Оптимизация технологии выращивания штамма женьшеня на модифицированных питательных средах с получением селективной клеточной линии. Оценка возможности использования растительных клеток in vitro как модели для оценки влияния наноматериалов на биосистемы.
Аннотация к работе
АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наукДиссертационная работа выполнена в ГБОУ ВПО Санкт-Петербургская государственная химико-фармацевтическая академия Минздравсоцразвития России Научный руководитель: доктор фармацевтических наук, профессор Официальные оппоненты: доктор фармацевтических наук, профессор Защита состоится 22 ноября 2011 г. в 14.00 часов на заседании Диссертационного Совета Д. 208.088.01 при ГБОУ ВПО Санкт-Петербургская государственная химико-фармацевтическая академия Минздравсоцразвития России (197376, Санкт-Петербург, ул. С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГБОУ ВПО Санкт-Петербургской государственной химико-фармацевтической академии Минздравсоцразвития России по адресу: 197277, Санкт-Петербург, пр.Решение проблемы бесперебойного обеспечения фармацевтической промышленности растительным сырьем возможно благодаря применению метода культуры изолированных органов, тканей и клеток высших растений, который характеризуют следующие преимущества: возможность получения экологически чистой биомассы ценных и редких лекарственных растений, не произрастающих на территории РФ, или имеющих ограниченный ареал и подлежащих охране; осуществлять направленный биосинтез биологически активных веществ (БАВ), а также трансформировать дешевые предшественники в ценный продукт; возможность создавать принципиально новые целевые продукты, превосходящие традиционные по своим показателям качествам (Носов А.М., 1991, 2011, Лутова Л.А., 2003). Оптимизировать технологию выращивания штамма женьшеня на модифицированных питательных средах с получением селективной клеточной линии. Научно обосновать и экспериментально разработать способ получения водных извлечений из биомассы селективной линии как матрицы для получения новых лекарственных средств (ЛС). Разработать состав и технологию жидкой лекарственной формы - капель для приема внутрь на основе водного извлечения. Научно обоснована и экспериментально разработана технология водного извлечения из биомассы селективной клеточной линии женьшеня, примененного в качестве матрицы для получения новых лекарственных средств.Приведена номенклатура капель для приема внутрь и трансдермальных терапевтических систем (ТТС), в том числе пленок на основе лекарственного растительного сырья (ЛРС).В главе описаны методы и приборы, использованные для анализа биомассы женьшеня, водных извлечений из биомассы женьшеня и лекарственных средств на их основе. Для выявления анатомо-морфологических особенностей селективной клеточной линии женьшеня использовали просвечивающий электронный микроскоп JEM-100C (JEOL, Япония). Для идентификации, разделения и количественного определения основных БАВ - суммарной гликозидной фракции (СГФ), гликопептидного комплекса (ГПК) и водорастворимых полисахаридов (ВРП) использовали химические, спектральные и хроматографические методы анализа.Нами была изучена возможность получения селективной клеточной линии штамма женьшеня на питательной среде, в которой одновременно отсутствует нитрат аммония и стимулятор роста - кинетин. На протяжении 10-12 пассажей проводили отбор только тех клеток, рост которых на селективной среде не уступал или превосходил контроль по накоплению биомассы и содержанию основных действующих веществ. В результате была получена селективная клеточная линия женьшеня (СД) и дана ее характеристика. Анатомо-морфологическое исследование полученной клеточной линии показало, что культура на 90 % состоит из тонкостенных паренхимных клеток с целлюлозными оболочками, на 3-5% из образовательных, меристематических клеток и небольшого числа, не более 1-2%, слабо лигнифицированных проводящих трахеид с характерными простыми или окаймленными порами и очень длинными тонкостенными волокнами. Результаты проведенного товароведческого анализа биомассы селективной клеточной линии женьшеня представлены в табл.Объектом наших исследований являлись УНТ - смешанный наноуглеродный материал фуллероиного типа, подвергнутый дополнительной глубокой очистке (Алексеев О.В. и др. Вариант 1 - вода очищенная с УНТ в концентрации 10-4 г/л; Вариант 2 - вода очищенная с УНТ в концентрации 10-5г/л; Вариант 3 - вода очищенная с УНТ в концентрации 10-6 г/л; В процессе роста клеток СД на питательной среде с УНТ также не выявлены изменения в каталитической активности основных ферментов-антиоксидантов, характерных для штамма женьшеня (Кириллова Н.В., 2005).БАВ биомассы женьшеня СД имеют полярную природу, поэтому была разработана технология водных извлечений из биомассы женьшеня. При разработке оптимальных условий проведения стадии экстрагирования ЛРС были изучены технологические свойства биомассы женьшеня СД в сравнении с биомассой, выращенной на стандартной питательной среде (КД). Результаты анализа технологических свойств биомассы женьшеня представлены в таблице 4.