Сшивка фрагментов дезоксирибонуклеиновой кислоты по одноименным и разноименным "липким концам" и коннекторным методом. Организация генов про- и эукариот. Определение нуклеотидной последовательности (секвенирование) ДНК. Подходы к клонированию ДНК.
Аннотация к работе
1. Конструирование рекомбинантных ДНК 2. Особенности организации генов про- и эукариот 3. Определение нуклеотидной последовательности (секвенирование) ДНК 4. К гену, кодирующему белок-рецептор CD4, подшили другой ген, который обеспечивает синтез растительного белка рицина. Попадая в клетку, он блокирует синтез белка в цитоплазме, тем самым убивая ее. Та его часть, которая соответствует белку-рецептору, обеспечивает строго специфическое связывание химеры с клетками, на поверхности которых содержится вирусный белок CD4. Другой подход к борьбе с ВИЧ-инфекцией основан на способности некоторых вирусных белков (Tat и Rev), чрезвычайно важных для размножения ВИЧ в клетках, специфически связываться с определенными участками молекулы вирусной РНК. Однако нет надежных способов доставки и обеспечения долгого функционирования химерных конструктов в целом организме. Впервые такие эксперименты были выполнены в 1972 году Полем Бергом в Стенфордском университете, США.