс в эксперименте // Зб. наук. праць III Національного конгресу АГЕТ (21-23 жовтня 2002, Київ). - Тернопіль: Укрмедкнига. - 2002. - С. 128-129. (Здобувачем здійснена та частина теоретичної та практичної роботи, що стосується надниркових залоз).
Патенти та позитивні рішення за темою дисертації.
1.Пінцет для тимектомії (деклараційний патент України № 64156А, 2004).
2.Компютерна програма для морфометричних досліджень “Morpholog” (свідоцтво про реєстрацію авторського права №9604).
3.Пристрій для визначення обєму невеликих біологічних обєктів (позитивне рішення про видачу держпатенту №2003031962).