Розробка технології отримання біологічно активної добавки з антиамілолітичною активністю. Характеристика інгібітора панкреатичної амілази. Визначення кінетичних параметрів реакції інгібування ферменту з полісахаридною матрицею в результаті іммобілізації.
Аннотация к работе
ТЕХНОЛОГІЯ БАД, ЯКІ МІСТЯТЬ ІНГІБІТОРИ АМІЛОЛІТИЧНИХ ФЕРМЕНТІВРобота виконана в Одеській національній академії харчових технологій Науковий керівник-кандидат технічних наук, доцент, Крусір Галина Всеволодівна, Одеська національна академія харчових технологій, кафедра харчової хімії, доцент кафедри. Захист відбудеться 12 листопада 2009 р. о 1030 годині на засіданні спеціалізованої вченої ради Д 41.088.02 в Одеській національній академії харчових технологій за адресою: 65039, м. З дисертацією можна ознайомитися в бібліотеці Одеської національної академії харчових технологій за адресою: 65039, м.Для профілактики прогресування цих захворювань, разом з медикаментозною терапією, населенню необхідно вживати функціональні продукти харчування (ФПХ) і біологічно активні добавки (БАД), які здатні знижувати або регулювати рівень глюкози в крові. Робота відповідає тематиці досліджень проблемної науково-дослідної лабораторії Одеської національної академії харчових технологій 1/06-П «Розробка біотехнологічних процесів цільового спрямованого регулювання функціональних, фізіологічних і технологічних властивостей харчових продуктів і БАД» (наказ Міністерства освіти і науки України № 654 від 16.11.2005 р., № держреестрації 0106U001445); 1/09-П «Біополімери рослин як обєкти хімічної та біотехнологічної модифікації» (наказ Міністерства освіти і науки України № 1043 від 17.11.2008 р., № держреестрації 0109U000397); та виконана згідно з держбюджетними науково-дослідними темами кафедри харчової хімії Одеської національної академії харчових технологій «Скринінг рослинної сировини на наявність антиамілолітичної та лізоцимної активностей» (2007 р.); «Характеристика антиамілолітичної активності біополімерних складових рослинної сировини» (2008 р.). Метою роботи є розробка технології БАД, що містить інгібітор панкреатичної амілази з борошенець вівса, іммобілізований на полісахаридній матриці, для лікувального та лікувально-профілактичного харчування. Для досягнення поставленої мети було визначено основні завдання дослідження: - провести скринінг рослинної сировини на вміст інгібітору панкреатичної амілази; На підставі отриманих результатів розроблено технологію комплексної переробки борошенець вівса з одержанням БАД, що містить інгібітор панкреатичної амілази, а також розроблено, затверджено та зареєстровано в Держспоживстандарті України нормативну документацію на БАД «Аміл-інг», що містить інгібітор панкреатичної амілази (ТУ, ТІ).У першому розділі «Інгібітор панкреатичної амілази як інгредієнт функціонального харчування» розглянуто рослинні джерела інгібітору панкреатичної амілази, механізм інгібування панкреатичної амілази, хімічні й біотехнологічні способи його вилучення із сировини; використання рослинного інгібітору у складі біологічно активних добавок і продуктів харчування, а також застосування у медицині. Описано методи виділення інгібітору панкреатичної амілази з борошенець вівса з використанням афінної хроматографії, характеристики фізико-хімічних властивостей, кінетичного інгібування панкреатичної амілази. У третьому розділі «Виділення і характеристика інгібітору панкреатичної амілази» результати досліджень зі скринінгу рослинної сировини на вміст інгібітору панкреатичної амілази показали, що максимальну інгібіторну дію по відношенню до панкреатичної амілази проявляють екстракти вівса і вторинного продукту його переробки - борошенець вівса, що визначає їх потенційну перспективність як сировинних джерел вилучення інгібітору панкреатичної амілази. У четвертому розділі «Іммобілізація інгібітору панкреатичної амілази» вивчено умови комплексоутворення інгібітор панкреатичної амілази-полісахарид, фізико-хімічні показники іммобілізованого інгібітору, кінетичні параметри інгібування, дана характеристика білкових складових, як екстракту з борошенець вівса, так і іммобілізованого препарату. Більш значне осадження інгібітору з екстракту в порівнянні з осадженням інгібітору з його водного розчину може, зокрема, пояснюватися більшою концентрацією сумарного білка в екстракті, що сприяє полегшенню міжмолекулярних контактів між білком і поліелектролітом, а також можливим співосадженням інгібітору з іншими білками екстракту.На основі теоретичних та експериментальних досліджень розроблено технологію виробництва БАД з інгібіторною активністю відносно панкреатичної амілази. Очищений за допомогою афінної хроматографії інгібітор є мономерним, його питома інгібіторна активність складає 26 ІО/мг білка, молекулярна маса - 25,11 КДА, РН оптимум - 5,5 при температурі (37±2) ЄС, термооптимум - (37±2) ЄС. Показано, що білкова глобула інгібітору рослинного походження є сферичною і за амінокислотним складом інгібітор борошенець вівса подібний до інгібіторів з зерна пшениці, проса та ячменю і містить необхідну кількість аргініну, лізину і триптофану для прояву інгібіторної активності.