Анализ относительного содержания флуорофоров в хлороформном экстракте липофусциновых гранул ретинального пигментного эпителия отдельных донорских глаз человека. Разработка способа получения монослоя нативных клеток ретинального пигментного эпителия.
Аннотация к работе
СПЕКТРАЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ФЛУОРОФОРОВ ЛИПОФУСЦИНОВЫХ ГРАНУЛ РЕТИНАЛЬНОГО ПИГМЕНТНОГО ЭПИТЕЛИЯ В ЭКСПЕРИМЕНТЕРабота выполнена в Федеральном государственном бюджетном учреждении «Межотраслевой научно-технический комплекс «Микрохирургия глаза» имени академика С.Н. Научные руководители: доктор медицинских наук Борзенок Сергей Анатольевич доктор биологических наук, профессор, академик РАН Островский Михаил Аркадьевич Официальные оппоненты: Акопян Владимир Сергеевич доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой офтальмологии факультета фундаментальной медицины МГУ им. Защита состоится «4» февраля 2013 г. в 14 часов на заседании диссертационного совета по защите докторских диссертаций Д.208.014.01 при ФГБУ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБУ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад.Методом высокоэффективной жидкостной хроматографии провести анализ относительного содержания флуорофоров в хлороформном экстракте липофусциновых гранул ретинального пигментного эпителия отдельных донорских глаз человека. Провести сравнительный анализ флуоресцентных характеристик липофусциновых гранул, выделенных из клеток ретинального пигментного эпителия отдельных кадаверных глаз человека без патологии и с наличием клинических признаков возрастной макулярной дегенерации. Впервые проведенный сравнительный анализ спектральных характеристик флуорофоров липофусциновых гранул клеток ретинального пигментного эпителия, выделенного из отдельных кадаверных глаз доноров различного возраста с наличием и без макулярной патологии показал, что в онтогенезе и при наличии возрастной макулярной дегенерации происходит изменение соотношения различных флуорофоров и флуоресцентных свойств липофусциновых гранул в виде накопления продуктов окисления и деградации флуорофора А2Е (ОХУА2Е), что ведет к сдвигу максимума спектра флуоресценции в коротковолновую область. Впервые при исследовании образцов хлороформных экстрактов из липофусциновых гранул ретинального пигментного эпителия, выделенного из отдельных кадаверных глаз человека, так же, как и при ранее исследованных суммарных хлороформных экстрактов из липофусциновых гранул, показано, что флуорофор А2Е не является основным в спектре флуоресценции липофусциновых гранул и что значительной флуоресценцией обладают окисленные формы А2Е. Впервые разработанный оригинальный способ получения клеток ретинального пигментного эпителия из отдельных кадаверных глаз человека, отличающийся предварительной фиксацией водным нейтрализованным раствором формалина, позволяет сохранить архитектонику слоя и ультраструктуру клеток пигментного эпителия в процессе отделения сетчатки и адекватно оценить состояние ретинального пигментного эпителия, что дает возможность исследовать индивидуальные образцы клеток, выделенных из различных участков глазного дна.