Методы рецепторного анализа in vitro с использованием тканей, клеточных гомогенизатов или мембранных препаратов. Инкубация в пробирках и ячейковых планшетах. Анализ близкой сцинтилляции, нерадиоактивный близкий анализ. Флуоресцентный рецепторный анализ.
Аннотация к работе
К концу 50-х - началу 60-х гг. XX в. было обращено внимание на зависимость фармакологической активности от таких физических факторов, как степень измельчения и явление полиморфизма, а также от технологических процессов получения ЛС. Последние по результатам аналитического контроля соответствовали в одинаковой степени требованиям фармакопеи (ФС), но различались по фармакологическому эффекту. Установить причину такого явления можно только проведением биофармацевтических и фармакокинетических исследований. Первая (биофармацевтическая) включает исследование исходного биологически активного вещества и создание на его основе готовой лекарственной формы. Третья стадия (фармакодинамическая) включает исследование взаимодействия ЛС с рецептором и влияние на регуляторные системы. Проведение фармакокинетических исследований возможно только на основе применения современных методов биофармацевтического анализа, позволяющих проследить процесс всасывания и распределения ЛС в органах и тканях. Биофармацевтические и фармакокинетические исследования позволяют решить ряд практических задач, например, дать рекомендации по изменению физических или химических свойств ЛС для повышения их фармакологической активности; обосновать оптимальный выбор биофармацевтических факторов при производстве тех или иных ЛФ. Определение Рецепторное взаимодействие используется в методике, в которой меченый компонент, лиганд, который связывается с рецептором, используется, чтобы обнаружить этот рецептор. Обычно лиганды помечают радиоактивными изотопами, такими как 3H, 125I, 35S и т.д., но мечение флуоресцирующими фрагментами также возможно. Препараты ткани инкубируют с меченым лигандом, который имеет высокий аффинитет к целевому рецептору. In vivo рецепторное связывание может быть исследовано с использованием позитронной эмиссионной томографии или монофотонной эмиссионной компьютерной томографии (SPECT). На сегодняшний день, открыты и исследованы три больших класса рецепторов, локализованные на клеточной мембране и один класс цитозольных рецепторов. 1. Большое число членов каждого из этих рецепторных семейств изучались как нейромедиаторы с помощью анализа рецепторного связывания и рецепторных методов, описаны сотни различных молекулярных мишеней для них [4]. Методы рецепторного анализа in vitro с использованием тканей, клеточных гомогенизатов или мембранных препаратов Ткани и препараты Ткани, используемые для рецепторного анализа, например, ткани отделов мозга или органов, культивированные клетки (клеточные линии или первичные культуры) или кровяные клетки, которые несут исследуемый рецептор, нативный или привитый искусственно, получают от специфических видов (чаще всего человеческие). Для SPA используются как поливинилтолуольные пузырьки, наполненные сцинтиллянтом, так и Flashplates или Scintiplates, 96-ячейковые планшеты со сцинтиллянтом, защищенные инертным покрытием. VICTOR 3 TM от компании PerkinElmer.